一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法技术

本发明专利技术提供一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，属于鱿鱼制品技术领域，包括将鱿鱼匀浆液中同时加入中性蛋白酶和枯草芽孢杆菌液进行培养的步骤；所用枯草芽孢杆菌液通过将枯草芽孢杆菌接种于LB肉汤中，于35‑40℃、100‑150r/min的条件下培养8‑12h制得，其中，LB肉汤中含有2‑氨基嘧啶和盐酸胍。本发明专利技术制备方法通过枯草芽孢杆菌和中性蛋白酶的菌酶联合作用，可溶蛋白转化率高，制得的鱿鱼营养生物制品含有较高的可溶蛋白含量和不饱和脂肪酸，具有良好的感官风味；制得的鱿鱼营养生物制品还能够更好地抑制有害菌生长，延长鱿鱼营养生物制品的保鲜期。

A preparation method of squid nutritional biological products by bacterial enzyme

The invention provides a preparation method for preparing squid nutritional biological products jointly by bacterial enzyme, belonging to the technical field of squid products, which includes the steps of adding neutral protease and Bacillus subtilis liquid into squid homogenate for culture; the Bacillus subtilis liquid is cultured for 8 \u2011 12h under the conditions of 35 \u2011 40 \u2103 and 100 \u2011 150r / min by inoculating Bacillus subtilis into LB broth The LB broth contains 2-Aminopyrimidine and guanidine hydrochloride. The preparation method of the invention has high soluble protein conversion rate through the combined action of Bacillus subtilis and neutral protease, and the squid nutritional biological product has high soluble protein content and unsaturated fatty acid, and has good sensory flavor; the squid nutritional biological product can better inhibit the growth of harmful bacteria, and prolong the preservation of squid nutritional biological product Period.

【技术实现步骤摘要】
一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法
本专利技术属于鱿鱼制品
，具体涉及一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法。
技术介绍
鱿鱼，又叫中国枪乌贼，是一种海洋软体类动物。鱿鱼从整体上可以分为三大部分：鱿鱼肉、头和足、鱿鱼皮和内脏，这三部分分别占其体重的50％、25％、25％，其中可食用的部分占其体重的75％，比其他大多数鱼类高出大概20％，由此能够看出，鱿鱼的整体利用率还是比较高的。鱿鱼的蛋白质含量较高，大概有20％，而且含有的氨基酸种类比较丰富，人体所需要的许多必需氨基酸都包涵在内；而鱿鱼的粗脂肪含量比较低，其中磷脂是其主要组成成分，大概占脂质总量的40％-50％。鱿鱼的加工处理会有很多的副产物产生，例如鱿鱼头、眼、表皮、软骨及内脏等下脚料，其大概占鱿鱼总体重的20％-25％。这些鱿鱼加工副产物营养丰富，不但含有大量的蛋白质、脂质，还富含牛磺酸、维生素、软骨素等，然而人们却忽视了它的高值化利用。但是鱿鱼的水分比例比较大，另外其体内的酶非常活跃，导致下脚料不能长期储存，而且随着储存时间的延长，下脚料还伴有很浓的腥臭味。对于鱿鱼下脚料的加工，由于缺乏成熟的加工工艺，导致加工难度比较大，进而造成高成本、低利润的状况，因而很多人见此状况就望而却步了。生物技术是目前研究的热点，微生物发酵是一种新型的，已经在实际的生产中得到了应用，并被证明安全可靠的技术，微生物发酵技术的应用也取得了良好的经济效益与适用价值，因而其具有广阔的发展空间。益生菌是一种可行的微生物膳食补充剂，通过其在肠道中的作用有益地影响宿主。在人体研究中已经报道了与益生菌的摄入相关的一些与健康相关的作用，包括减轻乳糖不耐受和免疫增强，促进食物消化，生产有用的产品以摧毁坏的微生物，补充错过的消化酶的功能(由于错过或缺陷的基因)，并维持消化系统的pH值，等等。
技术实现思路
本专利技术的一个目的在于提供一种可溶蛋白转化率的菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，制得的鱿鱼营养生物制品含有较高的可溶蛋白含量和不饱和脂肪酸，具有良好的感官风味；制得的鱿鱼营养生物制品还能够更好地抑制有害菌生长，延长鱿鱼营养生物制品的保鲜期。本专利技术为实现上述目的所采取的技术方案为：一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，包括将鱿鱼匀浆液中同时加入中性蛋白酶和枯草芽孢杆菌液进行培养的步骤。本专利技术制备方法通过枯草芽孢杆菌和中性蛋白酶的菌酶联合作用，可使可溶蛋白转化率达到24.38％，得到富含氨基酸和不饱和脂肪酸等营养物质。本专利技术制备方法能够抑制有害菌生长，延长鱿鱼营养生物制品的保鲜期，且和中性蛋白酶一同能为鱿鱼营养生物制品赋予良好感官风味。本专利技术制备方法采用生物转化的方法，绿色环保，添加的益生菌能够与鱿鱼本身所含营养物质相辅相成，同时为生物转化技术以及海产品副产物利用开辟道路。优选的，鱿鱼匀浆液中鱿鱼匀浆和蒸馏水的固液比为1:3-11。优选的，中性蛋白酶的添加量为500-6000u/g。优选的，枯草芽孢杆菌液的添加量为10-35％。优选的，枯草芽孢杆菌液通过将枯草芽孢杆菌接种于LB肉汤中，于35-40℃、100-150r/min的条件下培养8-12h制得。枯草芽孢杆菌液应选用处于对数生长后期的菌体，因为该阶段菌体代谢旺盛，产酶能力最强。更优选的，LB肉汤中含有2-氨基嘧啶和盐酸胍。枯草芽孢杆菌含有丰富的产酶系统，能够分泌大量的胞外蛋白酶，例如糖化酶、蛋白酶、脂肪酶以及淀粉酶等，其中绝大多数分泌蛋白酶通过Sec途径分泌；LB肉汤中的2-氨基嘧啶和盐酸胍存在能影响DNA复制时碱基的正常配对，引起基因发生颠换、转换、缺失以及移码突变等，获得产蛋白酶活性较高的枯草芽孢杆菌液，该枯草芽孢杆菌液在鱿鱼匀浆液中进行培养的过程中能够分泌更多的蛋白酶，能够进一步提高可溶蛋白转化率，高于32％。此外，该培养基获得的枯草芽孢杆菌液能够释放出更多的蛋白质类抑菌活性物质，对有害菌生长的抑制作用得到增强，从而能够延长所制生物制品的保鲜期。更进一步优选的，LB肉汤中含有质量浓度为0.01-0.1‰2-氨基嘧啶和0.03-0.08‰盐酸胍。该条件下的LB肉汤获得的枯草芽孢杆菌的产蛋白酶活性提高3倍以上。优选的，培养温度为20-60℃，转速为100-150r/min，时间为12-60h。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术制备方法通过枯草芽孢杆菌和中性蛋白酶的菌酶联合作用，可使可溶蛋白转化率达到24.38％，得到富含氨基酸和不饱和脂肪酸等营养物质。本专利技术制备方法能够更好地抑制有害菌生长，延长生物制品的保鲜期，且和中性蛋白酶一同能为鱿鱼营养生物制品赋予良好感官风味。本专利技术制备方法采用生物转化的方法，绿色环保，添加的益生菌能够与鱿鱼本身所含营养物质相辅相成，同时为生物转化技术以及海产品副产物利用开辟道路。本专利技术采用了上述技术方案提供一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，弥补了现有技术的不足，设计合理，操作方便。附图说明图1是本专利技术试验例1中枯草芽孢杆菌产酶活性的测定结果；图2是本专利技术试验例1中可溶蛋白转化率的测定结果；图3是本专利技术试验例1中风味鱿鱼营养生物制品中不饱和脂肪酸的含量测定结果。具体实施方式以下通过实施例来进一步阐明本专利技术。但是应该理解，所述实施例只是举例说明的目的，并不意欲限制本专利技术的范围和精神。实施例1：一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，包括如下步骤：S1：将鱿鱼副产物洗净后破碎匀浆，置于高压蒸汽灭菌锅中120℃，灭菌30min后，置于-20℃冰箱贮存备用；S2：将枯草芽孢杆菌接种于LB肉汤锥形瓶中，于37℃、120r/min的条件下摇床培养10h得枯草芽孢杆菌液，待用；S3：取鱿鱼匀浆2g于50ml离心管中，按照固液比1:5加入10g蒸馏水，移液枪吸取枯草芽孢杆菌液10％(200ul)于离心管中，并按照2000u/g加入中性蛋白酶，于40℃、pH7.0、120r/min的条件下培养48h，然后将培养液冷冻干燥，即得生物制品。实施例2：一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，包括如下步骤：S1：将鱿鱼副产物洗净后破碎匀浆，置于高压蒸汽灭菌锅中120℃，灭菌30min后，置于-20℃冰箱贮存备用；S2：将枯草芽孢杆菌接种于LB肉汤锥形瓶中，于37℃、120r/min的条件下摇床培养10h得枯草芽孢杆菌液，待用；S3：取鱿鱼匀浆2g于50ml离心管中，按照固液比1:9加入18g蒸馏水，移液枪吸取枯草芽孢杆菌液30％(600ul)于离心管中，并按照500u/g加入中性蛋白酶，于40℃、pH7.0、120r/min的条件下培养48h，然后将培养液冷冻干燥，即得生物制品。实施例3：一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，包括如下步骤：S1：将鱿鱼副产物洗净后破碎匀浆，置于高压蒸汽灭菌锅中120℃，灭菌30min本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，其特征在于：包括将鱿鱼匀浆液中同时加入中性蛋白酶和枯草芽孢杆菌液进行培养的步骤。/n

【技术特征摘要】
1.一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，其特征在于：包括将鱿鱼匀浆液中同时加入中性蛋白酶和枯草芽孢杆菌液进行培养的步骤。


2.根据权利要求1所述的一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，其特征在于：所述的鱿鱼匀浆液中鱿鱼匀浆和蒸馏水的固液比为1:3-11。


3.根据权利要求1所述的一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，其特征在于：所述的中性蛋白酶的添加量为500-6000u/g。


4.根据权利要求1或3所述的一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物制品的制备方法，其特征在于：所述的枯草芽孢杆菌液的添加量为10-35％。


5.根据权利要求1或3所述的一种菌酶联合制备鱿鱼营养生物...

【专利技术属性】
技术研发人员：闻正顺，
申请(专利权)人：浙江海洋大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33