用天然或半合成交联剂交联的透明质酸制造技术

本发明专利技术涉及用以下所有三种天然或半合成交联剂交联的透明质酸：琼脂糖、羟丙基甲基纤维素和泛醇，其作为药物或在美容医学中的用途，以及其制备方法。

Hyaluronic acid crosslinked with natural or semi synthetic reagents

The invention relates to hyaluronic acid crosslinked with all three natural or semi synthetic reagents: agarose, hydroxypropylmethylcellulose and panthenol, which are used as medicine or in cosmetic medicine, and the preparation method thereof.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用天然或半合成交联剂交联的透明质酸
以下专利技术涉及用天然和半合成交联剂交联的透明质酸、其制备方法、以及其作为药物和在美容医学中的用途。
技术介绍
透明质酸是由β-D-葡萄糖醛酸和β-D-N-乙酰氨基葡萄糖的交替重复单元组成的多糖型的线性聚合物，并且其是存在于许多动物组织中的组分。例如，其包含在哺乳动物的结缔组织、在湿疣、在链球菌属(Streptococcus)包膜中。透明质酸，作为动物组织的组分之一，因此是致敏作用小的、最安全、最无害的物质之一。目前有两种不同的工业制备透明质酸的途径，第一种本质上是从例如湿疣、牛眼球等动物组织中提取的方法，而第二种提供了细菌发酵方法。然而，用这些方法得到的透明质酸含有大量的杂质如蛋白质，特别是内毒素性质的那些。这样的问题例如在皮内填充物组合物即所谓的填充物的情况中极为重要，这是由于成品注射产品中细菌内毒素浓度越低，接受者皮肤组织中的刺激-免疫反应的发生风险越低。这类反应可引起相当严重的肉芽瘤型的炎症反应，以至于欧洲共同体必须在技术法规中对这类产品设定小于0.5EU/ml的内毒素阈值(指令2007/47/EC93/42和93/42/EEC医疗器械III级)本领域已知许多以减少蛋白质为主要目的的方法，然而其达到的纯度限度远低于上述欧洲标准。例如，在US3,396,081中，描述了一种用于从蛋白质、抗原和致热原中纯化透明质酸的方法，其包括从动物器官中获得含有透明质酸的粉末形式的原料，下一步提供了这类粉末在碱性水溶液中的悬浮液的形成并且涉及加热以获得蛋白质的变性。最终，通过蛋白水解酶将如此变性的蛋白质分解为相应的氨基酸，将其通过离子交换树脂除去。US4141973提供了用氯仿处理的透明质酸的脱蛋白步骤。通过该方法，得到了蛋白质残留量等于0.5％的透明质酸。在WO86/06728中，描述了一种用于透明质酸脱蛋白的方法，其包括从蛋白质水溶液中沉淀透明质酸和蛋白质，其后用醇变性，在溶剂中溶解透明质酸和蛋白质，其中透明质酸为可溶性的且蛋白质被消化。用该方法还得到具有0.5％蛋白质残留量的透明质酸。通过EP239995中所描述的方法得到从透明质酸中消除蛋白质的略微改进，其提供了以下步骤：通过沉淀法从原料中分离透明质酸，然后通过添加DNase和RNase来进行核苷酸的分解，保持培养直至完全消化核苷酸，然后用1％蛋白酶脱蛋白并且保持培养直至完全消化蛋白质。在进行核苷酸分解和脱蛋白后，然后通过相关复合物的形成用烷基或芳基型的季铵盐清洗透明质酸，通过添加过量的十二烷基硫酸钠来解络透明质酸并且使透明质酸沉淀。由此得到的透明质酸具有0.2-0.3％范围内的蛋白质残留量。基于透明质酸得到的可吸收移植体中的另一个普遍存在的问题是其吸水能力，其为尤其是在所谓填充物或可最小化皱纹的皮内制剂的领域中的一个非常重要的性质。实际上，吸水能力越大，其与体液接触时增加自身体积的能力越大，并且填充由皱纹或其他皮肤瑕疵导致的皮沟(skingroove)的能力越大。另一方面，公知可例如通过透明质酸的交联来化学转化透明质酸使得其更易吸水来增加吸水能力。该反应允许得到更具粘弹性并且不易被巨噬细胞攻击的交联的透明质酸。WO86/00079、US5,827937和WO02/06350描述了在40-50℃下在酸性和/或碱性溶液中用例如丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)等交联剂进行的透明质酸的交联方法，其后中和反应混合物。这些交联方法具有一些缺点，主要是由以下的事实引起的：相当高的交联温度可导致透明质酸的破坏和降解，从而损害终产物的性能。另外，现有技术的方法不可调节交联度，使得可得到具有相同工艺类型的低交联度或过高交联度的产物。在CN1259363中，描述了一种通过含有以下步骤的方法得到的具有350-650倍吸水能力的透明质酸：(1)用未指定的蛋白质化剂来进行脱蛋白处理，(2)在室温下用缩水甘油醚进行交联反应。关于步骤(1)，根据中国专利中包含的信息，无法理解到实际采用的脱蛋白剂是什么，另外，仍然关于步骤(1)，未提供关于进行了脱蛋白的产物的终纯度的其他数量数据。另外，最终交联产物的结果是被上述交联剂污染，而交联剂必然残留混入至终产物中并且难以去除。为了克服上述缺点，意大利专利申请MI2008A002015公开了一种用于得到用BDDE交联的透明质酸的方法，其由于对透明质酸进行两次脱蛋白作用而具有比现有技术的内毒素含量低得多的内毒素含量：第一脱蛋白作用包括用烷基卤处理透明质酸水溶液，和第二脱蛋白作用包括用生物学上可接受的二价金属硫酸盐处理来自第一脱蛋白作用的水溶液。虽然该方法相对于以前的方法有所改进，其需要用例如全合成的丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)等交联剂进行交联。这类试剂，正因为其为原始全合成的，从长远来看可导致副作用，特别是如果透明质酸在美容医学中非常频繁地用作填充物。因此，需要具有交联的透明质酸，其除了含有非常低浓度的内毒素外，是从天然或者至多半合成物质中得到的。
技术实现思路
本申请人现已发现通过使用泛醇作为交联剂交联的透明质酸、或其药学上可接受的盐。因此，本专利技术的一个目的是前述交联的酸及其作为药物或在美容医学中的用途。本专利技术的另一个目的为制备本专利技术的交联的透明质酸的方法，其包括用溶解在水醇溶液中的泛醇交联透明质酸的药学上可接受的盐的水性分散液。具体实施方式对于本专利技术的目的，“天然物质”是指天然存在的物质，其是从天然物质中提取的。对于本专利技术的目的，“半合成物质”是指天然物质或从天然存在的材料中提取的物质，其已经通过一种或多种有机反应转化为另一种物质。泛醇，特别是相应的光学活性形式D-泛醇，属于后一类。泛醇(panthenol)，同样称为pantothenol，其特征在于下式具有末端羟基的该化合物可与属于两种不同透明质酸分子的两个羧基反应来形成酯基，从而形成可以确保产物稳定性和正确渗透压的交联。优选地，将光学活性形式D-泛醇用作交联剂。泛醇是一种被称为前维生素B5的醇，其通过还原泛酸、也被称为维生素B5来得到，后者是作为在各种大分子特别是脂肪酸和类固醇激素的生物合成过程中转移酰基和乙酰基的关键分子的辅酶A的一个非常重要的组分。从皮肤病学的观点来看，该维生素已取得了作为润肤剂、保湿剂、抗炎剂、和作为皮肤成纤维细胞扩增诱导剂的特殊重要性。为此，其非常适用于中胚层疗法(或生物再生疗法(biorevitalization))–一种基于在指定区域中通过特定注射器(注射枪)皮下递送例如维生素、草药提取物、营养素、顺势疗法药物等特定产品的方法。从化学上来讲，泛醇，特别是光学活性形式D-泛醇，是泛酸(维生素B5)的还原醇形式，与后者相比，其更稳定并且通常用于化妆品领域。泛醇是水溶性的并且具有有利于其作为保湿剂和润肤剂(特别是如果与甘油相关)的活性的物理化学特性。此外，由于其增强皮肤屏障的能力，其增加了其自身的抗炎、抗瘙痒、和舒缓作用。在许多化妆品制品中添加其以达到减轻香料、防腐剂、表面活性剂的刺激性作用和减轻类维生素A疗法的副作用的目的。从生物化学的角度来讲，其促进了脂质合成、表皮细胞再生(伤口愈合)、和皮肤成纤维细胞扩增。其是一种在许多皮肤化妆品制品(例如用于干燥或受刺激的皮肤的那些)中用于治疗和保护皮肤和头发(例如，减轻由长期暴露于紫本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.交联的透明质酸、或其药学上可接受的盐、优选透明质酸钠盐，其中交联剂为泛醇、或其光学活性形式D‑泛醇。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.01.26 IT 1020170000086511.交联的透明质酸、或其药学上可接受的盐、优选透明质酸钠盐，其中交联剂为泛醇、或其光学活性形式D-泛醇。2.根据权利要求1所述的交联的透明质酸，其与琼脂糖和/或羟丙基甲基纤维素结合。3.根据权利要求1或2所述的交联的透明质酸，其具有低于0.05EU/ml、优选≤0.025EU/ml的内毒素含量。4.根据权利要求1-3任一项所述的交联的透明质酸，其用于作为药物的用途。5.根据权利要求4所述的交联的透明质酸，所述用途为关节疾病的治疗。6.根据权利要求4所述的交联的透明质酸，所述用途为皮肤伤口的愈合剂。7.根据权利要求4所述的交联的透明质酸，所述用途为眼用润滑剂。8.根据权利要求1-3任一项所述的交联的透明质酸在美容医学中的用途。9.根据权利要求8所述的用途，所述交联的透明质酸作为皱纹治疗的填充物。10.一种皮内可注射制剂，其含有与合适的赋形剂和/或稀释剂组合的根据权利要求1-3中任一项所述的交联的透明质酸。11.一种药物局部皮肤制剂，其含有与合适的赋形剂和/或稀释剂组合的根据权利要求1-3任一项所述的交联的透明质酸。12.一种药物局部眼部制剂，其含有与合适的赋形剂和/或稀释剂组合的根据权利要求1-3任一项所述的交联的透明质酸。13.一种药物局部关节内可注射制剂，其含有与合适的赋形剂和/...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·其门蒂，
申请(专利权)人：美容系统制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：意大利,IT