本申请公开了胆固醇在甲状腺功能减退中的用途。所述甲状腺功能减退包括如下变化中的至少一种：1)血清总甲状腺素(TT4)降低，2)血清游离甲状腺素(FT4)降低，3)血清促甲状腺激素(TSH)升高。本发明专利技术通过研究证明：1、胆固醇过量摄入可影响甲状腺细胞功能，在甲状腺功能减退的发生发展中具有一定作用；2、胆固醇可引起甲状腺细胞内质网应激及PERK/eIF2α通路的激活；3、胆固醇可下调甲状腺细胞中NIS的表达，至少部分是通过内质网应激起作用的。
The use of cholesterol in hypothyroidism
The application discloses the use of cholesterol in hypothyroidism. The hypothyroidism includes at least one of the following changes: 1) a decrease in serum total thyroxine (TT4), 2) a decrease in serum free thyroxine (FT4), and 3) an increase in serum thyrotropin (TSH). The invention has been proved by research that: 1. Excessive intake of cholesterol can affect the function of thyroid cells and play a certain role in the occurrence and development of hypothyroidism; 2. Cholesterol can cause endoplasmic reticulum stress and activation of perk / eIF2 \u03b1 pathway in thyroid cells; 3. Cholesterol can downregulate the expression of NIS in thyroid cells, at least partially through endoplasmic reticulum.
【技术实现步骤摘要】
胆固醇在甲状腺功能减退中的用途
本专利技术涉及生物
，具体说是胆固醇在引发甲状腺功能减退中的用途。
技术介绍
胆固醇是哺乳动物组织细胞中不可缺少的重要物质，它不仅参与细胞膜的形成，而且是机体合成维生素D、甾体激素及胆汁酸的原料。随着人们生活方式的转变，高胆固醇血症的患病率逐年增高，据统计，在我国≥20岁人群中，高胆固醇血症的患病率为9.0％，临界性高胆固醇血症的患病率为22.5％。胆固醇超载与疾病的关系已引起国内外广泛关注。大量研究表明胆固醇可损伤胰岛β细胞、肝细胞、血管平滑肌细胞及海马细胞功能，在糖尿病、脂肪肝、动脉粥样硬化性疾病及阿尔茨海默症等疾病发病中发挥作用。近年来，我国甲状腺疾病的患病率显著增高，2010年中国首次10城市居民甲状腺疾病流行病学调查结果显示：我国甲状腺功能亢进症的患病率为3.7％，甲状腺功能减退症的患病率达6.5％。甲状腺疾病已日益成为威胁中国居民健康的杀手。作为合成和分泌甲状腺激素的内分泌器官，甲状腺在中枢神经系统、长骨、心血管系统的生长发育及维持机体的新陈代谢方面发挥着重要作用。甲状腺激素是一类含碘的酪氨酸衍生物，其合成主要是在甲状腺细胞钠碘转运体(Sodiumiodidesymporter,NIS)、甲状腺过氧化物酶(Thyroidperoxidase,TPO)、甲状腺球蛋白(Thyroglobulin,Tg)等分子的参与下完成的。钠碘转运体(NIS)是位于甲状腺滤泡上皮细胞基底外侧膜的跨膜蛋白，主要作用是转运碘离子进入滤泡上皮细胞，即细胞富集碘。NIS所介导的摄碘是甲状腺激素合成的首要条件。甲状腺过氧化物酶(TPO)是甲状腺激素合成过程中的关键酶，位于甲状腺滤泡上皮细胞顶端膜侧，在碘的活化、甲状腺球蛋白酪氨酸残基的碘化以及碘化酪氨酸的耦联中发挥催化作用。甲状腺球蛋白(Tg)是由甲状腺滤泡上皮细胞特异性合成的一种高度糖基化的大分子分泌蛋白，碘与Tg上的酪氨酸残基结合形成碘化酪氨酸，其主要作用是为甲状腺素的合成提供前体物质，且是甲状腺激素的储存形式。因此任何一种分子的表达或活性发生改变，都必然会影响甲状腺激素的合成。内质网(EndoplasmicReticulum，ER)是广泛存在于真核细胞中的一种重要的细胞器，负责分泌蛋白和跨膜蛋白的合成、折叠、组装和运输。在外部因素过度刺激作用下，内质网生理功能发生紊乱，使未折叠及错误折叠的蛋白质增多并在内质网腔内堆积，造成内质网应激(EndoplasmicReticulumStress，ERStress)。内质网分子伴侣与内质网内新生肽结合，帮助其正确的折叠和转运，其中免疫重链结合蛋白Bip(Bindingimmunoglobulinprotein)是最重要、最有代表性的分子伴侣之一。生理状态下，Bip与其下游的PERK、IRE-1和ATF6结合；内质网应激时，Bip与下游分子解离，表达增加，因此BIP常常被认为是内质网应激发生的标志。目前，尚无研究表明，胆固醇在引发甲状腺功能减退中的作用。
技术实现思路
针对现有技术中存在的缺陷，本专利技术的目的在于提供胆固醇在引发甲状腺功能减退中的用途。本申请以内质网应激为切入点，分别通过体内(高胆固醇喂养大鼠模型)与体外细胞水平(胆固醇刺激甲状腺细胞及干扰信号等技术)研究，阐明胆固醇对甲状腺细胞功能的影响，识别其主要调控途径和关键分子，为血脂异常伴甲状腺功能异常提供新的治疗思路和策略。一方面，本专利技术提供了胆固醇在制备引发受试者甲状腺功能减退的产品中的用途。另一方面，本专利技术提供了胆固醇在制备甲状腺功能减退的动物模型中的应用。在上述应用中，所述动物为哺乳动物。在上述应用中，所述哺乳动物为大鼠或小鼠，优选为大鼠。在上述用途或应用中，所述甲状腺功能减退包括如下1)-6)变化中的至少一种：1)血清总甲状腺素(TT4)降低，2)血清游离甲状腺素(FT4)降低，3)血清促甲状腺激素(TSH)水平升高，4)甲状腺总体积、甲状腺左叶体积、和/或甲状腺右叶体积变大；优选的，所述甲状腺总体积中包括甲状腺左叶体积和甲状腺右叶体积，5)甲状腺滤泡变大，滤泡上皮细胞变矮呈扁平状，胶状液体增加；6)甲状腺对碘的摄取率降低。本专利技术的有益效果如下：本专利技术通过研究证明：1、胆固醇过量摄入可影响甲状腺细胞功能，在甲状腺功能减退的发生发展中具有一定作用；2、胆固醇可引起甲状腺细胞内质网应激及内质网应激相关通路——PERK/eIF2α通路的激活；3、胆固醇可下调甲状腺细胞中NIS的表达，至少部分是通过内质网应激起作用的。附图说明图1为光学显微镜下观察的人甲状腺原代细胞形态，其中，a图为培养2-3天的细胞形态，b图为培养5-7天的细胞形态。图2为高胆固醇饮食大鼠体重及血清TC、LDL-C及TG结果。图3为高胆固醇饮食大鼠血清TSH、TT4及FT4结果。图4为高胆固醇饮食大鼠甲状腺形态学检测结果，其中，a图为高频超声扫描图，b图为HE染色图，c图为甲状腺外观形态照片。图5为胆固醇对大鼠甲状腺和人甲状腺原代细胞中NIS的mRNA水平影响，其中，a图为大鼠甲状腺结果，b图为人甲状腺原代细胞结果，Chol(μg/ml)代表胆固醇处理浓度。图6为免疫组化检测高胆固醇饮食对大鼠甲状腺NIS蛋白水平的影响，其中，a图为甲状腺石蜡包埋切片NIS免疫组化的镜检结果，棕黄色为阳性染色。b图为检测a图中阳性染色值的结果，信号值0-255代表阳性染色的强弱。图7为WesternBlotting检测NIS蛋白在胆固醇处理的人甲状腺原代细胞中的表达。图8为免疫荧光方法检测NIS蛋白在胆固醇处理的甲状腺细胞中的表达，其中，Chol为15μg/mL胆固醇处理72小时后的检测结果。图9为放射性碘131摄取率结果，其中，a图为大鼠甲状腺结果，b图为人甲状腺原代细胞结果，其中，Chol为15μg/mL胆固醇处理72小时后的检测结果。图10为不同胆固醇浓度处理后人甲状腺原代细胞内的胆固醇含量检测结果。图11为Ezetimibe预处理人甲状腺细胞后细胞总胆固醇FILIPIN荧光染色结果。图12为WesternBlotting检测Ezetimibe预处理对甲状腺细胞NIS蛋白表达水平的影响，其中E代表Ezetimibe。图13为免疫荧光方法检测NIS蛋白在Ezetimibe预处理的甲状腺细胞中的表达。图14为高胆固醇饮食大鼠甲状腺内质网应激的透射电镜结果。图15为免疫组化检测高胆固醇饮食对大鼠甲状腺Bip蛋白水平的影响。图16a为胆固醇处理的人甲状腺细胞中Bip的mRNA相对表达水平。图16b为胆固醇处理的人甲状腺细胞中NIS和Bip蛋白的表达水平。图17为免疫荧光方法同时检测胆固醇处理的人甲状腺细胞中Bip和钙联蛋白的表达水平。图18为WesternBlotting检测胆固醇处理的人甲状腺细胞中内质网本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.胆固醇在制备引发受试者甲状腺功能减退的产品中的用途。/n
【技术特征摘要】
1.胆固醇在制备引发受试者甲状腺功能减退的产品中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述甲状腺功能减退包括如下1)-3)变化中的至少一种：
1)血清总甲状腺素(TT4)降低，
2)血清游离甲状腺素(FT4)降低，
3)血清促甲状腺激素(TSH)升高。
3.胆固醇在制备甲状腺功能减退的动物模型中的应用。
4.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵家军，邵珊珊，高聆，赵萌，
申请(专利权)人：山东省立医院，
类型：发明
国别省市：山东;37
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