一种灵芝显微结构生物绘图的方法技术

本发明专利技术公开了一种简单实用的、精确性高的灵芝显微结构的生物绘图方法，以满足科学研究的需求。该方法绘图准确，简单易操作，无需辅助设备，成本低廉；本发明专利技术在显微镜观察时对灵芝的子实层的显微结构进行了测量，在显微镜下利用测量工具对灵芝显微结构进行测量并附加比例尺后拍照保存，保证了显微结构比例的准确性；本发明专利技术利用绘图仪将显微镜下观察到的灵芝显微结构按照原始形状和比例绘图，确保了其结构的准确性。

A Method of Biographical Mapping of Ganoderma Lucidum Microstructure

【技术实现步骤摘要】
一种灵芝显微结构生物绘图的方法
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种灵芝显微结构生物绘图的方法。
技术介绍
灵芝(学名：GanodermalingzhiShengH.Wu,Y.Cao&Y.C.Dai)：又称林中灵、琼珍，是真菌界担子菌门伞菌纲多孔菌目灵芝科灵芝属真菌子实体。具有补气安神、止咳平喘、延年益寿的功效。用于眩晕不眠、心悸气短、神经衰弱、虚劳咳喘。灵芝子实体一年生，具侧生或偏生柄，新鲜时软木栓质，干后木栓质。菌盖为16×12厘米,厚约2.6厘米，担子果浅黄色至黄褐色。孔口近圆形至多角形，每毫米5～6个。菌肉双层，上层颜色浅，下层颜色深，厚可达1厘米。菌管褐色，木栓质，颜色比菌肉深。担孢子椭圆形，顶端平截，浅褐色，双层壁，内壁具小刺，9～10.7×5.8～7微米，在棉蓝试剂中有反应(李玉等2015)。灵芝又称林中灵，以林中生长的为最佳，药效最高。目前也有人工大棚种植，主要生长在较湿润的地方。灵芝属高温性菌类，在15～35℃之间均能生长，适温为25～30℃。子实体在10～32℃的范围内均能生长，但原基分化和子实体发育的最适温度为25～28℃。低于25℃，子实体生长缓慢，皮壳色泽也差；高于35℃，子实体会死亡。灵芝生长需要较高的湿度。随着昼夜温差的增大，菌丝长满袋的时间延长。灵芝药用在中国已有2000多年的历史，被历代医药家视为滋补强壮、扶正固本的神奇珍品。经过大量临床研究，灵芝对神经衰弱、高脂血症、冠心病心绞痛、心律失常、克山病、高原不适症、肝炎、出血热、消化不良、气管炎等各有不同程度的疗效。需要注意的是，仅仅通过用灵芝食疗这种方法并不能起到明显的防治效果，建议可用决明子、黑乌龙等组方为决乌汤茶这种中医经典组方茶，对高血脂等症可以起到很好的防治效果。药理研究证明，灵芝有多方面的生物活性。灵芝显微结构生物绘图是通过显微镜观察灵芝微观结构，如担孢子、生殖菌丝、骨架菌丝、担子、囊状体等，达到将上述微观结构画到白纸上，进而帮助真菌学家或者灵芝爱好者可以直观的了解和学习灵芝微观结构特征。灵芝显微结构生物绘图对准确性要求极高，如果比例有差异，就会误导真菌学家和灵芝爱好者。这就要求我们了解灵芝子实体的特点，选择有代表性的部位进行切片观察和绘图，客观真实的反应灵芝在显微镜下的自然状态，才能为今后的研究提供可靠的数据，因此对灵芝显微结构生物绘图的方法进行研究具有极其重要的意义。然而此前对灵芝切片显微结构绘图主要采用两种方法：1)观察显微镜内灵芝显微结构特征，后凭借短暂的记忆在白纸上绘图；该方法缺点为：准确度很低，误差太大；2)一边通过显微镜观察灵芝显微结构特征，一边通过显微镜自身携带的绘图筒在白纸是上绘图，该方法缺点为：绘图筒清晰度很差，如果灵芝显微结构有重叠或者立体感很强，绘图筒无法显示其结构特征，同时绘图筒为显微镜另外配置的附带工具，价格昂贵；如果室内光线很差，几乎无法通过绘图筒看清灵芝显微结构特征。
技术实现思路
本专利技术为了解决上述问题，公开了一种简单实用的、精确性高的灵芝显微结构的生物绘图方法，以满足科学研究的需求。该方法绘图准确，简单易操作，无需辅助设备，成本低廉。本专利技术提供了一种灵芝显微结构生物绘图的方法，具体包括以下步骤：(1)准备灵芝的切片标本；(2)显微镜观察、测量及拍照：将玻片置于显微镜下依次用5倍镜、10倍镜、40倍镜以及油镜(100倍镜)对灵芝的担孢子、担子、拟担子、囊状体及生殖菌丝的微观结构特征进行显微镜观察，对观察到的结构进行测量和标记相应放大倍数下的第一比例尺，并拍照保存为JPEG格式；(3)从获得的照片中选取灵芝的子实层的同一放大倍数下的各个部位的清晰照片，按照图片原始比例打印成第一灵芝显微结构图：将灵芝显微结构照片用A4纸黑白打印，打印前可适当调节图片的亮度、对比度等以提高打印效果，打印时取消适应边框打印，按照图片原始比例打印；(4)生物绘图：a.子实层结构绘制：按照第一灵芝显微结构图的结构轮廓准确绘出灵芝子实层结构(子实层包括担孢子、担子、拟担子、菌肉和菌管菌丝)，标记第二比例尺，所述第二比例尺与第一比例尺相同；b.担孢子结构绘制：选取包括9个灵芝担孢子的显微结构图，用扫描仪将担孢子放大成原来的两倍，标记第三比例尺，所述第三比例尺为相对应的第一比例尺的1/2，并将放大后的担孢子用A4纸进行绘图；a、b绘图后得到第二灵芝显微结构图。(5)修整图片并保存。优选地，所述步骤(1)中标本切片的方法为：左手的拇指与食指、中指夹住灵芝子实体，选取灵芝子实体的一个断面，右手平稳地拿住刀片并与断面保持平行，用刀片轻轻将断面表面切平整，随后连续切下数片，选取平整且薄的材料放置于载玻片中央，滴上适量浮载剂，并盖上盖玻片，轻压盖玻片挤出气泡，使盖玻片与载玻片贴合紧密。优选地，所述浮载剂为棉蓝试剂或碘化钾试剂。优选地，所述步骤(2)中对灵芝的显微镜结构进行测量的标尺为：目镜测微尺。优选地，所述步骤(2)中显微镜进行定标的方法为：在5倍镜下拍摄一个标尺的图片，然后在拍照软件中沿着标尺画一条线，再输入这条线的长度(从图中的标尺上可以读出)，对这个倍率的定标就完成了，再进行下一个放大倍率的定标。优选地，所述步骤(5)的具体步骤为：将步骤(4)绘出的第二灵芝显微结构图用扫描仪扫描为黑白JPEG图片格式并保存得到第三灵芝显微结构图；将第三灵芝显微结构图用修图软件修整：调整图片的亮度、对比度等到适当程度，擦除多余线条，将部分担孢子、担子等结构绘图时较突兀的部位适当修整圆滑，但不能改变其形状和大小，将边缘部位剪切齐整；在第三灵芝显微结构图正中下方的位置用矩形选框工具填充一个与第三灵芝显微结构图比例尺相同的比例尺，删除原来的比例尺。重复该步骤直至修整完全，把灵芝子实层图和扩大为原来两倍的担孢子图合并为一张图片，并将担孢子图片置于子实层图的正上方，裁剪并调整图片大小，将修整完成的灵芝显微结构以JPEG格式保存得到灵芝显微结构成图。本专利技术在显微镜观察时对灵芝的子实层的显微结构进行了测量，在显微镜下利用测量工具对灵芝显微结构进行测量并附加比例尺后拍照保存，保证了显微结构比例的准确性。本专利技术利用绘图仪将显微镜下观察到的灵芝显微结构按照原始形状和比例绘图，确保了其结构的准确性。在显微镜对灵芝的子实层进行观察，根据测微尺标记了第一比例尺，显微镜下观察到的灵芝结构的真实尺寸＝测量的尺寸*第一比例尺。第一灵芝显微结构图是将从显微镜目镜下拍摄下来的照片按照图片原始比例打印而成，即第一灵芝显微结构图的比例尺为第一比例尺。第二灵芝显微结构图的子实层图是根据第一灵芝显微结构图的轮廓进行绘制的，第二比例尺等于第一比例尺，第二灵芝显微结构图的担孢子图是选取9个灵芝担孢子的显微结构图，用扫描仪将担孢子放大成原来的两倍，标记第三比例尺，第三比例尺为第一比例尺的1/2。第二灵芝显微结构图用扫描仪扫描为黑白JPEG图片格式并保存得到第三灵芝显微结构图，因此第三灵芝显微结构图的子实层和担孢子的比例尺分别等于第二灵芝显微结构图的第二比例尺和第三比例尺。灵芝显微结构成图的子实层和担孢子的比例尺分别等于第二灵芝显微结构图的第二比例尺和第三比例尺。子实层的真实大小＝灵芝显微结构成图的子实层大小/第二比例尺＝灵芝显微结构成图的子实层大小/第一比例尺本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种灵芝显微结构生物绘图的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)准备灵芝的切片标本；(2)显微镜观察、测量及拍照：将玻片置于显微镜下依次用5倍镜、10倍镜、40倍镜以及100倍油镜对灵芝的担孢子、担子、拟担子、囊状体及生殖菌丝的微观结构特征进行显微镜观察，对观察到的结构进行测量和数据记录、标记第一比例尺，并拍照保存为JPEG格式；(3)将获得的照片按照图片原始比例打印成第一灵芝显微结构图；(4)生物绘图：a.子实层结构绘制：按照第一灵芝显微结构图的结构轮廓准确绘出灵芝的包括担孢子、担子、拟担子、菌肉和菌管菌丝的子实层结构，标记第二比例尺，所述第二比例尺与第一比例尺相同；b.担孢子结构绘制：选取9个灵芝担孢子的显微结构图，用扫描仪将担孢子放大成原来的两倍，标记第三比例尺，所述第三比例尺为第一比例尺的1/2，并将放大后的担孢子用A4纸进行绘图；a、b绘图后得到第二灵芝显微结构图；(5)修整图片并保存。

【技术特征摘要】
1.一种灵芝显微结构生物绘图的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)准备灵芝的切片标本；(2)显微镜观察、测量及拍照：将玻片置于显微镜下依次用5倍镜、10倍镜、40倍镜以及100倍油镜对灵芝的担孢子、担子、拟担子、囊状体及生殖菌丝的微观结构特征进行显微镜观察，对观察到的结构进行测量和数据记录、标记第一比例尺，并拍照保存为JPEG格式；(3)将获得的照片按照图片原始比例打印成第一灵芝显微结构图；(4)生物绘图：a.子实层结构绘制：按照第一灵芝显微结构图的结构轮廓准确绘出灵芝的包括担孢子、担子、拟担子、菌肉和菌管菌丝的子实层结构，标记第二比例尺，所述第二比例尺与第一比例尺相同；b.担孢子结构绘制：选取9个灵芝担孢子的显微结构图，用扫描仪将担孢子放大成原来的两倍，标记第三比例尺，所述第三比例尺为第一比例尺的1/2，并将放大后的担孢子用A4纸进行绘图；a、b绘图后得到第二灵芝显微结构图；(5)修整图片并保存。2.根据权利要求1所述的一种灵芝显微结构生物绘图的方法，其特征在于，所述步骤(1)中标本切片的方法为：左手的拇指与食指、中指夹住灵芝子实体，选取灵芝子实体的一个断面，右手平稳地拿住刀片并与断面保持平行，用刀片轻轻将断面表面切平整，随后连续切下数片，选取平整且薄的材料放置于载玻片中央，滴上适量浮载剂，并盖上盖玻片，轻压盖玻片挤出气泡，使盖玻片与载玻片贴...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵长林，吴亚星，杨占恩，
申请(专利权)人：西南林业大学，
类型：发明
国别省市：云南,53