一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法技术

本申请公开了一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法，此方法包括了皂化、调酸萃取、甲酯化、乙酰化等步骤，达到了一次性分离鸡胆膏中胆酸、鹅去氧胆酸的目的。本申请得到的二种产物纯度高，试剂均为廉价易得，且大部分溶剂均可以回收套用，产生的废水较少。

A method of extracting chenodeoxycholic acid from chicken gall extract

【技术实现步骤摘要】
一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法
本专利技术属于分离提纯领域，具体涉及一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸方法。
技术介绍
鹅去氧胆酸（chenodeoxycholicacid，CDCA），化学名为3α,7α-二羟基-5β-胆烷酸，CAS号：474-25-9，分子式为C24H40O4，分子量为392.57，结构式如下所示：。鹅去氧胆酸是一种主要由胆汁中提取而来的物质，其主要用于降低胆汁内胆固醇的饱和度，临床上主要用于胆结石治疗，同时其也是目前合成熊去氧胆酸(UDCA)的主要原料，1972年由英国正式开辟了溶解胆固醇类结石的治疗，鹅去氧胆酸作为第一个纠正饱和胆汁和溶解胆石的药物被应用。现在已知在很多动物和人的胆汁、肝、肾等组织中都含有鹅去氧胆酸。鹅去氧胆酸还可作为合成熊去氧胆酸（3α,7β-二羟基-5β-胆烷酸）和其他甾体化合物的中间体。中国专利CN201810179875.0公开了一种将鸡胆中的鹅去氧胆酸和胆酸合成熊去氧胆酸的方法，制备过程包括萃取、成盐结晶、氧化、还原和黄鸣龙反应。本专利技术方法减少了现有工艺方法中，必须先从鸡胆汁酸中提取鹅去氧胆酸并纯化后再合成熊去氧胆酸的步骤，大大缩短了工艺环节，节约了成本。将被现有工艺所遗弃的下脚料胆酸作为拓宽的原料来源，与鸡胆汁中鹅去氧胆酸同时反应，合成熊去氧胆酸粗品，变废为宝，大大提高了鹅去氧胆酸的利用率，使有限的生物资源得到了最大限度的开发利用，解决了现有技术工艺复杂、成本高、收率低、下脚料多的技术问题。鸡胆膏是鸡类产品加工企业的废弃物，其数量巨大，原料容易获得，其中的主要有机成分是胆酸、鹅去氧胆酸。对于从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的技术来说，主要难点在于鹅去氧胆酸（CDCA）与胆酸（CA）的分离，胆酸的结构如下式所示：从结构上对比可知，胆酸（CA）比鹅去氧胆酸（CDCA）多了一个羟基，结构上的相似使得将两种物质的分离开来较为困难。鹅去氧胆酸是鸡、鸭与鹅等家禽胆汁的主要成份，可以直接从家禽胆汁中提取得到。目前市场上的鹅去氧胆酸产品基本是从鸡胆中提取得到的，但受技术限制，现有提取的方法时主要是钡盐法和钙盐沉淀法，结晶提取法、离子交换树脂法，钡盐会带来严重的环境问题，用钙盐时则会使用极大量的水，极大的浪费了水资源，结晶提取法需要使用大量有机溶剂，母液需要反复分离结晶，生产周期长，不能大规模生产，这些方法提取收率低，得到的产品纯度一般低于90%。因此，在现今技术存在上述问题的情况下，研发出一种能够从鸡胆膏中一次性有效提取胆酸、鹅去氧胆酸的方法并有效果好、效率高、成本低、纯度高等优点的提取技术非常有意义。
技术实现思路
本申请的主要目的是提供一种从鸡胆膏中提取胆酸、鹅去氧胆酸的方法。我方技术方案是基于在鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的目的，进一步优化改进现有技术而成的。为了实现上述目的及解决现有技术中存在的问题，本申请采用了以下技术方案：一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法，其步骤可以归纳为皂化、调酸萃取、甲酯化、乙酰化、硅胶过滤、回流水解等步骤，其中硅胶过滤步骤的过滤方式为在过滤漏斗中铺硅胶进行过滤。优选的，硅胶的厚度为2～5cm或8～12cm，分别应用于小试和中试。优选的，还包括了母液回收的步骤，母液回收：结晶母液浓缩除去烷类溶剂后套用至下一批甲酯化之前的调酸萃取步骤。我方实验人员经过多次实验，找出了从鸡胆膏中一次性提取胆酸、鹅去氧胆酸的较优实验方案，如下：一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法，包括以下步骤：（1）皂化：将鸡胆膏中加入氢氧化钠、水，升温回流进行皂化得到反应液，原始的鸡胆膏中含有大量的氨基酸，进行皂化的目的是将胆酸、鹅去氧胆酸二种物质从结合态中解离出来。（2）萃取酯化：将步骤（1）中得到的反应液加入酯类溶剂，再加入乙酸乙酯，调酸性萃取，萃取液进行浓缩，至反应体系变为油状物，加入甲醇、浓硫酸进行回流搅拌，进行酯化，酯化完成后加入固体碳酸氢钠调节pH，过滤得到胆汁酸甲酯甲醇溶液，进行浓缩得到油状物，经过萃取将鹅去氧胆酸和胆酸从水相中萃取到有机相中，进一步消去了杂质，并酯化将胆酸和鹅去氧胆酸中的羧基变成了甲酯基，改变了二者的极性。（3）乙酰化：向步骤（2）中得到的油状物中加入乙酰化试剂进行升温回流反应，TLC检测反应结束后冷却至室温并过滤，滤液浓缩得到油状物，此步骤将胆酸和鹅去氧胆酸中的羟基乙酰化，进一步改变了二者的极性。（4）硅胶过滤：向步骤（3）中得到的油状物中加入烷类溶剂，加热将步骤（3）中得到的油状物完全溶解，再加入硅胶粉，后降温，在过滤漏斗中铺一层硅胶进行过滤，再用烷类溶剂冲洗一次得到滤液，滤饼即为三乙酰胆酸甲酯，将滤饼回收的三乙酰胆酸甲酯进行水解，即得到胆酸，这里利用了三乙酰胆酸甲酯和二乙酰鹅去氧胆酸甲酯的极性差异，利用了硅胶吸附的差异，极性较大的三乙酰胆酸甲酯被吸附住，二乙酰鹅去氧胆酸则被洗脱下来。（5）回流水解：将步骤（4）中得到的滤液浓缩回收溶剂，再加入氢氧化钠水溶液进行升温回流水解，再降温调酸性，加入乙酸乙酯萃取，继续加酸调节pH，后升温搅拌待静置分层，弃去水层，再降温析晶，滴加烷类溶剂逼出晶体，得到鹅去氧胆酸。（6）母液回收：结晶母液浓缩除去烷类溶剂后套用至下一批的萃取液，进行酯化步骤。优选的，步骤（1）中升温回流进行皂化的温度为95～105℃，皂化持续时间为8～15小时。优选的，步骤（3）中的乙酰化试剂选自乙酸酐、乙酸钠组合或者乙酰氯、三乙胺组合当中的一种，升温达到的温度为120～140℃，回流时间为3～4小时。优选的，步骤（4）中硅胶的规格选自100～200目、200～300目、300～400目、400～500目当中的一种或多种的混合。硅胶的厚度根据物料的重量而定，一般来说，在实验室小试为2～5cm厚的硅胶，在工厂进行中试为8～12cm厚硅胶。优选的，步骤（4）中加热将油状物溶解的温度为60～70℃。优选的，步骤（4）中加入硅胶粉后降温的温度为20～40℃。优选的，步骤（4）中加入硅胶粉的质量为鸡胆膏质量的0.1～1倍。优选的，步骤（4）中加入烷类溶剂溶解油状物的加热温度为40～70℃。优选的，步骤（5）中升温回流的温度为80～120℃，回流时间为8～15小试。优选的，步骤（5）中降温的温度为40～50℃，调酸性的pH为7～8，继续加酸调节pH至2～4，升温搅拌的温度为40～60℃，降温析晶的温度为-15～5℃。优选的，步骤（4）和步骤（5）中所述的烷类溶剂为己烷、庚烷、二氯甲烷、环己烷、石油醚当中的一种或多种的混合。本申请还包括了通过上述方法制备得到的胆酸、鹅去氧胆酸。本申请也包括了此方法在鹅去氧胆酸提纯当中的应用。对于从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的技术来说，主要难点在于胆酸、鹅去氧胆酸二种物质的分离。胆酸的结构和鹅去氧胆酸极为类似，我方通过实验惊奇的发现，胆酸的甲酯乙酰化产物三乙酰胆酸甲酯和鹅去氧胆酸的甲酯乙酰化产物二乙酰鹅本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法，包括了对鸡胆膏进行皂化、调酸萃取、甲酯化、乙酰化、回流水解步骤，其特征在于，所述方法还包括了硅胶过滤的步骤，其硅胶过滤方式为在过滤漏斗中铺硅胶进行过滤。/n

【技术特征摘要】
1.一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法，包括了对鸡胆膏进行皂化、调酸萃取、甲酯化、乙酰化、回流水解步骤，其特征在于，所述方法还包括了硅胶过滤的步骤，其硅胶过滤方式为在过滤漏斗中铺硅胶进行过滤。


2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述硅胶的厚度为2～5cm或8～12cm。


3.一种从鸡胆膏中提取鹅去氧胆酸的方法，包括了以下步骤：
（1）皂化：将鸡胆膏中加入氢氧化钠、水，升温回流进行皂化得到反应液；
（2）萃取酯化：将步骤（1）中得到的反应液加入酯类溶剂，调酸性萃取，萃取液进行浓缩，至反应体系变为油状物，加入甲醇、浓硫酸进行回流搅拌，进行酯化，酯化完成后加入固体碳酸氢钠调节pH，过滤得到胆汁酸甲酯甲醇溶液，进行浓缩得到油状物；
（3）乙酰化：向步骤（2）中得到的油状物中加入乙酰化试剂进行回流反应，反应结束后冷却至室温并过滤，滤液浓缩得到油状物；
（4）硅胶过滤：向步骤（3）中得到的油状物中加入烷类溶剂，加热将步骤（3）中得到的油状物完全溶解，再加入硅胶粉，后降温，在过滤漏斗中铺一层硅胶进行过滤，再用烷类溶剂冲洗得到滤液，滤饼即为三乙酰胆酸甲酯，将滤饼回收的三乙酰胆酸甲酯进行水解，...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖泽斌，王湘武，宁虎林，肖稳定，郑霞辉，
申请(专利权)人：湖南九典制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43