人参二醇在制备抑制PD-L1、肿瘤细胞增殖蛋白的表达的药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了人参二醇在制备抑制PD‑L1蛋白、肿瘤细胞增殖蛋白的表达的药物中的应用，属于天然小分子药物应用技术领域，本发明专利技术中所述人参二醇能够剂量性地抑制PD‑L1蛋白的表达，PD‑L1的RNA转录水平、PD‑L1阳性细胞率；还能剂量性地抑制缺氧诱导的肿瘤增殖相关蛋白Cyclin D1，c‑Myc和VEGF的表达；剂量性地减少EdU阳性细胞数，抑制肿瘤细胞增殖；能够显著提高共培养体系中T细胞的活力；有效地抑制裸鼠移植瘤的体积；由此可见，人参二醇作为抑制结肠癌的药物，具有显著的效果。

Application of Panaxadiol in the preparation of drugs to inhibit the expression of PD-L1 and tumor cell proliferation protein

【技术实现步骤摘要】
人参二醇在制备抑制PD-L1、肿瘤细胞增殖蛋白的表达的药物中的应用
本专利技术属于天然小分子药物应用
，尤其涉及人参二醇在制备抑制PD-L1蛋白、肿瘤细胞增殖蛋白的表达的药物中的应用。
技术介绍
结肠癌属于我国九大常见恶性肿瘤之一，据WHO统计，结肠癌发病率位居常见肿瘤第三位。大多数结肠癌的发展过程是由局灶性的隐形性损伤到腺瘤再到恶性肿瘤的过程，此过程通常是由局部组织损伤引起的慢性炎症所介导的。在肿瘤的生长、侵袭和转移的过程中，肿瘤需要逃逸宿主免疫监视，使机体对肿瘤抗原无免疫应答。在这种肿瘤微环境下，免疫系统通常处于一种被抑制的状态，不仅有助于结肠肠癌侵袭和转移，也促使肿瘤产生抗药性，降低传统放化疗对肿瘤细胞的杀伤效果。在这种情况下，消除肿瘤区域特有的免疫逃逸微环境，解除其对免疫系统，尤其是细胞毒性T淋巴细胞的抑制，也成为结肠癌治疗的全新方向。程序性死亡受体1配体(programmedcelldeathLigand1,PD-L1)属于B7家族成员，它是程序性死亡受体1(programmedcelldeathprotein1,PD-1)的天然结合配体，PD-L1通过与PD-1结合，负向调节T细胞活性，抑制T细胞产生的免疫应答。在正常情况下，PD-1/PD-L1信号可以维持机体免疫耐受，防止过度炎症反应和自身免疫疾病的发生；而在肿瘤环境下，此信号通路却使机体抗肿瘤免疫受到抑制，降低肿瘤患者体内T细胞的数量与功能。阻断PD-1/PD-L1相互作用，可以恢复体内抗肿瘤免疫效应和T细胞功能，从而抑制肿瘤生长和转移，近年来PD-1/PD-L1信号途径已经成为免疫治疗的新靶标。有临床样本研究显示，PD-L1在结肠癌患者肿瘤组织中均有不同程度表达，并且表达程度与肿瘤恶性程度，患者生存时间相关联，表明PD-L1不仅是判断结肠癌患者预后的预测指标之一，抗PD-L1治疗也是治疗结肠癌的有效手段。目前PD-1/PD-L1抑制剂的开发主要集中在单克隆抗体领域，已有尼伏单抗(nivolumab)、潘利珠单抗(pembrolizumab)、阿维单抗(avelumab)等多种药物上市，应用于多种恶性肿瘤，治疗效果显著，与之对比，小分子抑制剂的药物研发却进展缓慢，亟待开发。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供人参二醇在制备抑制PD-L1蛋白、肿瘤细胞增殖蛋白的表达的药物中的应用；所述人参二醇能够剂量性依赖的抑制PD-L1蛋白表达，抑制肿瘤细胞增殖相关蛋白的表达，能够增强肿瘤相关细胞毒性T淋巴细胞活力，降低肿瘤细胞增殖能力。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：本专利技术提供了人参二醇在制备抑制PD-L1蛋白表达的药物中的应用。本专利技术提供了人参二醇在制备抑制PD-L1基因转录的药物中的应用。本专利技术提供了人参二醇在制备抑制肿瘤细胞增殖的药物中的应用。本专利技术提供了人参二醇在制备抑制肿瘤细胞增殖蛋白表达的药物中的应用。优选的，所述肿瘤细胞增殖蛋白包括CyclinD1，c-Myc和VEGF。本专利技术提供了人参二醇在制备增强细胞毒性T淋巴细胞活力的药物中的应用。优选的，所述细胞毒性T淋巴细胞为被肿瘤PD-L1通路抑制的细胞毒性T淋巴细胞。本专利技术提供了人参二醇在制备抑制裸鼠移植瘤体积的药物中的应用。本专利技术的有益效果：本专利技术提供的天然小分子化合物人参二醇不但可以抑制PD-L1蛋白表达水平，阻断PD-1/PD-L1信号通路，恢复T细胞活力，同时亦能抑制肿瘤细胞增殖；本专利技术提供的人参二醇能够作为一种新型小分子药物应用于结肠癌治疗。根据实施例的记载，人参二醇能够剂量性地抑制PD-L1蛋白的表达，剂量性地抑制PD-L1的RNA转录水平；能剂量性地抑制PD-L1阳性细胞率。本专利技术提供的人参二醇还能剂量性地抑制缺氧诱导的肿瘤增殖相关蛋白CyclinD1，c-Myc和VEGF的表达；剂量性地减少EdU阳性细胞数，抑制肿瘤细胞增殖，人参二醇能够显著提高共培养体系中T细胞的活力；人参二醇还能有效地抑制裸鼠移植瘤的体积，并对裸鼠体重无明显影响。附图说明图1显示用Westernblot法证实人参二醇以剂量依赖性方式抑制三种人结肠癌细胞系中PD-L1蛋白表达；图2显示用PCR法证实人参二醇以剂量依赖性方式抑制三种人结肠癌细胞系中PD-L1的RNA转录；图3显示用流式细胞术证实人参二醇能够有效抑制肿瘤细胞表面PD-L1阳性率；图4显示用ELISA证实人参二醇能够恢复被肿瘤PD-L1通路抑制的T细胞活力；图5显示用Westernblot法证实人参二醇以剂量依赖性方式抑制肿瘤细胞中增殖相关蛋白表达；图6显示用EdU法证实人参二醇抑制肿瘤细胞增殖能力；图7显示用集落形成实验证实人参二醇抑制肿瘤细胞增殖能力；图8显示用裸鼠移植瘤实验证实人参二醇能抑制裸鼠移植瘤体积；图9为裸鼠移植瘤体积实拍图。具体实施方式本专利技术提供了人参二醇在制备抑制PD-L1蛋白表达的药物中的应用、人参二醇在制备抑制PD-L1基因转录的药物中的应用。在本专利技术中，所述人参二醇能够剂量性抑制PD-L1基因的转录和PD-L1蛋白表达；优选的能够抑制三种稳定的人结肠癌细胞株HCT116，SW620和HT29中的PD-L1基因的转录和PD-L1蛋白表达；并且能够剂量性地抑制PD-L1阳性细胞率；所述人参二醇能够作为抑制结肠癌中PD-L1基因的转录和PD-L1蛋白表达的药物，进而能够作为抑制结肠癌的药物。本专利技术对所述药物的剂型和辅料没有特殊限定，采用本领域常规的剂型和辅料即可。本专利技术还提供了人参二醇在制备抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤细胞增殖蛋白表达的药物中的应用。在本专利技术中所述肿瘤细胞增殖蛋白优选的包括CyclinD1，c-Myc和VEGF；所述人参二醇能够能剂量性地抑制蛋白CyclinD1，c-Myc和VEGF的表达。本专利技术对所述药物的剂型和辅料没有特殊限定，采用本领域常规的剂型和辅料即可。本专利技术还提供了人参二醇在制备增强细胞毒性T淋巴细胞活力的药物中的应用。在本专利技术中，所述细胞毒性T淋巴细胞优选为被肿瘤PD-L1通路抑制的细胞毒性T淋巴细胞；所述人参二醇能够显著提高肿瘤细胞/T细胞共培养体系中T细胞的活力。本专利技术对所述药物的剂型和辅料没有特殊限定，采用本领域常规的剂型和辅料即可。本专利技术还提供了人参二醇在制备抑制裸鼠移植瘤体积的药物中的应用。在本专利技术中，所述能有效地抑制裸鼠移植瘤的体积，对裸鼠体重无明显影响。本专利技术对所述药物的剂型和辅料没有特殊限定，采用本领域常规的剂型和辅料即可。下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。实施例1细胞培养技术选用三种稳定的人结肠癌细胞株HCT116，SW620，HT29细胞(购于美国菌种保藏中心ATCC)进行培养，待细胞进入对数生长期后，用0.2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人参二醇在制备抑制PD-L1蛋白表达的药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.人参二醇在制备抑制PD-L1蛋白表达的药物中的应用。


2.人参二醇在制备抑制PD-L1基因转录的药物中的应用。


3.人参二醇在制备抑制肿瘤细胞增殖的药物中的应用。


4.人参二醇在制备抑制肿瘤细胞增殖蛋白表达的药物中的应用。


5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：金学军，马娟，王喆，
申请(专利权)人：延边大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22