用于IGF-1R抑制的P-乙氧基核酸制造技术

本文提供了用于寡核苷酸的改良的递送系统，所述递送系统包含有包含中性磷脂的脂质体和靶向编码IGF‑1R的多核苷酸的P‑乙氧基寡核苷酸。还提供了用所述递送系统治疗患者的方法。

P-ethoxynucleic acid for IGF-1R inhibition

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于IGF-1R抑制的P-乙氧基核酸本申请案要求2017年4月19日提交的美国临时申请案第62/487,420号的优先权，所述申请案的全部内容以引用的方式并入本文中。
本专利技术大体上涉及医学领域。更明确地说，本专利技术涉及与IGF-1R多核苷酸基因产物杂交的P-乙氧基寡核苷酸的脂质体配制物，和制造所述配制物并在医学中，甚至更明确地说在具有高IGF-1R基因表达或增加的活性的癌症治疗中使用所述配制物的方法。
技术介绍
胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)是具有酪氨酸激酶活性的糖蛋白受体。其是异四聚体受体，所述异四聚体受体的每一半—通过双硫桥键连接—由细胞外α-子单元和跨膜β-子单元构成。IGF-IR以非常高的亲和力结合IGFI和IGFII。IGF-1R介导促有丝分裂的分化和抗细胞凋亡作用。通过结合配体与受体的细胞外域来激活细胞质酪氨酸激酶蛋白。反过来，激酶激活涉及包括IRS-1、IRS-2、Shc和Grb10的不同细胞内受质的刺激。IGF系统在致癌作用中的作用已经成为深入研究的主题。这种兴趣遵循以下事实的发现：除了其促有丝分裂和抗细胞凋亡性质之外，IGF-1R似乎对于建立和维持转化表型而言是必需的。实际上，已经明确IGF-1R的过度表达或构成性激活在各种各样的细胞中导致不依赖于不含胎牛血清的培养基中的支持的细胞生长，并且在裸小鼠中导致肿瘤形成。IGF-IR在各种各样的肿瘤和肿瘤系中表达，并且IGF通过其与IGF-1R的连接而扩增了肿瘤生长。引起关注地，针对IGF-1R的鼠单克隆抗体抑制培养物中的许多细胞系的增殖和活体内肿瘤细胞的生长(Arteaga等人，1989；Li等人，1993；Zia等人，1996；Scotlandi等人，1998)。另外，IGF-IR的负性显性基因能够抑制肿瘤增殖(Jiang等人，1999)。因此，IGF-1R在致癌作用和肿瘤进展中起重要作用。因此，需要用于有效地抑制IGF-1R表达的组合物和方法。
技术实现思路
本文提供用于使用与防止IGF-1R蛋白表达、因此消除可用IGF-1R蛋白池的中性脂质体组合的靶向编码IGF-1R的多核苷酸的无毒耐核酸酶性寡核苷酸来抑制IGF-1R表达的组合物。在一个实施例中，提供了包含与IGF-1R多核苷酸基因产物杂交的寡核苷酸群的组合物。在一些方面中，所述群的寡核苷酸由通过磷酸酯骨架键连接在一起的核苷分子构成，其中每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键中的至少一个是P-乙氧基骨架键，并且其中不超过80％每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键。在一些方面中，每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键中的至少一个是磷酸二酯骨架键。在一些方面中，所述群的寡核苷酸包含根据SEQIDNO:1-2中的任一个的序列。在一些方面中，所述群的寡核苷酸包含根据SEQIDNO:1的序列。在一个方面中，所述群的寡核苷酸包含根据SEQIDNO:1的序列，并且至少介于所述群的寡核苷酸的核苷酸5与6之间、核苷酸11与12之间和核苷酸16与17之间的磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键。在一些方面中，所述群的寡核苷酸包含根据SEQIDNO:2的序列。在一个方面中，所述群的寡核苷酸包含根据SEQIDNO:2的序列，并且至少介于所述群的寡核苷酸的核苷酸5与6之间、核苷酸11与12之间和核苷酸17与18之间的磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键。在各种方面中，所述群的寡核苷酸抑制IGF-1R蛋白的表达。在一些方面中，冻干组合物。在一些方面中，10％到80％磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键；20％到80％磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键；30％到80％磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键；40％到80％磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键；50％到80％磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键；或60％到70％磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键，或其中可衍生的任何范围是P-乙氧基骨架键。在一些方面中，20％到90％磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键；20％到80％磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键；20％到70％磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键；20％到60％磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键；20％到50％磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键；或30％到40％磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键，或其中可衍生的任何范围是磷酸二酯骨架键。在各种方面中，至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％或其中的任何值的磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键。在各种方面中，至多5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％或其中的任何值的磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键。在某些方面中，磷酸二酯骨架键分布在整个寡核苷酸中。因此，寡核苷酸不是嵌合分子。在一些方面中，寡核苷酸不包含硫代磷酸酯骨架键。在一些方面中，所述群的寡核苷酸的尺寸介于7到30个核苷酸范围内。在某些方面中，所述群的寡核苷酸的尺寸介于12到25个核苷酸范围内。在各种方面中，所述群的寡核苷酸的尺寸是至少5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个核苷酸。尺寸范围可以是所述群中的寡核苷酸的平均尺寸。在一些方面中，所述群的寡核苷酸的平均尺寸是7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个核苷酸，其中每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键中的不超过5、6、7、8、8、9、10、11、11、12、13、14、15、15、16、17、18、19、20、20、21、22、23或24个分别是P-乙氧基骨架键。在一些方面中，所述群的寡核苷酸的平均尺寸是7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个核苷酸，并且每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键中的至少2、2、2、2、3、3、3、3、4、4、4、4、4、5、5、5、5、5、5、6、6、6、6或6个分别是磷酸二酯骨架键。举例来说，所述群的寡核苷酸的平均尺寸可以是18个核苷酸，其中每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键中的不超过14个是P-乙氧基骨架键；所述群的寡核苷酸的平均尺寸可以是20个核苷酸，其中每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键中的不超过16个是P-乙氧基骨架键；所述群的寡核苷酸的平均尺寸可以是25个核苷酸，其中每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键中的不超过20个是P-乙氧基骨架键；或所述群的寡核苷酸的平均尺寸可以是30个核苷酸，其中每个寡核苷酸中的磷酸酯骨架键中的不超过24个是P-乙氧基骨架键。在一些方面中，寡核苷酸群包含单一种类的寡核苷酸。在其它方面中，寡核苷酸群包含至少两个种类的寡核苷酸。单一种类的寡核苷酸可以具有相同核苷酸序列，但是在分子内的不同位置具有或缺乏P-乙氧基键。因此，所述群在核苷酸序列方面可以是均匀的，而在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物，其包含寡核苷酸群，其中所述寡核苷酸与IGF-1R多核苷酸基因产物杂交，其中所述群的寡核苷酸由通过磷酸酯骨架键连接在一起的核苷分子构成，其中每一个寡核苷酸中的所述磷酸酯骨架键中的至少一个是P-乙氧基骨架键，并且其中不超过80％的每一个寡核苷酸中的所述磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170419 US 62/487,4201.一种组合物，其包含寡核苷酸群，其中所述寡核苷酸与IGF-1R多核苷酸基因产物杂交，其中所述群的寡核苷酸由通过磷酸酯骨架键连接在一起的核苷分子构成，其中每一个寡核苷酸中的所述磷酸酯骨架键中的至少一个是P-乙氧基骨架键，并且其中不超过80％的每一个寡核苷酸中的所述磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键。


2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述群的寡核苷酸包含根据SEQIDNO:1到2中的任一个的序列。


3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述群的寡核苷酸包含根据SEQIDNO:1的序列。


4.根据权利要求2所述的组合物，其中所述群的寡核苷酸包含根据SEQIDNO:2的序列。


5.根据权利要求1所述的组合物，其中50％到80％所述磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键。


6.根据权利要求5所述的组合物，其中60％到75％所述磷酸酯骨架键是P-乙氧基骨架键。


7.根据权利要求1所述的组合物，其中20％到50％所述磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键。


8.根据权利要求7所述的组合物，其中25％到40％所述磷酸酯骨架键是磷酸二酯骨架键。


9.根据权利要求1所述的组合物，其中磷酸二酯骨架键分布遍及每一个寡核苷酸。


10.根据权利要求1所述的组合物，其中磷酸二酯骨架键不聚集在每一个寡核苷酸的一部分内。


11.根据权利要求1所述的组合物，其中所述寡核苷酸群就存在于所述群的所述寡核苷酸中的P-乙氧基骨架键和磷酸二酯骨架键的数量而言是不均匀的。


12.根据权利要求1所述的组合物，其中所述群的所述寡核苷酸的尺寸介于18到30个核苷酸范围内。


13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述群的所述寡核苷酸的平均尺寸是18个核苷酸，其中每一个寡核苷酸中的所述磷酸酯骨架键中的不超过14个是P-乙氧基骨架键。


14.根据权利要求12所述的组合物，其中所述群的所述寡核苷酸的平均尺寸是20个核苷酸，其中每一个寡核苷酸中的所述磷酸酯骨架键中的不超过16个是P-乙氧基骨架键。


15.根据权利要求12所述的组合物，其中所述群的所述寡核苷酸的平均尺寸是2...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·T·阿西扎瓦，
申请(专利权)人：拜奥帕斯控股股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US