一种唾液链球菌及其在治疗炎症性肠病药物中的应用，涉及生物技术领域。所述唾液链球菌(Streptococcus salivarius)1802，保藏中心保藏编号为CCTCC NO：M 2019251。唾液链球菌的筛选方法：将健康人粪便，使用无菌水重悬后，稀释至10^6倍，用平板划线法在脑心浸出液培养基进行分离培养，获得所述唾液链球菌(Streptococcus salivarius)1802。所述唾液链球菌(Streptococcus salivarius)1802可在制备治疗炎症性肠病药物中的应用。可在缓解炎症性肠病的炎症反应的药物中应用。可在缓解炎症性肠病结肠黏膜损伤的药物中应用。
Streptococcus salivarius and its application in the treatment of inflammatory bowel disease
The utility model relates to Streptococcus salivarius and its application in medicine for treating inflammatory bowel disease, and relates to the field of biotechnology. The Streptococcus salivarius 1802 is deposited in the deposit center with the deposit number of CCTCC No: m 2019251. Screening method of Streptococcus salivarius: after the feces of healthy people are resuspended with sterile water and diluted to 10 ^ 6 times, the Streptococcus salivarius 1802 is obtained by separating and culturing in the brain heart extract medium with the method of plate scribing. The Streptococcus salivarius 1802 can be used in the preparation of drugs for the treatment of inflammatory bowel disease. It can be used in medicine to relieve inflammatory reaction of inflammatory bowel disease. It can be used in the treatment of inflammatory bowel disease.
【技术实现步骤摘要】
一种唾液链球菌及其在治疗炎症性肠病药物中的应用
本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种唾液链球菌及其在治疗炎症性肠病药物中的应用。
技术介绍
炎症性肠病(InflammationBowelDisease，IBD)是一组特发性的肠道慢性疾病的统称，根据累及部位不同，分为溃疡性结肠炎(Ulcerativecolitis，UC)和克罗恩氏病(Crohn’sdisease，CD)。溃疡性结肠炎通常首发变现为累及直肠的粘膜层与粘膜下层连续性炎症，逐渐向全结肠蔓延，而克罗恩病常累及回盲部肠道的非连续性全层炎症。炎症性肠病的主要症状表现为腹痛，呕吐，里急后重，血便等腹部症状及贫血，发热，营养不良等全身症状，随病程迁延，患者的结直肠癌发病风险明显升高。目前炎症性肠病的病因与发病机制尚不明确，主要受到遗传，免疫与肠道菌群等因素影响。目前，我国炎症性肠病发病率呈逐年升高趋势，针对炎症性肠病的治疗新方法具有重要的临床意义[1]。目前，临床针对炎症性肠病主要以药物对症治疗为主，常用如柳氮磺胺吡啶，美沙拉嗪等氨基水杨酸类制剂，对于病情较重的患者，常使用糖皮质激素，如强的松等来缓解症状。这些传统药物治疗副作用大，近年来，临床开展应用生物制剂如类克等药物治疗炎症性肠病，取得一定效果，但是价格昂贵，且可发生严重不良事件。对于病情控制不力，发生中毒性巨结肠，肠穿孔等严重并发症的病人，通常需要紧急手术[2]。最近的研究发现，肠道菌群在炎症性肠病的发病过程中，发挥的至关重要的作用。炎症性肠病患者通常伴有严重的肠道菌群失调，通过给炎症性肠病患者纠正菌群失调后，患者可以维持较长时间的不发病状态。与传统方法相比，肠菌移植具有治愈率高，维持时间久，不良反应少，费用低等优点。但是目前肠菌移植存在着健康供体短缺等问题[3]。至今基础研究领域对于肠道菌群的机制研究尚不深入，对于在治疗过程中，能够具体发挥有益作用的菌株了解不多。若能分离到肠菌移植疗法中，针对炎症性肠病具有治疗作用的菌株，进行针对性移植，即可使肠菌移植更加高效，可靠而安全。参考文献：[1]王玉芳,etal.,炎症性肠病流行病学研究进展.胃肠病学,2013.18(01):48-51.[2]胡品津,etal.,我国炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(2012年·广州).内科理论与实践,2013.8(01):61-75.[3]郭悦承,etal.,粪菌移植治疗现状及其在炎症性肠病中的应用.国际消化病杂志,2018.38(05):294-296+305.
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种唾液链球菌(Streptococcussalivarius)1802。本专利技术的另一目的在于提供唾液链球菌(Streptococcussalivarius)1802的应用。所述唾液链球菌(Streptococcussalivarius)1802已于2019年04月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，邮编：430072，保藏中心保藏编号为CCTCCNO：M2019251。所述唾液链球菌的筛选方法如下：将健康人粪便，使用无菌水重悬后，稀释至10^6倍，用平板划线法在脑心浸出液培养基进行分离培养，获得所述唾液链球菌(Streptococcussalivarius)1802。所述唾液链球菌(Streptococcussalivarius)1802可在制备治疗炎症性肠病药物中的应用。所述唾液链球菌(Streptococcussalivarius)1802可在缓解炎症性肠病的炎症反应的药物中应用。所述唾液链球菌Streptococcussalivarius1802可在缓解炎症性肠病结肠黏膜损伤的药物中应用。本专利技术经过建立炎症性肠病的动物模型，综合分析在组织水平与分子水平等多项生理指标，实验证明，所述唾液链球菌菌株能够明显改善炎症性肠病模型小鼠的肠道炎症，减轻肠粘膜损伤。本专利技术所述唾液链球菌可在制备治疗炎症性肠病药物中应用，能为临床炎症性肠病患者提供新的方法。附图说明图1为唾液链球菌缓解DSS诱导的小鼠结肠炎症性挛缩结果统计图。图2为唾液链球菌减轻DSS诱导的小鼠结肠炎症的指标结果图。图3为唾液链球菌减轻DSS诱导的小鼠结肠损伤组织学评分结果图。具体实施方式以下实施例将结合附图对本专利技术的技术方案进行进一步阐述。但这些实施方式仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。实施例1：唾液链球菌的分离和鉴定取健康人粪便样本，用灭菌水做10^-1到10^-10的梯度稀释，用无菌玻璃棒在BHI固体培养基上涂板，37°培养2～3天。用无菌接种环，挑取单菌落，纯化传代3次后，挑取单菌落传进5mlBHI液体培养基，37°培养过夜取1mL菌液，12000g/min离心10min，弃上清后，使用全式金EasyPureGenomicDNAKit(EE101)提取细菌DNA。PCR扩增：扩增反应体系：扩增体系(50μL)：2×EasyTaqPCRSuperMix25μLDNA模板2μL前引物1μL后引物1μL超纯水21μL引物序列：前引物，27F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'后引物，1492R：5'-TACCTTGTTACGACTT-3'扩增条件：95°15min；(95°30S，60°60S，72°90S)X30循环；72°10min；4°保持；纯化PCR产物：用1.5％琼脂糖凝胶电泳(200V，20min)，凝胶成像切取1500bp位置的条带，使用全式金EasyPureQuickGelExtractionKit(EG101)提取纯化后的条带。对提取的PCR产物，进行测序并在NCBI进行比对。实施例2：动物模型的建立和分组按1︰10的接种量，将对数期生长的唾液链球菌接种于灭菌的BHI培养基，于37°培养过夜，后，3000G/min离心10min，弃上清后，用PBS重悬，调整至10^7CFU/mL。体重22～27g，8周龄，雄性C57/B6小鼠，随机分为Control组，S.S组，每组10只，饲养于某大学实验动物中心SPF环境中。动物适应一周后开始给药。两组均给与2.5％硫酸葡聚糖(mpbio，9011-18-1)自由饮水6天。Control组每天给与0.2mL/只，连续给药3天；S.S组给与PBS重悬的唾液链球菌0.2mL/只，连续给药3天。饥饿过夜后，颈椎脱臼处死小鼠，测量肠道长度，收集肠道组织，一部分4％多聚甲醛固定，用于石蜡切片，另一部分-80°保存，用于qPCR检测炎症因子表达。如图1所示，对照组小鼠结肠因炎症挛缩，长度明显缩短，经过唾液链球菌灌胃处理的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种唾液链球菌，所述唾液链球菌(Streptococcus salivarius)1802已于2019年04月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏中心保藏编号为CCTCC NO：M 2019251。/n
【技术特征摘要】
1.一种唾液链球菌，所述唾液链球菌(Streptococcussalivarius)1802已于2019年04月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏中心保藏编号为CCTCCNO：M2019251。
2.如权利要求1所述所述唾液链球菌(Streptococcussalivarius)1802的筛选方法，其特征在于具体方法如下：
将健康人粪便，使用无菌水重悬后，稀释至10^6倍，用平板划线法在脑心浸出液培养基进行分离培养，获得所述唾液链球菌(Streptococc...
【专利技术属性】
技术研发人员：任建林，吴景烔，张翔，陈章然，许鸿志，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建;35
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