一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备及应用制造技术

技术编号:23283535 阅读:88 留言:0更新日期:2020-02-08 15:12
本发明专利技术涉及生物技术提取领域,针对现有技术的发明专利技术物分子活性不足及药物修复成分针对性较弱的问题,公开了一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备及应用,包括以下步骤:安康鱼肉预处理;酶解;过滤得澄清液;分离纯化;除杂除菌;多肽分级。提供一种对非酒精性脂肪肝具有修复作用的安康鱼肉多肽的提取工艺及应用效果,可明显降低非酒精性脂肪肝模型(NAFLD)血清中ALT和AST活性;安康鱼肉多肽提取率高、提取纯度高,对NAFLD具有优良的修复作用,生物活性稳定,可保持时间较长;能有针对性的对非酒精性脂肪肝进行修复,修复效果较好并且该提取工艺的可控性好,易于实际大规模工业化量产。

Preparation and application of Ankang fish polypeptide with repairing function

【技术实现步骤摘要】
一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备及应用
本专利技术涉及生物技术提取领域,尤其是涉及一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备及应用。
技术介绍
非酒精性脂肪肝病(nonalcoholicfattyliverdisease,NAFLD)是以肝细胞脂肪变性和脂肪堆积为主要特征的病理综合征,目前治疗的方法主要采取减肥治疗、降脂治疗和血管紧张素转换酶抑制剂等保守治疗,但保守治疗目前尚缺乏特效方法,效果欠佳。近年来,我国的研究学者对从海洋动物中提取生物活性物质对肝损伤进行保护作用作了大量的研究。安康鱼又名蛤蟆鱼、结巴鱼等,为近海底层鱼类,分布于北太平洋西部,在我国沿海海域均有出产,具有高蛋白,低脂肪,矿物质含量丰富和含有多不饱和脂肪酸的特点,对预防肝脏等疾病有着很好的功效。专利号CN201910189173.5,专利名称为“治疗非酒精性脂肪肝祛湿活血方”,本专利技术属于药品加工领域,具体涉及治疗非酒精性脂肪肝祛湿活血方,主要采用荷叶、茯苓、白术、决明子、薏苡仁、泽泻、猪苓、绞股蓝、法半夏、虎杖、茵陈、黄芪、甘草、陈皮、柴胡、赤芍、莪术、丹参本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备,其特征是,包括以下步骤:/n(1)、安康鱼肉预处理:将安康鱼进行解冻清洗后绞碎,在料液比为1:4-6 (m/v),温度为48-52℃的条件下,用94-96%的乙醇水浴脱脂2-2.2h;脱脂后将上清液倒掉,用纯水将沉淀洗净,将脱脂鱼肉在2-6 ℃、11900-12000 r/min 条件下离心15-20 min,收集沉淀,放入-18—-20 ℃冷冻备用;/n(2)、酶解:将鱼肉加到含有中性蛋白酶的酶解液中进行酶解;其中,中性蛋白酶的浓度为0.05-0.25wt%,酶解液质量为鱼肉质量的2-4倍,酶解温度为30-45℃,酶解液pH至控制在6.5-8.5,酶...

【技术特征摘要】
1.一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备,其特征是,包括以下步骤:
(1)、安康鱼肉预处理:将安康鱼进行解冻清洗后绞碎,在料液比为1:4-6(m/v),温度为48-52℃的条件下,用94-96%的乙醇水浴脱脂2-2.2h;脱脂后将上清液倒掉,用纯水将沉淀洗净,将脱脂鱼肉在2-6℃、11900-12000r/min条件下离心15-20min,收集沉淀,放入-18—-20℃冷冻备用;
(2)、酶解:将鱼肉加到含有中性蛋白酶的酶解液中进行酶解;其中,中性蛋白酶的浓度为0.05-0.25wt%,酶解液质量为鱼肉质量的2-4倍,酶解温度为30-45℃,酶解液pH至控制在6.5-8.5,酶解时间为5-5.4h;
(3)、过滤得澄清液:向酶解液中添加质量为酶解液1-2wt%的改性活性炭,并将酶解液加热到70-80℃,脱色30-50min;将脱色后的酶解液转移至板框过滤池内进行过滤,取澄清液;
(4)、分离纯化:将澄清液鼓气起泡,并收集泡沫液,在鼓气的同时注水;鼓气速率为3-4L/min,注水速率为0.2-0.3L/min,澄清液温度保持在25-35℃;待收集的泡沫液灭泡后,对泡沫液进行重金属分离;向重金属分离后的泡沫液中添加质量为泡沫液1-2%的磁性亲和微球并分散均匀,静置亲和吸附50-70min后利用磁场使磁性亲和微球聚集;分离出磁性亲和微球后,用pH值为7-7.2的Tris-HCl缓冲液对磁性亲和微球进行洗脱,再次利用磁场分离出磁性亲和微球后,得到洗脱液,75-85℃下储存备用;
(5)、除杂除菌:将洗脱液通过二级0.22微米膜过滤除杂除菌;其中膜过滤温度小于45℃,一级过滤压力小于0.25MPa,二级过滤压力小于0.4MPa;
(6)、多肽分级:采用超滤膜或纳滤膜对膜过滤后的浓缩液按分子量进行分离,得到目标分子量的安康鱼肉多肽。


2.根据权利要求1所述的一种具有修复作用的安康鱼肉多肽的制备,其特征是,所述改性活性炭的制备步骤为:
a、预处理:对果壳活性炭,先用0.5-0.8mol/L稀硝酸于60-65℃浸泡活性炭1.8-2.2h,将样品过滤后再缓慢加入0.8-1mol/L的氢氟酸,于60-70℃浸泡8-10h后用去离子水洗涤至中性,后加入去离子水98-100℃煮沸1.8-2.2h,之后用纯水冲洗2-3次后,置于98-102℃烘箱中烘干...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨最素
申请(专利权)人:浙江海洋大学
类型:发明
国别省市:浙江;33

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