一种单增李斯特菌特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及检测技术领域，具体而言，涉及一种单增李斯特菌特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用。该检测试剂盒包含正反向引物及探针、侧流层析试纸条；所述反向引物5'端用生物素进行标记；所述探针5'端用Fluorescein Isothiocyanate(FITC)标记，中间区域C碱基(距5'端至少30bp、距3'端至少15bp)用[THF]进行替换，3'端用C3‑spacer进行末端封闭。本发明专利技术使用RPA‑LFS(The isothermal recombinase polymerase amplification and the lateral flow strip)方法能够在不依赖仪器设备的非实验室环境下，实现实时、实地、即时的快速现场检测，且准确率高。

A forward and reverse primer, probe, detection kit and its application for Listeria monocytogenes

【技术实现步骤摘要】
一种单增李斯特菌特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用
本专利技术涉及检测
，尤其涉及一种单增李斯特菌特异性正反向引物及探针、检测试剂盒及其应用。
技术介绍
单核细胞增生性李斯特菌(L.monocytogenes)简称单增李斯特菌，是革兰氏阳性菌。单核细胞增生李斯特氏菌是一种人畜共患病的病原菌，它能引起人、畜的李氏特病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多，其致死率高达44％。它广泛存在于自然界中，食品中存在的单增李氏菌对人类的安全具有危险，该菌可广泛存在于多种食品中,如水产品、肉制品、奶制品、蔬菜等,在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，且能引起各种食物间的交叉感染，被称为“冰箱杀手”。本研究主要通过不同浓度的灭活菌液污染当地购买新鲜牛奶，制备待检测模板以达到鉴别单增李斯特菌和其它易感染致病菌目的，如金黄色葡萄球菌(S.aureus)、肠致病性埃希氏菌(E.coliO157)、蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、沙门氏菌(S.enteritidis)等。现有的通常对于食源性单增李斯本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种单增李斯特菌特异性正反向引物及探针，其特征在于，其正向引物和反向引物分别为LM-F、LM-R，且序列分别为/nCTCGCTCTAGGTATCTTTGGGATTTACTAC、/nBiotin-GTCCGAATATCATTTACCTCATCAAAAGGG，其探针为LM-P，且序列为/nFITC-GTTTCATTCCTGCGTTACTATTCATTGTTG[THF]TGCTATACTTTGTTT-/C3-spacer/。/n

【技术特征摘要】
1.一种单增李斯特菌特异性正反向引物及探针，其特征在于，其正向引物和反向引物分别为LM-F、LM-R，且序列分别为
CTCGCTCTAGGTATCTTTGGGATTTACTAC、
Biotin-GTCCGAATATCATTTACCTCATCAAAAGGG，其探针为LM-P，且序列为
FITC-GTTTCATTCCTGCGTTACTATTCATTGTTG[THF]TGCTATACTTTGTTT-/C3-spacer/。


2.一种单增李斯特菌特异性的检测试剂盒，其特征在于，其包含权利要求1所述的正反向引物及探针、侧流层析试纸条:
所述反向引物5'端用生物素进行标记；
所述探针5'端用Fluore...

【专利技术属性】
技术研发人员：许恒皓，郦娟，董井泉，王蕾，吉敬，
申请(专利权)人：江苏海洋大学，连云港海恒生化科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32