【技术实现步骤摘要】
一种人肠道菌群定量检测方法及其应用
本专利技术涉及微生物检测的
,特别是一种人肠道菌群定量检测方法及应用的
技术介绍
人体肠道内存在大量共生微生物,并通过多种途径影响人体健康,尤其是各种代谢物在人体的健康促进和疾病发生、发展中起着重要作用。肠道微生态研究发现,糖尿病、肠易激综合征(IBS)、炎性肠病(IBD)、肥胖、抑郁症等疾病均与肠道微生态相关,最新研究发现阿尔兹海默症或与肠道微生物有关,肠道微生态平衡正成为人体健康的重要标志。维持肠道微生态的动态平衡,有助于人体抵御各种疾病的干扰,保持健康状态,维持肠道微生态的平衡主要是维持肠道菌群的数量保持在稳定健康数值范围内。肠道菌群种类繁多,主要有普拉梭菌、肠球菌、拟杆菌、双歧杆菌、乳酸菌、奇异菌属、柔嫩梭菌、真杆菌、肠杆菌、酪酸梭菌、毛螺菌、阿克曼菌、弧菌等。肠杆菌(Enterobacteriaceae),该菌科为人体肠道内正常菌群,参与人体的代谢及免疫,但该菌属,尤其是大肠杆菌,很大一部分菌为致病菌或条件致病菌,当人体免疫力低下或细菌侵入肠道以外 ...
【技术保护点】
1.一种人肠道菌群定量检测方法,其特征在于:包括以下几个步骤:/nS01、粪便样本采集、存放与标记:收集目标人群的待测粪便,取适量的粪便末端作为粪便样本,并将粪便样本放入采集管中加入适量的粪便保存液摇匀,标记粪便样本用户信息;/nS02、粪便样本处理与检测:取粪便样本上清液,加入标定量的内参菌株Sa,采用磁珠法粪便DNA提取试剂盒提取核酸,设置阴性对照组、内参菌株组和若干标准组测定每组浓度后进行荧光PCR检测;/nS03、检测结果分析:统计检测菌的含量,确定检测粪便样本与健康人群的菌群范围差异,从而评估目标人群的肠道健康情况。/n
【技术特征摘要】
1.一种人肠道菌群定量检测方法,其特征在于:包括以下几个步骤:
S01、粪便样本采集、存放与标记:收集目标人群的待测粪便,取适量的粪便末端作为粪便样本,并将粪便样本放入采集管中加入适量的粪便保存液摇匀,标记粪便样本用户信息;
S02、粪便样本处理与检测:取粪便样本上清液,加入标定量的内参菌株Sa,采用磁珠法粪便DNA提取试剂盒提取核酸,设置阴性对照组、内参菌株组和若干标准组测定每组浓度后进行荧光PCR检测;
S03、检测结果分析:统计检测菌的含量,确定检测粪便样本与健康人群的菌群范围差异,从而评估目标人群的肠道健康情况。
2.如权利要求1所述的人肠道菌群定量检测方法,其特征在于:所述粪便样本和粪便保存液按W/V为(3~5):1的比例进行混匀。
3.如权利要求1所述的人肠道菌群定量检测方法,其特征在于:所述PCR检测中使用的荧光物为SYBR荧光染料、Taqman探针染料或分子信标中的一种,PCR检测使用的PCR反应液由2XSYBRPCR预混液反应液、引物1、引物2和去离子水组成。
4.如权利要求3所述的人肠道菌群定量检测方法,其特征在于:所述引物1和引物2的浓度均为0.1uM。
5.如权利要求3所述的人肠道菌群定...
【专利技术属性】
技术研发人员:李强,朱罗罗,徐威,张辉,林清源,
申请(专利权)人:杭州同创越诚基因科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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