【技术实现步骤摘要】
用于检测前列腺腺体基底膜完整性的试剂盒及其应用
本专利技术涉及前列腺癌病理辅助诊断
，尤其是一种用于检测前列腺腺体基底膜完整性的试剂盒及其应用。
技术介绍
中国前列腺癌的发病率近十年来增速明显，这与人口老龄化密切相关。根据美国癌症协会的报告，前列腺癌目前是欧美老年男性的“头号杀手”。不同国家的前列腺癌的发病率存在较大差异。美国的前列腺癌发病率已经超越肺癌，成为发病率最高的男性恶性肿瘤。但近年来呈明显的上升趋势。人类TRIB1蛋白，也被称为C8FW、GIG2、TRB1和SKIP1，编码基因位于染色体8q24.13。TRIB1在多种组织中都有表达，包括骨骼肌、胰腺、甲状腺、骨髓、外周血单核细胞和脂肪组织。TRIB1能够调控细胞内的NFKB信号通路，从而影响细胞外分泌的细胞因子，如IL8，CXCL1，CXCL2等，这些细胞因子能调节肿瘤微环境中的巨噬细胞，促进单核/巨噬细胞向II型巨噬细胞转化。从而出现肿瘤免疫抑制，诱导肿瘤细胞免疫逃逸。在人的前列腺组织中，TRIB1能稳定的表达在基底细胞的细胞核膜上，对于病...
【技术保护点】
1.用于检测前列腺腺体基底膜完整性的试剂盒，其特征在于，包括枸橼酸盐、非免疫动物血清封闭液、兔源性抗TRIB1单克隆抗体、第二抗体和二氨基联苯胺显色剂，其中，第二抗体靶向结合兔源性抗TRIB1单克隆抗体。/n
【技术特征摘要】
1.用于检测前列腺腺体基底膜完整性的试剂盒，其特征在于，包括枸橼酸盐、非免疫动物血清封闭液、兔源性抗TRIB1单克隆抗体、第二抗体和二氨基联苯胺显色剂，其中，第二抗体靶向结合兔源性抗TRIB1单克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中各组分的用量分别为：
所述枸橼酸盐为粉剂，所述兔源性抗TRIB1单克隆抗体的稀释倍数为1:100。
3.权利要求1或2所述的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)准备超纯水，将枸橼酸盐充分溶解，配置成10mmol/L的枸橼酸盐溶液；
2)另外准备超纯水，加入30％(W/W)H2O2；准备1×TBST溶液1L；
3)将待测病理切片用二甲苯清洗；
4)将切片用100％酒精清洗；
5)将切片用95％酒精清洗；
6)将切片用超纯水清洗；
7)将切片放置枸橼酸盐溶液内微波炉煮沸5～10分钟，始终保持切片在枸橼酸盐溶液内；
8)将切片用超纯水清洗；
9)将切片浸泡在3％(W/W)的H2O2内；
10)将切片用超纯水清洗；
11)将切片用TBST清洗；
12)每张切片加100ul的非免疫动物血清，室温下孵育；
13)移去非免疫动物血清，每张切片加100ul的稀释后的第一抗体，4℃孵育过夜；
14)将切片移到室温，复温10分钟；用TBST清洗；
15)...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘泽贞，钟惟德，何慧婵，卓扬佳，
申请(专利权)人：广州市第一人民医院广州消化疾病中心，广州医科大学附属市一人民医院，华南理工大学附属第二医院，
类型：发明
国别省市：广东;44
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