一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂：其组分包括异莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇中的至少一种；按照质量比计算，莪术醇：莪术二酮：莪术烯醇＝0–8：0–1.5：0–1.5。本发明专利技术提供的抗鱼类病毒的萜类抑制剂能够安全、高效地预防和抑制石斑鱼虹彩病毒，并且符合绿色无公害的可持续发展要求，能够促进水产业的高质化生态养殖，带来不可忽视的经济效益。

【技术实现步骤摘要】
一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂及其制备方法和应用
本专利技术属于水产动物疾病防治领域，具体地，设计一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂及其制备方法和应用。
技术介绍
近年来，我国海洋经济迅猛发展，《2017年中国海洋经济统计公报》数据显示2017年全国海洋生产总值达到7.76万亿元，其中海洋渔业经济在海洋经济中占比超过17.8％。石斑鱼肉质细腻，营养丰富，作为我国华南地区最大宗海水养殖鱼类之一，在活海鲜市场中的经济价值极高。然而在高密度、集约化养殖条件下，各种养殖病害的频频爆发造成巨大经济损失。其中，石斑鱼虹彩病毒被称为“海洋口蹄疫”，其所导致的鱼病致死率极高，是导致石斑鱼发病的主要病毒性病原。然而目前针对石斑鱼虹彩病毒病尚无市场化的有效抗病毒药物，石斑鱼养殖业正处于无药可用的困局。因此亟需开拓新的思路研发高效抗病毒药物，用于石斑鱼养殖中虹彩病毒病的防控治疗。近年来，从药用植物中寻找具有抗病毒作用的天然活性成分，已成为国内外开发新型植物源药物的研究热点。我国拥有丰富的药用植物资源，药用植物使用历史悠久，从药用植物中筛选抗病毒药物的应用前景极为广阔。药用植物含有众多天然活性化学成分，主要包含萜类化合物类、皂苷类、黄酮类、多糖类、生物碱等，其活性化学成分具有结构多样化、生物活性多样化的特点，能通过破坏病毒结构的完整性，影响病毒的蛋白质和遗传物质的合成，或者激活鱼体的免疫系统来发挥抗病毒作用。深入系统地研究水产用药用植物将能够有效解决抗生素等化学药物所造成的耐药性和药残问题，是实现绿色无公害、高效防病、水产高质化生态养殖的重要发展方向。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂及其制备方法和应用，以有效地防治石斑鱼虹彩病毒。根据本专利技术的一个方面，提供一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂：其组分包括异莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇中的至少一种；按照质量比计算，莪术醇：莪术二酮：莪术烯醇＝0–8：0–1.5：0–1.5。优选地，所述组分包括异莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇；按照所述质量比计算，莪术醇：莪术二酮：莪术烯醇＝2–8：0.5–1：0.5–1。优选地，组分中的莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇的质量比为：莪术醇：莪术二酮：莪术烯醇＝2：1：1。根据本专利技术的另一个方面，提供一种上述抗鱼类病毒的萜类抑制剂的制备方法：采用植物源的莪术醇、植物源的莪术二酮和植物源的莪术烯醇，按照所述质量比，配制而成。优选地，选取金银花、杜仲、冬葵果、蒲公英、丹参、红花和川穹中的一种作为所述植物源，提取所述莪术醇；选取金银花、杜仲、冬葵果、蒲公英、丹参、红花和川穹中的一种作为所述植物源，提取所述莪术二酮；选取金银花、杜仲、冬葵果、蒲公英、丹参、红花和川穹中的一种作为所述植物源，提取所述莪术烯醇。优选地，以金银花作为所述植物源，分别提取所述莪术醇、所述莪术二酮和所述莪术烯醇。根据本专利技术的另一个方面，提供一种复合配方制剂：以上述抗鱼类病毒的萜类抑制剂作为活性成分，用于预防和/抑制虹彩病毒。优选地，虹彩病毒为石斑鱼虹彩病毒。优选地，萜类抑制剂的浓度为125–500μg/mL。优选地，萜类抑制剂的浓度为500μg/mL。莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇能够通过影响病毒复制感染的过程，从而对石斑鱼虹彩病毒感染产生显著的抑制效果。采用莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇复配制备的抗鱼类疾病的萜类抑制剂中，共同作为活性成分的莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇协同增效，使萜类抑制剂能够在不超出其中的各活性成分的安全使用浓度范围的前提下有效抑制石斑鱼虹彩病毒。与分别以采用莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇作为单一的活性成分相比，本专利技术采用莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇配制萜类抑制剂，能够降低各活性成分的有效作用浓度，减少各活性成分的剂量，由此可以降低活性成分的原料成本，提高生产效益，降低活性成分所产生的副作用影响，降低药物残留量，提高药品安全性，同时，不会折减萜类抑制剂对虹彩病毒的抑制效果。另外，本专利技术所采用的莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇都能够利用常见的药用植物提取得到，可用于提取上述有效成分的植物源来源广泛，利用植物源的莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇替代现有抗病毒兽药中的常见抗生素等化学药物，能够避免耐药性等药品药效问题和药物残留等食品安全问题的发生。综上，本专利技术提供的抗鱼类病毒的萜类抑制剂及应用其的复合配方制剂能够安全、高效地预防和抑制石斑鱼虹彩病毒，并且符合绿色无公害的可持续发展要求，能够促进水产业的高质化生态养殖，带来不可忽视的经济效益。附图说明图1是不同浓度的莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇分别对石斑鱼脾脏细胞的细胞毒作用的光镜观察结果；图2是不同浓度的莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇分别对石斑鱼脾脏细胞活力影响的细胞活性检测结果；图3是不同浓度(不超出安全使用浓度范围)的化合物单体莪术醇、莪术二酮、莪术烯醇单独对石斑鱼虹彩病毒的抑制作用；图4是不同浓度的复合配方制剂对石斑鱼脾脏细胞活力影响的细胞活性检测结果；图5是不同浓度(不超出安全使用浓度范围)的复合配方制剂对石斑鱼虹彩病毒的抑制作用；图6是最高安全使用浓度的复合配方制剂对石斑鱼虹彩病毒在宿主细胞内的复制合成过程中的抑制作用。具体实施方式为了使本
的人员更好地理解本专利技术方案，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分的实施例，而不是全部的实施例。下述实施例中涉及的定量实验数据以均数±标准差(±s)表示，采用SPSS17.0统计软件运用单因素水平方差分析的方法对组间比较数据进行统计处理。石斑鱼脾脏细胞(GrouperSpleencell,GS)保存于本实验室，公众可从申请人处获得，仅用于重复本专利技术实验使用。石斑鱼虹彩病毒(广西株，GrouperiridovirusGuangxistrain,SGIV-Gx)分离自广西北海患病的珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelusfuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)，保存于申请人实验室，公众可从申请人处获得，仅用于重复本专利技术实验使用。下述实施例中使用前将SGIV-Gx病毒在细胞培养基中稀释至105TCID50/mL。莪术醇：成都瑞芬思生物科技有限公司产品(分析纯度﹥98％)，产品编号为E-017，CAS#4871-97-0。莪术二酮：成都瑞芬思生物科技有限公司产品(分析纯度﹥98％)，产品编号为E-009，CAS#13657-68-6。莪术烯醇：成都瑞芬思生物科技有限公司产品(分析纯度﹥98％)，产品编号为E-003，CAS#19431-84-6。石斑鱼虹彩病毒主要衣壳蛋白(Majorcapsidprotein，MCP)基因引物：正向引物(qMCP-F)5’-GCACGCTTCTCTCACCTTCA-3’，反向引物(qMCP-R)5’-AACGGCAACGGGAGCACTA-3’。内参基因β-actin引物：正向引物(β-actin-F)5’-TACGAG本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂，其特征在于：/n其组分包括异莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇中的至少一种；/n按照质量比计算，莪术醇：莪术二酮：莪术烯醇＝0–8：0–1.5：0–1.5。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗鱼类疾病的萜类抑制剂，其特征在于：
其组分包括异莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇中的至少一种；
按照质量比计算，莪术醇：莪术二酮：莪术烯醇＝0–8：0–1.5：0–1.5。


2.如权利要求1所述抗鱼类病毒的萜类抑制剂，其特征在于：
所述组分包括异莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇；
按照所述质量比计算，莪术醇：莪术二酮：莪术烯醇＝2–8：0.5–1：0.5–1。


3.如权利要求2所述抗鱼类病毒的萜类抑制剂，其特征在于，所述组分中的莪术醇、莪术二酮和莪术烯醇的质量比为：莪术醇：莪术二酮：莪术烯醇＝2：1：1。


4.一种如权利要求1–3任一项所述抗鱼类病毒的萜类抑制剂的制备方法，其特征在于：采用植物源的莪术醇、植物源的莪术二酮和植物源的莪术烯醇，按照所述质量比，配制而成。


5.如权利要求4所述抗鱼类病毒的萜类抑制剂的制备方法，其特征在于：
选取金银花、杜仲、冬葵果、蒲公英、丹参、...

【专利技术属性】
技术研发人员：李鹏飞，余庆，刘明珠，肖贺贺，吴思婷，德蒂·费兹瑞恩赛亚·普察，
申请(专利权)人：广西科学院，广西壮族自治区海洋研究所，
类型：发明
国别省市：广西;45