一种用于基因组DNA提取的试剂盒及其应用制造技术

本申请公开了一种用于基因组DNA提取的试剂盒及其应用。本申请试剂盒包括裂解液、红细胞裂解液；裂解液含20‑300mM Tris‑HCl、20‑100mM EDTA、0.3‑2M NaCl、0.5‑5％PEG8000和0.5‑10％Triton X‑100、SDS或吐温20；红细胞裂解液含10‑100mM Tris‑HCl、1‑50mM EDTA、10‑300mM NaCl和0.01‑0.2％Triton X‑100。本申请试剂盒，通过裂解液和红细胞裂解液优化，能有效去除多糖，结合酚，防止酚与DNA结合，解决粘稠和浑浊问题，适用于多种不同样本，提取的基因组DNA纯度和得量都能满足各种下游实验使用需求。

A kit for genomic DNA extraction and its application

【技术实现步骤摘要】
一种用于基因组DNA提取的试剂盒及其应用
本申请涉及基因组DNA提取
，特别是涉及一种用于基因组DNA提取的试剂盒及其应用。
技术介绍
核酸是一类非常重要的生物大分子，它在生物的繁衍、生长、发育、衰老和死亡等一系列的生命进程中都发挥着不可替代的作用，堪称生物界的“主宰”，现在已成为生物化学、分子生物学、遗传学、生命医学等多个生命科学领域的重要研究课题。因此，从众多纷繁复杂的生物大分子里提取出高质量、高纯度的核酸，是开展其他研究必不可少的第一步。DNA提取的原则包括：保证DNA一级结构的完整性；不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；将其他生物大分子，如蛋白质、多糖和脂类分子等，的污染应降低到最低程度；排除其它核酸分子，如RNA，的污染。目前，DNA提取的方法主要分为三种：酚氯仿抽提法、离心柱法、磁珠法。酚氯仿抽提法是通过苯酚、氯仿对蛋白质变性、抽提，然后通过有机试剂沉淀而得到DNA；优点是成本低、易实现；缺点是特殊样本DNA纯度偏低，酚氯仿试剂有毒，且需要离心机不断离心，提取大量样本时效率较低。离心柱法主要原本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于基因组DNA提取的试剂盒，所述试剂盒采用磁珠法对离体样本进行基因组DNA提取，所述离体样本为人组织样本、血细胞或唾液，其特征在于：所述试剂盒包括磁珠、裂解液、红细胞裂解液、结合液、清洗液1和清洗液2；/n所述裂解液中含有20-300mmol/L的Tris-HCl、20-100mmol/L的乙二胺四乙酸、0.3-2mol/L的NaCl、0.5％-5％的PEG8000，/n以及0.5％-10％的Triton X-100、SDS和Tween-20中的至少一种；/n所述红细胞裂解液中含有10-100mmol/L的Tris-HCl、1-50mmol/L的乙二胺四乙酸、10-300mmol/L...

【技术特征摘要】
1.一种用于基因组DNA提取的试剂盒，所述试剂盒采用磁珠法对离体样本进行基因组DNA提取，所述离体样本为人组织样本、血细胞或唾液，其特征在于：所述试剂盒包括磁珠、裂解液、红细胞裂解液、结合液、清洗液1和清洗液2；
所述裂解液中含有20-300mmol/L的Tris-HCl、20-100mmol/L的乙二胺四乙酸、0.3-2mol/L的NaCl、0.5％-5％的PEG8000，
以及0.5％-10％的TritonX-100、SDS和Tween-20中的至少一种；
所述红细胞裂解液中含有10-100mmol/L的Tris-HCl、1-50mmol/L的乙二胺四乙酸、10-300mmol/L的NaCl和0.01％-0.2％的TritonX-100。


2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述裂解液由100mmol/L的Tris-HCl、20mmol/L的乙二胺四乙酸、1.4mol/L的NaCl、1％的PEG8000和1％的Tween-20组成；
所述红细胞裂解液由30mmol/L的Tris-HCl、5mmol/L的乙二胺四乙酸、60mmol/L的NaCl和0.015％的TritonX-100组成。


3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述清洗液1中含有1-4mol/L的异硫氰酸胍或盐酸胍，以及40％-70％的无水乙醇。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述清洗液1由2mol/L的盐酸胍和50％的无水乙醇组成。


5.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述清洗液2中含有10-100mmol/L的NaCl和70％-80％的无水乙醇；
优选的，所述清洗液2由50mmol/L的NaCl和75％的无水乙醇组成。


6.一种用于磁珠法提取基因组DNA的裂解液，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：许明炎，张晓妮，沈广强，张生，
申请(专利权)人：深圳市海普洛斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44