一种MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶的制备及用途制造技术

一种MMP响应型载纳米阿霉素‑吲哚菁绿水凝胶：其制备方法包括以下步骤：(1)利用反溶剂法制备纳米阿霉素颗粒、纳米吲哚菁绿颗粒，冻干贮存(2)准确称取一定量的纳米阿霉素、纳米吲哚菁绿冻干粉末，加入TEA缓冲液，混合均匀。准确称取一定量的丙烯酸酯‑透明质酸衍生物(HA‑AC)，加入TEA缓冲液，混合均匀。将上述两种溶液，按一定比例进行混合，并加入HS‑MMP‑SH交联剂，放置在37℃恒温箱中交联成胶。本发明专利技术选用MMP响应型水凝胶作为载体，包裹纳米阿霉素和吲哚菁绿，原位注射到肿瘤部位，由于肿瘤细胞可以分泌大量的MMP，从而使该水凝胶在肿瘤部位得以响应，加速降解，从而实现药物的控释与缓释，同时将光疗和化疗联合，增强抑瘤效率，减少心脏毒性和皮肤光毒性等副作用。

Preparation and application of a MMP responsive nano adriamycin indocyanine green hydrogel

【技术实现步骤摘要】
一种MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶的制备及用途
本专利技术涉及制药领域，尤其是涉及一种对MMP敏感的载药型水凝胶及其制备方法和用途。
技术介绍
头颈部鳞状细胞癌是世界上第六大高发癌症。在过去的20年中，这种疾病的新发和死亡病例均呈现逐年上升的趋势。在美国，每年约有50000个新增病例，引起大约10000人死亡。而我国头颈癌的发病率，已经跃居恶性肿瘤发病率的第六位，成为严重威胁我国居民健康的一类癌症。目前头颈部鳞癌的治疗方法，仍以传统的手术、化疗以及放疗为主。然而在过去的20年中，该类疾病的总体存活率并没有明显提高，且传统治疗方法均存在各自的局限性。因此，优化现有治疗手段，或寻找新的治疗策略成为该疾病研究亟待解决的关键问题。近年来，随着高分子聚合物在现代医药领域的不断发展，将高分子聚合物和药物相结合，形成药物控释、缓释体系已经受到来越来越多学者关注。药物控制缓释体系不仅能够控制药物的释放速率，维持有效的药物浓度，延长药物作用时间，还可以对肿瘤细胞或肿瘤组织产生靶向作用，使化疗药物更好地发挥抗肿瘤作用，改善了肿瘤化疗药物治疗的效果。水凝胶是近年来发展很快的一种高分子材料，兼具亲水基团和疏水基团。具有环境敏感性以及良好的生物相容性等优势。根据对外界刺激的响应，水凝胶可分为普通水凝胶和智能水凝胶，后者包括温度敏感性水凝胶、pH敏感性水凝胶、磁场响应性水凝胶等。在医药领域，水凝胶最大的优势就是能够以此为载体，实现多种药物的控释和多药联合应用，有效提高药效，降低药物毒副作用以及耐药发生。基质金属蛋白酶(MMPs)是一个大家族，因其需要Ca2+、Zn2+等金属离子作为辅助因子而得名。MMPs被报道在肿瘤中分泌较多，而在正常细胞分泌较少。MMPs几乎能降解ECM中的各种蛋白成分，破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，在肿瘤侵袭转移中起关键性作用。因此MMPs亦可被当作智能水凝胶的重要的响应元素。光-化联合治疗相辅相成，为恶性肿瘤提供新的治疗策略。光疗可以辅助化疗，增强靶向特异性，并通过改变血管通透性介导药物更好的在肿瘤区富集；化疗可以辅助光疗，清除残余肿瘤细胞并抑制损伤血管的再生。
技术实现思路
针对以上背景，本申请人提供了一种MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶的制备方法及并对其用途进行评估。本专利技术选用MMP响应型水凝胶作为载体，包裹纳米阿霉素和吲哚菁绿，原位注射到肿瘤部位，使该水凝胶在高表达MMP的肿瘤部位得以响应，加速降解，从而实现药物的控释与缓释，同时将光疗和化疗联合，增强抑瘤效率，减少心脏毒性和皮肤光毒性等副作用。本专利技术的技术方案如下：一种MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶，其制备方法有以下步骤：(1)将盐酸阿霉素溶解在DMSO中，滴加三乙胺去盐酸，并加入Poloxamer18搅拌使其充分溶解，将原料液倒入反溶剂超纯水中，使用去离子水透析，冻干贮存。(2)将吲哚菁绿溶解在DMSO中，并加入Poloxamer18搅拌使其充分溶解，将原料液倒入反溶剂超纯水中，使用去离子水透析，冻干贮存。(3)准确称取一定量的纳米阿霉素、纳米吲哚菁绿冻干粉末，加入TEA缓冲液，混合均匀。准确称取一定量的HA-AC，加入TEA缓冲液，混合均匀。将上述两种溶液，按一定比例进行混合，并加入HS-MMP-SH交联剂，放置在37℃恒温箱中交联成胶。步骤(1)中盐酸阿霉素质量为1OOmg，DMSO体积为4mL，三乙胺为16uL，超声震荡并搅拌时间为5-10min，Poloxamer188质量为1OOmg，超纯水的体积为40mL透析时间为4h，透析重复次数为3次。步骤(2)中吲哚菁绿质量为1OOmg，DMSO体积为4mL，超声震荡并搅拌时间为5-10min，Poloxamer188质量为1OOmg，超纯水的体积为40mL透析时间为4h，重复次数为3次。步骤(3)中纳米阿霉素颗粒质量为0.8mg，纳米吲哚菁绿质量为0.4mg，纳米药物溶于TEA缓冲液体积为40uL，超声震荡时间为30min，HA-AC的质量为8mg，水凝胶溶于TEA缓冲液的体积为160uL，交联剂HS-MMP-SH的质量为2mg，交联成胶的时间为5-8min.步骤(3)中HA-AC与交联剂HS-MMP-SH的质量比为4∶1，所得MMP响应型载药水凝胶中纳米阿霉素浓度为4mg/mL，纳米吲哚菁绿浓度为2mg/mL所述MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶用于治疗头颈部鳞癌及其他部位的鳞癌。本专利技术有益的技术效果在于：MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶，在肿瘤区可降解，对人体无毒副作用。载药水凝胶的药物释放速度在MMP环境下加速释放，具有肿瘤靶向性，减少药物对正常组织的毒性。可原位注射到肿瘤部位，操作方便。具有良好的缓释功能，能维持药物有效作用浓度，光化联合治疗提高肿瘤抑制率，并能降低阿霉素心脏毒性和吲哚菁绿的皮肤光毒性。附图说明图1为本专利技术实施例1制得的MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶图；图2为本专利技术测试例1MMP响应型水凝胶体外降解图；图3为本专利技术测试例1MMP响应型水凝胶体内降解图；图4为本专利技术测试例2MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶中纳米阿霉素体外释放曲线示意图；图5为本专利技术测试例3MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶对细胞SCC-15毒性示意图；图6为本专利技术测试例3MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶体内抑瘤率示意图。具体实施方式下面结合实施例和检测例，对本专利技术进行具体描述。实施例1(1)取盐酸阿霉素20mg溶解在4mL的DMSO中，并滴加16uL三乙胺去除盐酸，揽拌5min，加入80mgPoloxamer188并搅拌使其充分溶解，制得脱盐酸阿霉素二甲基亚砜溶液。将原料液倒入反溶剂PBS中，充分混合，得到阿霉素纳米药物悬液，使用去离子水透析4h(重复3次)，冷冻干燥获得阿霉素纳米药物粉体。(2)取吲哚菁绿20mg溶解在4mL的DMSO中，加入80mgPoloxamer188并搅拌使其充分溶解，制得脱盐酸阿霉素二甲基亚砜溶液。将原料液倒入反溶剂PBS中，充分混合，得到阿霉素纳米药物悬液，使用去离子水透析4h(重复3次)，冷冻干燥获得吲哚菁绿药物粉体。(3)准确称取0.8mg的阿霉素、0.4mglCG纳米药物冻干粉末，加入40uLTEA缓冲液，混合均匀，放入超声仪中超声30min，使纳米药物均匀分散在缓冲液中。准确称取8mg的HA-AC，加入160uLTEA缓冲液，混合均匀，放入37℃恒温箱中30min，充分溶解。将两者充分混合，加入2mg的交联剂HS-MMP-SH，混合均匀，放置在37℃恒温箱中，反应5-8min得到暗红色胶状物，即为pH敏感型载盐酸阿霉素水凝胶。载药水凝胶的图片如图1所示。测试例1将上述实例1得到的产品进行体内外降解测试。测试方法和条件为：(1)酶响应水凝胶体外降解情况<本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶，其特征在于其制备方法包括以下步骤：/n(1)将盐酸阿霉素溶解在DMSO中，滴加三乙胺去盐酸，并加入Poloxamer

【技术特征摘要】
1.一种MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶，其特征在于其制备方法包括以下步骤：
(1)将盐酸阿霉素溶解在DMSO中，滴加三乙胺去盐酸，并加入Poloxamer18搅拌使其充分溶解，将原料液倒入反溶剂超纯水中，使用去离子水透析，冻干贮存。(2)将吲哚菁绿溶解在DMSO中，并加入Poloxamer18搅拌使其充分溶解，将原料液倒入反溶剂超纯水中，使用去离子水透析，冻干贮存。(3)准确称取一定量的纳米阿霉素、纳米吲哚菁绿冻干粉末，加入TEA缓冲液，混合均匀。准确称取一定量的HA-AC，加入TEA缓冲液，混合均匀。将上述两种溶液，按一定比例进行混合，并加入HS-MMP-SH交联剂，放置在37℃恒温箱中交联成胶。


2.根据权利要求1所述的MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶，其特征在于，步骤(1)中取盐酸阿霉素质量为100mg，DMSO体积为4mL，三乙胺为16uL，超声震荡并搅拌时间为5-10min，Poloxamer188质量为100mg，超纯水的体积为40mL透析时间为4h，透析重复次数为3次。


3.根据权利要求1所述的MMP响应型载纳米阿霉素-吲哚菁绿水凝胶，其特征在于，步骤(2)中吲哚菁绿质量为100mg...

【专利技术属性】
技术研发人员：王欢欢，付之光，张建军，李云霞，王宇，温宁，
申请(专利权)人：温宁，
类型：发明
国别省市：北京;11