一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法，属于辅酶Q10脂质体制备技术领域。本发明专利技术的制备方法为将辅酶Q10、硫辛酸、大豆卵磷脂、胆固醇、无水乙醇和吐温80混合后加热溶解得油相；将三乙醇胺加蒸馏水溶解后加热保温得水相；将水相于恒温磁力搅拌器上加热搅拌，快速注入油相，即得辅酶Q10脂质体颗粒。本发明专利技术制备得到的辅酶Q10脂质体包封率高，大小均匀，成球状；动物实验结果显示辅酶Q10脂质体具有抗小鼠皮肤紫外线损伤的作用；辅酶Q10脂质体可以作为供外用的护肤膏霜，如润肤霜，晚霜，防晒霜。

Preparation of coenzyme Q10 liposome against UV damage

【技术实现步骤摘要】
一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法
本专利技术涉及辅酶Q10脂质体制备
，更具体的说是涉及一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法。
技术介绍
辅酶Q10是一种脂溶性抗氧化剂，能激活人体细胞和细胞能量的营养，具有提高人体免疫力、增强抗氧化、延缓衰老和增强人体活力等功能。辅酶Q10在体内主要有两个作用，一是营养物质在线粒体内转化为能量的过程中起重要的作用，二是有明显的抗脂质过氧化作用。它是细胞线粒体中的能量转换剂，它通过转移和传递电子参与“三羧酸循环”产生ATP(三磷酸腺苷)，即能量因子供细胞代谢使用。皱纹的增加、皮肤的老化与辅酶Q10含量有关，辅酶Q10含量越低，皮肤越易老化，面部的皱纹也越多。辅酶Q10可以通过口服来摄取，也可以涂擦含有辅酶Q10的护肤品，增加细胞对辅酶Q10的吸收，从而减少皱纹的形成。由于细胞中含足够辅酶Q10，即能量代谢会有所增强，清除自由基，缓解皱纹加重。随着年龄的增加，皮肤胶原蛋白抵御紫外线等氧化刺激物损伤的能力下降，而长期使用辅酶Q10能够有效防止皮肤光衰老，减少眼部周围的皱纹，由于辅酶Q10渗透进入皮肤生长层可以减弱光子的氧化反应，在生育醇的协助下可以启动特异性的磷酸化酪氨酸激酶，防止DNA的氧化损伤，抑制紫外光照射下人皮肤成纤维母细胞胶原蛋白酶的表达，保护皮肤免于损伤。广泛的研究认为辅酶Q10抑制脂质过氧化反应，减少自由基的生成，保护SOD活性中心及其结构免受自由基氧化损伤，提高体内SOD等酶活性，抑制氧化应激反应诱导的细胞凋亡，具有显著的抗氧化、延缓衰老的作用。辅酶Q10是一种泛醌，其分子量达到863.36，单独穿透皮肤表皮层的难度较大；且脂质体的制备受到多种因素的干扰，其中包括：投药量百分比、水相pH值、卵磷脂百分比、温度等。因此，如何将辅酶Q10“运输”进皮肤，是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法，辅酶Q10脂质体是一种油相包裹辅酶Q10的制剂，从而将辅酶Q10“运输”进皮肤，进而使辅酶Q10透过皮肤发挥抗紫外线损伤作用。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法，具体步骤如下：(1)制备油相：将辅酶Q100.5-1.5％、硫辛酸0.45％、大豆卵磷脂1.3-1.9％、胆固醇0.33％、无水乙醇7％和吐温801.5％，混合加热溶解，制备得到油相；所述百分比为占辅酶Q10脂质体的质量百分比；(2)制备水相：将三乙醇胺加蒸馏水溶解，使pH达到7.7-8.1，得水相；(3)制备辅酶Q10脂质体：将步骤(2)制备得到的水相加热搅拌，快速注入步骤(1)制备的油相，获得辅酶Q10脂质体颗粒，所述水相占辅酶Q10脂质体的质量百分比为87.32-88.92％。进一步，步骤(1)制备油相：将辅酶Q100.9％、硫辛酸0.45％、大豆卵磷脂1.3％、胆固醇0.33％、无水乙醇7％和吐温801.5％，混合加热溶解，制备得到油相；所述百分比为占辅酶Q10脂质体的质量百分比。进一步，步骤(1)制备油相所述混合加热溶解的条件为在50-60℃水浴条件下搅拌20min，使油相物质充分溶解。进一步，步骤(3)制备辅酶Q10脂质体的具体步骤如下：将步骤(2)制备得到的水相在恒温磁力搅拌器上加热搅拌30min，转速为1000r/min，温度为50-60℃，作为水相，用注射器将步骤(1)制备的油相快速注入搅拌中的水相，油相被大量的水相稀释，油相在水相中不溶从而迅速形成小的脂质体颗粒，继续搅拌30min，获得辅酶Q10脂质体颗粒，40℃保存。脂质体的生物学定义:当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时，分子的疏水尾部倾向于聚集在一起，避开水相，而亲水头部暴露在水相，形成具有双分子层结构的的封闭囊泡，称为脂质体。药剂学定义为脂质体系指将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微型泡囊体。脂质体是一种人工膜，在水中磷脂分子亲水头部插入水中，脂质体疏水尾部伸向空气，搅动后形成双层脂分子的球形脂质体，直径25～1000nm不等。脂质体可用于转基因，或制备药物，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部。脂质体是由卵磷脂和神经酰胺等制得的空心体，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同，是一种很好的穿透皮肤运输载体。本专利技术采用脂质体作为运输载体，辅酶Q10脂质体是一种油相包裹辅酶Q10的制剂，可以快速地将辅酶Q10“运输”进皮肤。经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本专利技术公开提供了一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法，辅酶Q10脂质体包封率高，大小均匀，成球状；动物实验结果显示辅酶Q10脂质体具有抗小鼠皮肤紫外线损伤的作用。本专利技术制备的辅酶Q10脂质体可以作为供外用的护肤膏霜，如润肤霜，晚霜，防晒霜等。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。图1附图为本专利技术辅酶Q10脂质体在电镜下拍摄的图片；其中，A为在30000倍电镜下拍摄(比例尺为1μm)；B为在80000倍电镜下拍摄(比例尺为500nm)；C为在200000倍电镜下拍摄(比例尺为200nm)；图2附图为本专利技术实验期间各组小鼠体重变化；图3附图为本专利技术各组小鼠皮肤组织病理切片染色；图4附图为本专利技术各组小鼠皮肤组织基质金属蛋白酶相对表达量；与MOL组比较，*：P<0.05；图2-图4中，CON，正常组；MOL，模型组；COQ，辅酶Q10脂质体组；TiO2：二氧化钛组。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。试剂：辅酶Q10由广东润和生物科技有限公司提供，60％大豆卵磷脂(PC60)购于海爱康精细化工，胆固醇、聚山梨酯80、无水乙醇、盐酸、PBS购于国药试剂，丙二醛测试盒、超氧化物歧化酶测试盒、谷胱甘肽过氧化物酶测试盒、伊红-苏木素染色试剂盒购于南京建成公司，RT-qPCR反逆转录试剂盒与SYBR荧光染料购于TaKaRa公司。仪器：PCR扩增仪(Thermo公司)，UVB紫外灯及ST-513型紫外线辐照计(台湾先驰光电公司)，电子天平(上海民桥)，雷磁实验室pH计(上海精密仪器公司)，200KV场发射透射电子显微镜(TecaniG2F20S-TWIN型)、酶标仪(中国普朗公司)、微量移液器(美国Thermo公司)、冷冻离心机(德国eppendorf公司)。...

【技术保护点】
1.一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：/n(1)制备油相：将辅酶Q100.5-1.5％、硫辛酸0.45％、大豆卵磷脂1.3-1.9％、胆固醇0.33％、无水乙醇7％和吐温80 1.5％，混合加热溶解，制备得到油相；所述百分比为占辅酶Q10脂质体的质量百分比；/n(2)制备水相：将三乙醇胺加蒸馏水溶解，使pH达到7.7-8.1，得水相；/n(3)制备辅酶Q10脂质体：将步骤(2)制备得到的水相加热搅拌，快速注入步骤(1)制备的油相，获得辅酶Q10脂质体颗粒，所述水相占辅酶Q10脂质体的质量百分比为87.32-88.92％。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)制备油相：将辅酶Q100.5-1.5％、硫辛酸0.45％、大豆卵磷脂1.3-1.9％、胆固醇0.33％、无水乙醇7％和吐温801.5％，混合加热溶解，制备得到油相；所述百分比为占辅酶Q10脂质体的质量百分比；
(2)制备水相：将三乙醇胺加蒸馏水溶解，使pH达到7.7-8.1，得水相；
(3)制备辅酶Q10脂质体：将步骤(2)制备得到的水相加热搅拌，快速注入步骤(1)制备的油相，获得辅酶Q10脂质体颗粒，所述水相占辅酶Q10脂质体的质量百分比为87.32-88.92％。


2.根据权利要求1所述的一种抗紫外线损伤的辅酶Q10脂质体的制备方法，其特征在于，步骤(1)制备油相所述混合加热溶解...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴铁，唐林志，吴海游，吕思敏，于琼，
申请(专利权)人：广东润和生物科技有限公司，广东医科大学，
类型：发明
国别省市：广东;44