丹参在预防或制备治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了丹参在医药技术领域的新用途，具体为丹参在预防或制备治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物中的应用。丹参提取物在无毒性的剂量范围内，能够有效地抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒对Marc‑145细胞的感染，即丹参提取物溶解于二甲基亚砜后的浓度在0.004‑0.032mg/mL时，对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制率达到90％以上，而在此浓度下，Marc‑145细胞的存活率为90％以上。因此，可进一步开发丹参为治疗和预防猪繁殖与呼吸综合征病毒的药物。

Application of Salvia miltiorrhiza in the prevention or preparation of drugs for the treatment of porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection

The invention provides a new use of Salvia miltiorrhiza in the technical field of medicine, in particular to the application of Salvia miltiorrhiza in the prevention or preparation of drugs for the treatment of porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection. Salvia miltiorrhiza extract can effectively inhibit the infection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus on MARC \u2011 145 cells in a non-toxic dose range, that is to say, when the concentration of Salvia miltiorrhiza extract dissolved in DMSO is 0.004 \u2011 0.032mg/ml, the inhibition rate of Salvia miltiorrhiza extract on porcine reproductive and respiratory syndrome virus is more than 90%, and under this concentration, the survival rate of Marc \u2011 145 cells is more than 90%. Therefore, Salvia miltiorrhiza can be further developed as a drug for the treatment and prevention of porcine reproductive and respiratory syndrome virus.

【技术实现步骤摘要】
丹参在预防或制备治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染药物中的应用
本专利技术涉及医药
，具体涉及丹参在制备治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物中的用途。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征，又称“猪蓝耳病”、“猪神秘病”，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcinereproductiverespiratorysyndromevirus，PRRSV)引起的一种猪的高度接触性传染病。自1990年被发现以来，该病迅速成为养猪产业最严重的病毒疾病之一，严重制约着对全球的养猪业的发展。在自然条件下，不同品种、不同年龄的猪均可感染PRRSV，但以妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感染，肥育猪感染后也会发病。40日龄以内的仔猪病死率高达100％，育肥猪病死率约为50％；在一些地区的猪场，发病率接近100％，病死率在30％～50％，甚至部分猪场的病死率可达80％以上。PRRSV主要经呼吸道或通过公猪的精液经生殖道在同猪群间进行水平传播，也可以通过母子进行垂直传播，或通过一些携带了病毒的鸟类进行传播。此外，该病毒也可以通过风媒进行传播，短期内便可波及全群或邻近群。猪群感染后，通常表现出体温显著升高，食欲降低，咳嗽气喘的症状，部分病情严重的猪会出现绝食现象，四肢无力，无法站立，其耳部会由于出血和淤血呈现紫红色，并伴随有眼结膜炎、眼睑水肿等。母猪感染后，其繁殖能力受到影响，表现为早产、流产、死胎或弱仔；公猪表现为精液品质下降，初生仔猪死亡率高，其他年龄猪呼吸系统疾病。到目前为止，对PRRSV的复制机制和致病机理还不甚了解。虽然市面上使用的灭活疫苗和减毒疫苗可以诱导宿主产生中和抗体，但是只能提供部分免疫保护，并不能完全的阻止宿主经呼吸道、胎盘感染病毒，也不能维持母猪的免疫保护。此外，当出现基因型不相关的PRRSV毒株时，这些疫苗就不能持续控制该病症。而且，当弱毒活疫苗在中国大量使用之后，有资料显示出现了弱毒活疫苗与本地毒株的重组的现象。这直接导致使用疫苗去控制PRRSV困难重重。由于病毒是严格的胞内寄生，依赖宿主细胞的许多功能而复制增殖，这使得合成药(西药)难以发挥作用。为了确保人类使用病毒灵(吗林胍)、利巴韦林、金刚烷胺、金刚乙胺等抗病毒药防制流感的有效性，美国FDA、中华人民共和国农业部等均已明令禁止此类抗病毒兽药的生产、经营和使用，故在临床上能够使用的抗病毒西药少且效果不佳。因此，研发一种能够有效治疗猪繁殖综合征的药物迫在眉睫。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供丹参在制备预防或治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染药物中的应用。针对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染治疗药物紧缺的现状，本专利技术的丹参能有效预防或治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染，为猪蓝耳病的感染提供了新的防控方法。为实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案为：丹参在制备预防或治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染药物中的应用。作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述药物为抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒对Marc-145细胞感染的药物。作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述丹参为丹参提取物。作为本专利技术所述应用的更优选实施方式，所述丹参提取物溶解于二甲基亚砜(DMSO)后的浓度为0.004-0.032mg/mL。作为本专利技术所述应用的优选实施方式，所述丹参提取物通过以下方法制备所得：1)称取丹参药材，将其粉碎成干粉；加入10倍体积的无水乙醇浸泡12h以上，然后将其加热回流2h，回收滤液；2)加入10倍体积的无水乙醇至丹参残渣中，进行二次加热回流，回收滤液；3)将两次加热回流后的滤液混合，进行旋转蒸发，直至得到粉末状的丹参提取物。本专利技术还提供了一种预防或治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物，所述药物含有丹参提取物。作为本专利技术所述药物的优选实施方式，所述药物还含有药学上可接受的载体。作为本专利技术所述药物的优选实施方式，所述药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、缓释制剂、控释制剂、纳米制剂或注射剂。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：丹参提取物在无毒性的剂量范围内，能够有效地抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒对Marc-145细胞的感染，即溶解于DMSO中的丹参提取物在0.004-0.032mg/mL时，对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制率达到90％以上，而在此浓度下，Marc-145细胞的存活率为90％以上。因此，可进一步开发丹参为治疗和预防猪繁殖与呼吸综合征病毒的药物。同时，本专利技术丹参提取物的制备方法科学合理、工艺简单、可操作性强。附图说明图1为不同浓度的丹参提取物对Marc-145细胞的毒性实验结果图；图2为不同浓度的利巴韦林对Marc-145细胞的毒性实验结果图；图3为不同浓度的丹参提取物对PRRSV的抑制作用实验结果图；图4为不同浓度的利巴韦林对PRRSV的抑制作用实验结果图。具体实施方式为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合附图和具体实施例对本专利技术进一步说明。本领域技术人员应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。为了更好地理解本专利技术，下面提供相关的解释和说明：实施例中，所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法，所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1丹参提取物的制备1、实验材料：无水乙醇，购自国药集团化学试剂有限公司；2、实验步骤：1)称取20g丹参药材，将其粉碎成干粉；加入10倍体积的无水乙醇浸泡12h；2)将总体积为200ml的丹参及浸泡液加热回流2h，回收滤液；3)加入200ml无水乙醇至丹参残渣中，进行二次加热回流，回收滤液；4)将两次加热回流后的滤液混合，进行旋转蒸发，直至得到丹参提取粉末。实施例2丹参提取物对Marc-145细胞的毒性实验1、实验材料：1)Marc-145细胞(猴胚胎肾上皮细胞)是PRRSV的易感细胞，因此，本次实验首先对丹参提取物在Marc-145细胞上的毒性进行了检测，将不同浓度的丹参提取物作用于Marc-145细胞，以确定在细胞存活率达90％以上的丹参提取物的最大浓度，为后续抑制实验提供参考数据。2)PRRSV毒株：CH-1a株；3)胎牛血清购自浙江天杭生物科技股份有限公司，DMEM购自Hyclone公司。4)广谱性抗病毒药物——利巴韦林购于selleck公司。2、实验步骤如下：1)接种Marc-145细胞：用含10％胎牛血清的DMEM培养基将细胞配置成细胞悬液，以每孔10000个细胞接种到96孔细胞培养板中，每孔接种体积100ul；2)Marc-145细胞的培养：将接种后的Marc-145细胞在37℃，5％CO2的培养箱中培养24h；3)加入丹参提取物：将丹参提取物溶解于DMSO中，并在含2％胎牛血清的DMEM培养基中进行梯度稀释，使其终浓度分别为1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.032、0.015、0.008、0.004mg/mL，将配置好的含丹参提取物的培养基加入到96孔细胞板中，同时以含2％胎牛血清的DMEM培养基作为对照组，以不含细胞和药物的细胞孔为空白组，每组重复3孔，于37℃，5％CO2的细胞培养箱中培养48h；4)加入广谱性抗病毒药物——利巴韦林。将利巴韦林溶解于DMSO中，并在含2％胎牛血清的DMEM培养基中进行梯度稀释，使其终浓度为100本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.丹参在制备预防或治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.丹参在制备预防或治疗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒对Marc-145细胞感染的药物。3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述丹参为丹参提取物。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述丹参提取物溶解于二甲基亚砜后的浓度为0.004-0.032mg/mL。5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述丹参提取物通过以下方法制备所得：1)称取丹参药材，将其粉碎成干粉；加入10倍体积的无水...

【专利技术属性】
技术研发人员：张红雨，吕博敏，张青叶，黄清，
申请(专利权)人：武汉百药联科科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42