一种提高D-酪氨酸生产效率的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高D‑酪氨酸生产效率的方法，属于生物工程技术领域。本发明专利技术通过分子生物学手段构建了一株双质粒共表达的重组菌，同时实现三种酶的高效表达，将L‑酪氨酸转化为D‑酪氨酸，并通过偶联辅酶再生系统，将NADP

A method to improve the production efficiency of D-Tyrosine

【技术实现步骤摘要】
一种提高D-酪氨酸生产效率的方法
本专利技术涉及一种提高D-酪氨酸生产效率的方法，属于生物工程

技术介绍
D-酪氨酸是一种非天然手性氨基酸，是多肽药物和抗肿瘤手性药物的重要中间体。以D-酪氨酸为手性前体可合成阿托西班、多肽、茴香霉素等物质，其中，阿托西班是一种保胎药；多肽在恶性肿瘤的治疗中具有特殊疗效；茴香霉素能够抗原虫、抗真菌、抗变形虫和抗肿瘤。目前，D-酪氨酸的合成方法主要包括化学拆分法、生物拆分法和酶转化法。化学拆分法面临拆分试剂贵、反应条件苛刻、产物收率低的问题。生物拆分法是利用普通变性杆菌细胞为生物催化剂，选择性降解D/L-酪氨酸中的L-酪氨酸来制备D-酪氨酸，但收率也极低。而酶转化法反应条件温和、立体选择性高、效率高，且方便快捷易操作，具有广阔的工业化开发前景。但目前有关酶转化法生产D-酪氨酸的报道较少，有文献利用奇异变形杆菌来源的L-氨基酸脱氨酶、嗜热共生细菌来源的D-氨基酸脱氢酶转化L-酪氨酸来生产D-酪氨酸，并利用稳定伯克霍尔德菌来源的甲酸脱氢酶来实现辅酶NADPH的再生。但该级联系统对L-酪氨酸的转化率较低本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生产D-酪氨酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌是以大肠杆菌为宿主，双质粒表达系统表达L-氨基酸脱氨酶、D-氨基酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶，所述双质粒包括pRSFDuet-1质粒和pACYCDuet-1质粒。/n

【技术特征摘要】
1.一种生产D-酪氨酸的重组菌，其特征在于，所述重组菌是以大肠杆菌为宿主，双质粒表达系统表达L-氨基酸脱氨酶、D-氨基酸脱氢酶、葡萄糖脱氢酶，所述双质粒包括pRSFDuet-1质粒和pACYCDuet-1质粒。


2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述pRSFDuet-1质粒用于表达L-氨基酸脱氨酶，所述pACYCDuet-1质粒用于表达D-氨基酸脱氢酶和葡萄糖脱氢酶。


3.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于，所述L-氨基酸脱氨酶选自奇异变形杆菌，所述D-氨基酸脱氢酶选自谷氨酸棒状杆菌，所述葡萄糖脱氢酶选自巨大芽孢杆菌。


4.根据权利要求1-3任一所述的重组菌，其特征在于，所述宿主为E.coliBL21(DE3)。


5.一种转化L-酪氨酸生产D-酪氨酸的方法，其特征在于，所述方法利用权利要求1-4任一所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘立明，王金辉，刘佳，宋伟，陈修来，高聪，罗秋玲，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32