一种同时检测治疗儿童咳嗽的中药四种成分含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测治疗儿童咳嗽的中药四种成分含量的方法，所述治疗儿童咳嗽的中药由牛蒡子、桑叶、川贝母、薄荷、板蓝根、荆芥穗、枳壳、前胡、紫苑、甘草十味药材制成，所述四种成分为甘草苷、柚皮苷、新橙皮苷和牛蒡苷，该方法包括将待测样品用提取溶剂提取后上高效液相色谱仪进行检测的步骤。本发明专利技术能同时检测出四种物质的含量，所采用的色谱条件分离效果好，出峰时间短，检测结果重现性好，准确度高，本发明专利技术使中药的质量更加可控。

A method for simultaneous determination of four components of traditional Chinese medicine for children's cough

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测治疗儿童咳嗽的中药四种成分含量的方法
本专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种同时检测治疗儿童咳嗽的中药中四种成分含量的方法。
技术介绍
CN101607032A公开了一种治疗儿童咳嗽的中药，它由牛蒡子、桑叶、川贝母、薄荷、板蓝根、荆芥穗、枳壳、前胡、紫苑、甘草十味中药材制成，该中药用于治疗急性气管-支气管炎所致小儿外感咳嗽，目前正在由健民药业集团股份有限公司开展新药临床研究，属于六类中药新药。目前对该中药的质量控制主要是通过检测牛蒡苷的含量，但是对单一成分的定量检测很难真正控制中药的产品质量，无法彻底杜绝中药掺假、伪劣现象，也不能客观反映和评价中药质量的一致性。因此，迫切需要建立一种针对该中药的新的质量控制方法，以建立可溯源的、与临床疗效高度关联的全程质量控制体系。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有的治疗儿童咳嗽的中药含量测定指标单一的缺陷，提供一种同时检测甘草苷、柚皮苷、新橙皮苷和牛蒡苷四种成分含量的方法。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术手段：一种同时检测治疗儿童咳嗽的中药四种成分含量的方法，所述治疗儿童咳嗽的中药由牛蒡子、桑叶、川贝母、薄荷、板蓝根、荆芥穗、枳壳、前胡、紫苑、甘草十味药材制成，所述四种成分为甘草苷、柚皮苷、新橙皮苷和牛蒡苷，所述检测方法包括将待测样品用提取溶剂提取后上高效液相色谱仪进行检测的步骤，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为260～300nm，所述高效液相色谱仪的固定相为DikmaInspirePhenyl-hexyl色谱柱，流动相A为含0.1～1％溴乙烷的乙腈溶液，流动相B为0.1～0.5％磷酸水溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5～2ml/min，柱温为25～35℃。优选地，所述提取溶剂为75％甲醇。优选地，所述紫外检测器的设定检测波长为280nm。优选地，所述流动相A为含0.1％溴乙烷的乙腈溶液，所述流动相B为0.2％磷酸水溶液。优选地，所述梯度洗脱的时间为40min，分为4个时间段，各时间段流动相B的体积变化为：0～20min，流动相B80％；20～30min，流动相B80～50％；30～35min，流动相B50～80％；35～40min，流动相B80％。具体洗脱程序见表1。表1梯度洗脱程序时间min流动相A(％)流动相B(％)0～20208020～3020--5080--5030～3550--2050--8035～402080优选地，所述流速为1.0ml/min。优选地，所述柱温为30℃。本专利技术中凡是涉及到的溶液浓度均为体积浓度。本专利技术的有益效果是：采用本专利技术提供的方法能同时检测出治疗儿童咳嗽的中药中四种物质的含量，检测效率高，速度快，费用低，所采用的色谱条件分离效果好，干扰少、出峰时间短、峰面积大，检测结果重现性好，准确度高。采用该方法能更加全面地控制中药内在质量，客观反映中药质量的一致性，彻底杜绝中药掺假、伪劣现象，更有利于对中药生产的各个阶段包括药材投料等环节进行监控，从而建立可溯源的、与临床疗效高度关联的全程质量控制体系。附图说明图1是四种混合对照品的HPLC图谱。图2是实施例1流动相1得到的高效液相色谱图。图3是实施例1流动相2得到的高效液相色谱图。图4是实施例1流动相3得到的高效液相色谱图。图5是实施例2采用XB-NH2色谱柱得到的高效液相色谱图。图6是实施例2采用DikmaInspirePhenyl-hexyl色谱柱得到的高效液相色谱图。具体实施方式下面通过具体实施例对本专利技术进行详细地说明。以下实施例中所用到的中药(商品名小儿宣肺止咳糖浆)由健民药业集团股份有限公司生产。处方：牛蒡子100g桑叶100g川贝母35g薄荷70g板蓝根85g荆芥穗70g枳壳70g前胡70g紫苑85g甘草50g制法：参照CN101607032A。试药：小儿宣肺止咳糖浆(批号：190701，由健民药业集团股份有限公司提供)；甘草苷对照品(供含测用，批号：111610-201607)；柚皮苷(供含测用，批号：110722-201815)、新橙皮苷(供含测用，批号：111857-201804)、牛蒡苷(供含测用，批号：110819-201611)，均购自中国食品药品检定研究院；乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，甲醇为分析醇，水为超纯水。实施例1流动相的选择样品溶液制备：取小儿宣肺止咳糖浆，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，用75％(体积)甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。仪器：Agilent1100型高效液相色谱仪系列(美国安捷伦科技公司，包括四元泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、Chemstation色谱工作站)；流动相1：乙腈为流动相A，水为流动相B；流动相2：乙腈为流动相A，0.2％(体积)磷酸水溶液为流动相B；流动相3：含0.1％(体积)溴乙烷的乙腈为流动相A，0.2％磷酸水溶液为流动相B。梯度洗脱条件：见表1。柱温：30℃；检测波长：280nm；流速：1.0ml/min；进样量：10ul色谱柱：C18色谱柱结果：由图2～4可看出，图2(流动相1)、图3(流动相2)中2号色谱峰(柚皮苷峰)存在明显得肩峰，说明该流动相分离效果不好，并且图2、图3的3号色谱峰(新橙皮苷峰)峰形也较差；而图4(流动相3)中2号和3号色谱峰的分离度和峰形较图1、图2有明显改善，因此最终选择流动相3。表2是三种流动相测得的各成分峰分离度。表2三种流动相得到的四种成分色谱峰分离度实施例2色谱柱的选择样品溶液制备：取本品摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，用75％甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。仪器：Agilent1100型高效液相色谱仪系列(美国安捷伦科技公司，包括四元泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、Chemstation色谱工作站)；流动相：含0.1％溴乙烷的乙腈为流动相A，0.2％磷酸水溶液为流动相B。梯度洗脱条件：见表1。柱温：30℃；检测波长：280nm；流速：1.0ml/min；进样量：10ul色谱柱1：AgilentXDB-C18色谱柱(250×4.6mm,5um)色谱柱2：XB-NH2(250×4.6mm,5um)色谱柱3：DikmaInspirePhenyl-hexyl(250×4.6mm,5um)结果：如图4、5、6所示，图4(色谱柱1)中的2号峰分离度不高；图5(色谱柱2)中杂质峰较多且四种成分的峰面本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种同时检测治疗儿童咳嗽的中药四种成分含量的方法，所述治疗儿童咳嗽的中药由牛蒡子、桑叶、川贝母、薄荷、板蓝根、荆芥穗、枳壳、前胡、紫苑、甘草十味药材制成，其特征在于：所述四种成分为甘草苷、柚皮苷、新橙皮苷和牛蒡苷，所述检测方法包括将待测样品用提取溶剂提取后上高效液相色谱仪进行检测的步骤，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为260-300nm，所述高效液相色谱仪的固定相为Dikma Inspire Phenyl-hexyl色谱柱，流动相A为含0.1～1％溴乙烷的乙腈溶液，流动相B为0.1～0.5％磷酸水溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5～2ml/min，柱温为25～35℃。/n

【技术特征摘要】
1.一种同时检测治疗儿童咳嗽的中药四种成分含量的方法，所述治疗儿童咳嗽的中药由牛蒡子、桑叶、川贝母、薄荷、板蓝根、荆芥穗、枳壳、前胡、紫苑、甘草十味药材制成，其特征在于：所述四种成分为甘草苷、柚皮苷、新橙皮苷和牛蒡苷，所述检测方法包括将待测样品用提取溶剂提取后上高效液相色谱仪进行检测的步骤，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为260-300nm，所述高效液相色谱仪的固定相为DikmaInspirePhenyl-hexyl色谱柱，流动相A为含0.1～1％溴乙烷的乙腈溶液，流动相B为0.1～0.5％磷酸水溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5～2ml/min，柱温为25～35℃。


2.如权利要求1所述同时检测治疗儿童咳嗽的中药四种成分含量的方法，其特征在于：所述提取溶剂为75％甲醇。


3.如权利要求1所述同时检测治疗儿童咳嗽的中药四种成分含量的...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊莉，吴木琴，任霞，向阳，王碧波，熊桓，杨颃，卢敏，陈鹏，余丽花，万哲，王涛涛，王丫头，
申请(专利权)人：健民药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42