【技术实现步骤摘要】
一种基于酶促点击反应信号放大磁弛豫时间免疫传感器检测兽药残留的方法
本专利技术属于食品安全分析领域,涉及兽药残留的检测方法,尤其是涉及一种基于酶促点击反应信号放大磁弛豫时间免疫传感器检测兽药残留的方法。
技术介绍
兽药残留是造成我国食品安全问题的一个重要原因,过量或者不合理使用兽药会造成大量的兽药残留在环境和动物体内,并通过食物链在人体内富集,造成抗药性、过敏、人体菌群失衡等严重的安全问题,进而引发组织器官病变,人体免疫能力降低,严重者甚至可能造成药物中毒、诱发癌变等,国际组织与各国食品安全管理部门均制订了相应食品中兽药残留的最高限量标准。我国农业部公告的《动物性食品中兽药最高残留限量》(第235号)中,对食品中兽药残留量作了明确规定:莱克多巴胺,沙丁胺醇等“瘦肉精”是非法添加的药物,在动物性食品中不得检出。因此,对“瘦肉精”等非法添加药物的检测,需要检测方法具有很高的灵敏度和准确性。另外,有些抗生素是可以使用的,例如磺胺类抗生素是可以使用的,不超过一定的含量就是安全的,因此要求检测方法的灵敏度适中就可以,但 ...
【技术保护点】
1.一种基于酶促点击反应信号放大磁弛豫时间免疫传感器检测兽药残留的方法,其特征在于包括以下步骤:/n1)用待检兽药完全抗原包被酶标板并进行封闭;/n2)加入待测样品和待检兽药单克隆抗体,进行竞争免疫反应;/n3)加入碱性磷酸酶标记的二抗,反应后洗涤;/n4)继续向酶标板中加入磷酸化抗坏血酸酯,反应后生成抗坏血酸;/n5)向反应液中加入Cu
【技术特征摘要】
1.一种基于酶促点击反应信号放大磁弛豫时间免疫传感器检测兽药残留的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)用待检兽药完全抗原包被酶标板并进行封闭;
2)加入待测样品和待检兽药单克隆抗体,进行竞争免疫反应;
3)加入碱性磷酸酶标记的二抗,反应后洗涤;
4)继续向酶标板中加入磷酸化抗坏血酸酯,反应后生成抗坏血酸;
5)向反应液中加入Cu2+,叠氮-MNP偶联物和炔基-MNP偶联物,抗坏血酸将Cu2+还原为Cu+并催化叠氮和炔基发生点击反应,导致磁颗粒从分散变成聚集或者结合磁分离导致磁颗粒数量的改变,根据不同的检测对象,选择这两种灵敏度不同的磁信号读出方式即磁颗粒聚集或者磁颗粒数量的改变,最终通过测定横向弛豫时间并计算待测样品中的目标物含量。
所述叠氮-MNP偶联物的粒径为10-50nm,所述炔基-MNP偶联物的粒径为10-50nm或500-3000nm。
2.如权利要求1所述检测兽药残留的方法,其特征在于:对于含量很低的兽药,所述叠氮-MNP偶联物的粒径为10-50nm,所述炔基-MNP偶联物的粒径为500-3000nm,发生点击反应后进行磁分离,取上清液未反应的叠氮-MNP偶联物,测定其横向弛豫时间并计算待测样品中的目标物含量;对于含量...
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