S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法技术

本发明专利技术提供一种S‑2‑氨基‑2‑(2‑氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法。本发明专利技术采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件为：色谱柱：十八烷基键合硅胶柱；检测波长200‑240nm，流动相A：0.1‑0.5wt％磷酸二氢钾水溶液，流动相B为乙腈。本发明专利技术提供的检测方法能够实现主成分与已知杂质、以及多个未知杂质之间的有效分离，且本发明专利技术提供的方法经专属性、灵敏度等方法学研究及验证，发现本发明专利技术的方法灵敏、准确、重现性较好，能够用更为简便的方法实现对S‑2‑氨基‑2‑(2‑氯苯基)乙酸甲酯或其盐中更多杂质的定性和定量，为提高和更好地控制硫酸氢氯吡格雷产品的质量提供了可靠保障。

Test method for related substances in methyl s-2-amino-2 - (2-chlorophenyl) acetate or its salts

【技术实现步骤摘要】
S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法
本专利技术涉及化工原料检测
，尤其涉及一种S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法。
技术介绍
硫酸氢氯吡格雷(英文名：ClopidogerelBisulfate)，分子式：C16H16ClNO2S·H2SO4，分子量：419.90，是新型噻吩吡啶类药物，化学名为2-(2-氯苯基)-2-(6,7-二氢噻吩并[3,2-c]吡啶-5-基)乙酸甲酯硫酸氢盐，系新一代抗血小板药物，主要用于治疗动脉粥状硬化、急性冠脉综合症、预防冠脉内支架植入术后再狭窄和血栓性并发症等疾病。1998年，氯吡格雷首先在美国上市，随后进入欧洲以及加拿大、澳大利亚、新加坡等国家，在我国该药于2001年上市。大量临床实验表明，它具有药效显著、安全和耐受性强等优点，具有良好的市场前景。有关物质是在药物合成生产过程中带入的起始物料、中间体、副反应产物和降解杂质等，对有关物质进行检测可以对药物的质量和安全性进行控制。S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯是合成硫酸氢氯吡格雷的主要原料，是直接影响硫酸氢氯吡格雷产品的最终质量的重要因素。研发一种能够检测S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯中有关物质的分析方法，从源头上对原料的质量进行控制，对于提高硫酸氢氯吡格雷产品的质量以及提高患者用药安全性具有十分重要的意义。
技术实现思路
针对上述技术问题，本专利技术提供一种S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案是：一种S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件为：色谱柱：十八烷基键合硅胶柱；UV检测器，检测波长200-240nm；流动相A：0.1-0.5wt％磷酸二氢钾水溶液，流动相B为乙腈；洗脱方式为梯度洗脱。相对于现有技术，本专利技术提供的S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯、及其盐中有关物质的检测方法，采用十八烷基键合硅胶色谱柱，以0.1-0.5wt％磷酸二氢钾水溶液和乙腈作为流动相，通过高效液相色谱法以梯度洗脱的方式，能够实现主成分与合成主成分的原料2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸、以及多个未知杂质和主成分之间的有效分离，准确定性及定量检测S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯、及其盐中杂质情况，且本专利技术提供的方法经专属性、灵敏度等方法学研究及验证，发现本专利技术的方法灵敏、准确、重现性较好，能够用更为简便的方法实现对S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯、及其盐中更多杂质的定性和定量，为提高和更好地控制硫酸氢氯吡格雷产品的质量提供了可靠保障。本专利技术中有关物质是指在S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐的合成工艺中引入的或降解生成的杂质，包括2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸(CPG)。本专利技术中将S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐简称为SMA。优选的，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：0min，90-98％流动相A，10-2％流动相B；8min，90-98％流动相A，10-2％流动相B；8.1min，84％流动相A，16％流动相B；27min，84％流动相A，16％流动相B；27.1min，94％流动相A，6％流动相B；40min，90-98％流动相A，10-2％流动相B。更优选的，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：0min，94％流动相A，6％流动相B；8min，94％流动相A，6％流动相B；8.1min，94％→84％流动相A，6％→16％流动相B；27min，84％流动相A，16％流动相B；27.1min，84％→94％流动相A，16％→6％流动相B；40min，94％流动相A，6％流动相B。优选的梯度洗脱顺序，可以提高主成分与杂质峰之间的分离度和检测的灵敏度，使检测结果定量准确，且精密度高。优选的，流速为0.6-1.2mL/min，柱温为20-40℃，进样体积为10μL。更优选的，检测波长为220nm，流速为0.9mL/min，柱温为30℃。优选的检测条件可使S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中的主成分、未知杂质以及已知杂质之间达到更高的分离度，可以保证未知杂质的有效检出，从而达到有效准确控制制剂及原料中有关物质含量的目的。优选的，所述磷酸二氢钾水溶液的pH为3-6。更优选的，所述磷酸二氢钾水溶液的pH为3.5-4。优选的流动相A的pH值，可以减少谱带拖尾，改善峰形，从而有利于提高各组分之间的分离度。优选的，流动相A为0.136wt％磷酸二氢钾溶液。优选的流动相在不产生基线干扰的前提下，能够更好地分离S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中的杂质，利于有关物质的检出，并且有效改善峰形，使检测结果的准确度及精密度更高。优选的，所述色谱柱的规格为250*4.6mm，填料直径为5μm。更优选的，所述色谱柱为CAPCELLPAKC18，4.6*250mm，5μm。优选的色谱柱规格可以使各组分峰形、分离度及检测的灵敏度俱佳，且基线干扰较小，从而有利于S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐与杂质有效分离，且结果准确可靠，重复性好。优选的，所述供试品溶液的浓度为0.2mg/mL。优选的供试品浓度有利于使主成分及杂质的峰形更好，柱效高，积分更准确，从而有利于对供试品中杂质的含量进行更准确的计算。附图说明图1为实施例2中系统适用性项下系统适用性溶液的色谱图；图2为实施例2中专属性项下供试品溶液的色谱图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1以下实施例中SMA是指(S)-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯(2R,3R)-二羟基琥珀酸盐。材料与方法：仪器：高效液相色谱仪，紫外检测器，量瓶，电子天平。试剂：乙腈、磷酸二氢钾、2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸(CPG)。空白溶剂：94％流动相A+6％流动相B1.1溶液的配制杂质一级储备液的配制：称取CPG对照品约10.00mg置10ml容量瓶中，用空白溶剂溶解，定容，最后稀释制成每1mL中约含有1mg杂质CGP的一级贮备液。杂质二级储备液的配制：精密量取杂质CPG一级储备液1.0ml置100ml容量瓶中，用空白溶剂溶解，定容，最后稀释制成每1mL中约含有0.01mg的杂质CPG的二级储备液。杂质定位溶液：精密量取杂质CPG二级储备液2.0mL至100mL容量瓶中，用空白溶剂溶解并稀释至刻度，最后稀释制本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件为：/n色谱柱：十八烷基键合硅胶柱；/nUV检测器，检测波长200-240nm；/n流动相A：0.1-0.5wt％磷酸二氢钾水溶液，流动相B为乙腈；/n洗脱方式为梯度洗脱。/n

【技术特征摘要】
1.一种S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测，色谱条件为：
色谱柱：十八烷基键合硅胶柱；
UV检测器，检测波长200-240nm；
流动相A：0.1-0.5wt％磷酸二氢钾水溶液，流动相B为乙腈；
洗脱方式为梯度洗脱。


2.如权利要求1所述的S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：
0min，90-98％流动相A，10-2％流动相B；
8min，90-98％流动相A，10-2％流动相B；
8.1min，84％流动相A，16％流动相B；
27min，84％流动相A，16％流动相B；
27.1min，94％流动相A，6％流动相B；
40min，90-98％流动相A，10-2％流动相B。


3.如权利要求2所述的S-2-氨基-2-(2-氯苯基)乙酸甲酯或其盐中有关物质的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：
0min，94％流动相A，6％流动相B；
8min，94％流动相A，6％流动相B；
8.1min，84％流动相A，16％流动相B；
27min，84％流动相A，16％流动相B；
27.1min，94％流动相A，6％流动相B；
40min，94％流动相A，6％流动相B。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：李志伟，乔玲，毕海超，张子实，李响飞，李伟娇，刘亚平，李彬，
申请(专利权)人：河北科技大学，河北省地质环境监测院，
类型：发明
国别省市：河北;13