水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路及防治口腔癌的药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药领域，具体涉及水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路及防治口腔癌的药物中的应用。具体的一种式Ⅰ的水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路的药物中的应用，

Application of epimedin hydrate in the preparation of drugs to inhibit STAT3 signaling pathway and prevent oral cancer

The invention belongs to the field of medicine, in particular to the application of Epimedium hydrate in the preparation of drugs for inhibiting STAT3 signal pathway and preventing oral cancer. Specifically, the application of icariin hydrate of formula I in the preparation of drugs inhibiting STAT3 signaling pathway,

【技术实现步骤摘要】
水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路及防治口腔癌的药物中的应用
本专利技术属于医药领域，具体涉及水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路及防治口腔癌的药物中的应用。技术背景口腔癌是世界上最常见的头颈部癌症之一，其中口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma，OSCC)占口腔癌的90％以上，其发病率呈现明显上升的趋势，已经成为全球共同关注的公共卫生问题之一。口腔癌发生发展的分子机制目前尚不明确，治疗方案仍以手术和放化疗为主。由于其较高的区域转移、局部复发及对化疗的耐药性特点，口腔癌患者的五年生存率未有明显提高。因此，开发新的防治口腔癌的安全强效药物势在必行。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于提供一种水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路的药物中的应用。本专利技术的目的之二在于提供一种水合淫羊藿素在制备防治口腔癌的药物中的应用。本专利技术的目的之三在于提供一种水合淫羊藿素纳米药物制剂，大大增强了水合淫羊藿素的水溶性，在水溶液中自组装为稳定的纳米药物胶束，具有良好的生物相容性。本专利技术的目的之四在于提供一种水合淫羊藿素纳米药物制剂的制备方法，方法简单，得到的纳米药物制剂能用于口腔癌的预防和治疗中。本专利技术的目的之一通过以下技术方案实现：式Ⅰ的水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路的药物中的应用，优选地，是在制备抑制STAT3及其上游通路JAK2的蛋白磷酸化，促进自噬泡增多和自噬相关标记蛋白LC3-I向LC3-II转变，增加BECN1、ATG9蛋白的表达，减少自噬负相关蛋白p62/SQSTM1表达的药物中的应用。本专利技术的目的之二通过以下技术方案实现：式Ⅰ的水合淫羊藿素在制备防治口腔癌的药物中的应用，本专利技术的目的之三通过以下技术方案实现：一种水合淫羊藿素纳米药物制剂，包括如式Ⅰ所示的水合淫羊藿素和两亲性嵌段高分子聚合物，优选地，所述两亲性嵌段高分子聚合物为PEG-PCL或PEG-PLGA。优选地，所述两亲性嵌段高分子聚合物为PEG(2000)-PCL(5000)、PEG(2000)-PCL(2000)、PEG(2000)-PLGA(5000)中的任意一种。优选地，所述水合淫羊藿素与两亲性嵌段高分子聚合物PEG(2000)-PCL(5000)的质量比值为1:20。本专利技术的目的之四通过以下技术方案实现：一种所述的水合淫羊藿素纳米药物制剂的制备方法，将水合淫羊藿素和两亲性嵌段高分子聚合物溶解在有机溶剂中，待其完全溶解后，除去有机溶剂，然后涡旋、搅拌、过滤、冷冻干燥，即得到所述水合淫羊藿素纳米药物制剂。本专利技术具有以下优点和有益效果：本专利技术通过体外细胞实验发现，水合淫羊藿素在口腔癌细胞中能抑制STAT3及其上游通路JAK2的蛋白磷酸化，促进自噬泡增多和自噬相关标记蛋白LC3-I向LC3-II转变，增加BECN1、ATG9蛋白的表达，减少自噬负相关蛋白p62/SQSTM1的表达，提示水合淫羊藿素可以用于抑制STAT3信号通路激活细胞自噬的药物。其次，本专利技术公开了水合淫羊藿素通过抑制STAT3信号通路激活细胞自噬，明显抑制口腔癌细胞的增殖、诱导癌细胞凋亡、抑制癌细胞的侵袭和迁移。在小鼠口腔癌病损中，水合淫羊藿素可显著降低小鼠口腔癌上皮中的p-STAT3及其上游p-JAK2蛋白表达水平，减少小鼠口腔恶性肿瘤数量，说明水合淫羊藿素对口腔癌的发生、发展有显著的抑制作用。本专利技术的水合淫羊藿素纳米药物制剂以两亲性嵌段高分子聚合物为载体，能够使水合淫羊藿素稳定存在于纳米颗粒内部，在水溶液中，能在较低浓度的条件下自组装形成稳定的纳米胶束，增强了药物的水溶性，包封率达80％以上，具有较高的体内外稳定性，且生物毒性小。本专利技术经过实验发现，水合淫羊藿素纳米药物制剂相比于普通水合淫羊藿素，纳米药物制剂发挥作用更快、抑制口腔癌细胞效果更好，因此，水合淫羊藿素纳米药物制剂是一种制备简单、极具开发前景的用于口腔癌预防和治疗的药物。根据本专利技术，将水合淫羊藿素用于预防和治疗口腔癌的应用中，证实水合淫羊藿素能抑制口腔癌细胞和小鼠舌部鳞癌中STAT3信号通路活化，促进自噬泡增多和自噬相关标记蛋白LC3-I向LC3-II转变，增加BECN1、ATG9蛋白的表达，减少自噬负相关蛋白p62/SQSTM1表达，抑制口腔癌细胞的增殖、诱导癌细胞凋亡、减少癌细胞的侵袭和迁移。本专利技术实施例的水合淫羊藿素纳米药物制剂的制备方法，该制备方法简单，得到的纳米药物制剂能用于口腔癌的预防和治疗中。附图说明图1为本专利技术实施例1的水合淫羊藿素在口腔癌细胞中抑制STAT3信号通路的结果图；图2为本专利技术实施例2的水合淫羊藿素对口腔癌细胞自噬的影响图；图3为本专利技术实施例3的水合淫羊藿素对口腔癌细胞生长抑制结果图；图4为本专利技术实施例3的水合淫羊藿素对口腔癌细胞凋亡的作用图；图5为本专利技术实施例3的水合淫羊藿素对口腔癌细胞侵袭和迁移的作用图；图6为本专利技术实施例3的水合淫羊藿素对舌部癌前病变转变的影响图；图7为本专利技术实施例3的水合淫羊藿素对小鼠舌部癌组织STAT3信号通路的抑制作用图；图8为本专利技术实施例5的水合淫羊藿素纳米药物制剂合成示意图；图9为本专利技术实施例5的水合淫羊藿素纳米药物制剂的粒径分析图；图10为本专利技术实施例5的水合淫羊藿素纳米药物制剂的透射电镜图；图11为本专利技术实施例5的水合淫羊藿素纳米药物制剂的吸收光谱(A)，以及浓度与相应吸光度的标准曲线(B)；图12为本专利技术实施例5的水合淫羊藿素纳米药物制剂的临界胶束浓度分析图；图13为本专利技术实施例5的水合淫羊藿素纳米药物制剂的体外释药曲线；图14为本专利技术实施例6的水合淫羊藿素纳米药物制剂的细胞摄取及分布结果图；图15为本专利技术实施例6的水合淫羊藿素纳米药物制剂的细胞毒性结果图。具体实施方式为更好的理解本专利技术，下面的实施例是对本专利技术的进一步说明，但本专利技术的内容不仅仅局限于下面的实施例。实施例中涉及到的原料均为商购获得。实施例中涉及的水合淫羊藿素的结构式如式Ⅰ所示：实施例1水合淫羊藿素在抑制口腔癌细胞STAT3信号通路中的应用。具体方法如下：蛋白提取、浓度测定及变性：使用各浓度(0、2μM、4μM、8μM、16μM)水合淫羊藿素培养口腔癌细胞指定时间后，向10cm皿加入100μL裂解液，在冰上操作，收集口腔癌细胞裂解液。再将细胞裂解液转移至EP管中，加入蛋白酶抑制剂(裂解液:PMSF＝100:1)。将EP管置于4℃离心机，12000r.p.m.离心15min；吸取上清，转移至新的EP管；BCA法检测蛋白的浓度；按照需要的浓度进行蛋白样本的稀释，一般为4μg/μL；按照蛋白上样液:蛋白样本液1:4的比例，加入蛋白上样液；96℃加热10min使蛋白变性。配胶：根据检测分本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.式Ⅰ的水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路的药物中的应用，/n

【技术特征摘要】
1.式Ⅰ的水合淫羊藿素在制备抑制STAT3信号通路的药物中的应用，





2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：是在制备抑制STAT3及其上游通路JAK2的蛋白磷酸化，促进自噬泡增多和自噬相关标记蛋白LC3-I向LC3-II转变，增加BECN1、ATG9蛋白的表达，减少自噬负相关蛋白p62/SQSTM1表达的药物中的应用。


3.式Ⅰ的水合淫羊藿素在制备防治口腔癌的药物中的应用，





4.一种水合淫羊藿素纳米药物制剂，其特征在于：包括如式Ⅰ所示的水合淫羊藿素和两亲性嵌段高分子聚合物，





5.如权利要求4所述的水合淫羊藿素纳米药物制剂，其特征在于：所述两亲性嵌段高分子聚合...

【专利技术属性】
技术研发人员：周刚，杨建光，谭雅芹，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北;42