本发明专利技术的基于过氧化氢响应的多功能脂质体及其制备方法与应用属于纳米材料技术领域，所述的基于过氧化氢响应的多功能脂质体，由磷脂酰丝氨酸和双嵌段聚合物聚乙二醇‑聚硫化丙烯共同构成；其制备方法包括PEG‑PPS的制备和过氧化氢响应的多功能脂质体的制备的步骤。用所述的基于过氧化氢响应的多功能脂质体包覆双模态探针FITC‑SiO2@Fe3O4可应用于体内成像上；用基于过氧化氢响应的多功能脂质体包覆抗动脉粥样硬化药物可用于体内药物释放。本发明专利技术将可生物降解的聚乙二醇缀合到脂质体的外表面以产生隐形载体，防止被免疫清除；同时对传统的聚乙二醇进行特殊修饰，保留了生物相容性的同时能够响应过氧化氢以释放成像剂或者药物。
Multifunctional Liposomes Based on Hydrogen Peroxide Response and Their Preparation and Application
【技术实现步骤摘要】
基于过氧化氢响应的多功能脂质体及其制备方法与应用
本专利技术属于纳米材料
，具体涉及一种具有过氧化氢响应、靶向核磁荧光成像及释药能力的多功能脂质体的制备与应用。
技术介绍
动脉粥样硬化是一种常见的心脑血管疾病，作为一种慢性炎症疾病，动脉粥样硬化在初期潜伏隐蔽，症状不明显，而最终却能引发如心梗，中风的高危疾病。在治疗方面，动脉粥样硬化疾病在后期目前只能通过支架，手术等手段治愈。而早期则以口服药物治疗较为常见，但这种治疗方式却存在着药物利用率低，见效慢，副作用严重等问题。此外，动脉粥样硬化缺乏传统疾病的pH敏感能力，在纳米医疗上必须寻找更具特异性的释药控制开关。其中，过氧化氢等活性氧簇在动脉粥样硬化早期较为活跃，可以作为特异性开关。纳米粒子广泛开发应用于治疗各种疾病。然而，临床应用并不总是使患者的生存率提高，部分原因是由于纳米粒子的缺陷所致。例如在制备、储存或血液循环期间过早的药物渗漏、缺乏主动靶向组织和细胞，以及组织渗透性差等原因。以有针对性的方式进行递送是非常有吸引力的方法，可以在具有更好的治疗效果的同时具有最小的不良作用。脂质体是脂基纳米粒子中研究最多的一种，是使用一种或多种磷脂制造的球形囊泡。各种合成或天然脂质基质递送系统，例如纳米结构脂质载体、纳米脂质体等在作为纳米级药物递送系统方面受到了极大的关注。脂质体的天然组成赋予它们一些例如高生物相容性，低免疫原性和有效的药物保护免受酶促降解等有利的特性。磷脂酰丝氨酸是细胞膜的一个组成部分，但它在细胞凋亡时会暴露，它会成为巨噬细胞吞噬它的“吃我”信号。它们最主要的缺点是由于巨噬细胞的吞噬作用而导致的低生物、物理半衰期。传统单一的功能型药物体系已经无法满足现阶段动脉粥样分子治疗的要求。只有将靶向定位，成像检测，控制释药等综合多种功能综合应用才能发挥更好的诊疗作用。而在动脉粥样硬化疾病领域，诊疗一体的纳米载药体系的应用相对缺乏，亟待补充与完善。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，克服
技术介绍
存在的缺点，提供一种基于过氧化氢响应的多功能脂质体和这种多功能脂质体的制备方法，以及它在靶向核磁荧光成像和体内药物释放上的应用。本专利技术的技术方案如下：一种基于过氧化氢响应的多功能脂质体，由磷脂酰丝氨酸PtdSer和双嵌段聚合物聚乙二醇-聚硫化丙烯PEG-PPS共同构成；所述的磷脂酰丝氨酸的结构式为：所述的聚乙二醇-聚硫化丙烯的结构式为：一种基于过氧化氢响应的多功能脂质体的制备方法，具有以下步骤：1)过氧化氢响应型双嵌段聚合物PEG-PPS的制备取聚乙二醇单甲醚2000，三乙胺，4-二甲氨基吡啶按摩尔比1:1.2～1.6:0.08～0.12)溶于无水氯仿中，并置于冰盐浴中反应，加入对甲苯磺酰氯搅拌5～10min，按摩尔计，聚乙二醇单甲醚2000:对甲苯磺酰氯＝1:1.2～1.6；随后将反应装置置于室温下反应16～24h，反应结束后，蒸发浓缩产物，在乙醚沉淀析出产物，过滤后经真空烘箱烘干48～72h后，得到白色粉状产物，记为第一中间体；按摩尔比为8～12:30～50:1将硫代乙酸钾和三乙胺加入第一中间体的甲醇溶液中，反应30～40h，反应结束后，旋蒸除去溶剂，将剩余物重溶于氯仿中，用饱和碳酸氢钠、氯化钠溶液进行萃取，最后，用无水硫酸镁干燥处理20～30h，过滤，旋蒸浓缩液体并沉淀到乙醚中，再过滤后置于真空烘箱干燥40～50h，得到淡黄色粉状产物，记为第二中间体；按摩尔比10～20:1，将溶于甲醇的甲醇钠加入第二中间体的四氢呋喃溶液中，室温下搅拌1～3h后，于冰盐浴冷却至0℃，逐滴加入硫化丙烯，按摩尔比第二中间体:硫化丙烯为1:40～50，反应1～2h，除去冰盐浴装置，将溶液在室温下继续搅拌10～15h，反应结束后，旋蒸除去溶剂，置于真空烘箱内烘干24～36h，得到黄色固体产物PEG-PPS；2)过氧化氢响应的多功能脂质体的制备将磷脂酰丝氨酸PtdSer和步骤1)制备的双嵌段聚合物PEG-PPS按摩尔比1:0.03～0.05溶于氯仿中，旋转蒸发除去有机溶剂，在瓶底形成薄膜，真空烘箱烘干后，加入pH＝7.4的PBS缓冲溶液，按摩尔比PtdSer:PBS＝1:30～50，进行震荡水化，后经微孔滤膜过滤后得到过氧化氢响应多功能脂质体PtdSer@PEG-PPS。一种基于过氧化氢响应的多功能脂质体在体内成像上的应用，其特征在于，用所述的基于过氧化氢响应的多功能脂质体PtdSer@PEG-PPS包覆双模态探针FITC-SiO2@Fe3O4；具体步骤如下：1)双模态探针FITC-SiO2@Fe3O4的合成超声条件下将SiO2@Fe3O4纳米粒子加入到摩尔比为1:100～130:180～220:2～2.2的去离子水、无水乙醇、氨水的混合溶液中，待分散均匀后在黑暗处进行机械搅拌，并向其中加入正硅酸乙酯，按摩尔计SiO2@Fe3O4:正硅酸乙酯为1:6～7，随后逐滴加入异硫氰酸荧光素FITC和3-氨基丙基三乙基硅烷APTES的无水乙醇溶液，按摩尔计，SiO2@Fe3O4:FITC:APTES:无水乙醇为1:0.3～0.5:3～5:30～40，滴加完成后反应10～12h，反应结束后，用磁铁分离，用蒸馏水和无水乙醇分别洗涤3～5次后置于真空烘箱烘干,得到双模态探针FITC-SiO2@Fe3O4(FSF)；2)过氧化氢响应的双模态探针脂质体的合成取步骤1)中制备的FITC-SiO2@Fe3O4溶于水，取PEG-PPS溶于四氢呋喃，按摩尔计，FITC-SiO2@Fe3O4:水:PEG-PPS:四氢呋喃＝1:30～50:3～5:3～4，将得到的四氢呋喃溶液在超声下逐滴加入得到的水溶液中，滴加完成后继续超声，随后将溶液置于Da＝5000的透析袋中透析除去四氢呋喃，透析完成后，得到包覆FITC-SiO2@Fe3O4的双模态探针纳米胶束PEG-PPS@FSF；取磷脂酰丝氨酸PtdSer和PEG-PPS@FSF溶于氯仿中，按摩尔计，PtdSer:PEG-PPS@FSF:氯仿＝1:0.03～0.05:30～50，旋转蒸发除去有机溶剂，在瓶底形成薄膜，真空烘箱烘干后，加入pH＝7.4的PBS缓冲溶液，PtdSer与PBS的摩尔比为1:30～50，进行震荡水化，后经微孔滤膜过滤后得到基于过氧化氢响应的双模态探针脂质体PtdSer@(PEG-PPS@FSF)。一种基于过氧化氢响应的多功能脂质体在体内药物释放上的应用，其特征在于，以基于过氧化氢响应的多功能脂质体PtdSer@PEG-PPS包覆抗动脉粥样硬化药物，具体步骤如下：1)取PEG-PPS和抗动脉粥样硬化药物溶于四氢呋喃，形成均一溶液，超声下将四氢呋喃溶液逐滴加入去离子水中，按摩尔计，PEG-PPS:抗动脉粥样硬化药物:四氢呋喃:水＝1:5～10:3～5:30～40，滴加完成后继续超声，随后将溶液置于Da＝3500的透析袋中透析除去四氢呋喃，透析完成后，得到载药胶束PEG-PPS@Drug；2)称取磷脂酰丝氨酸PtdSer和载药胶束PEG-PPS@Drug溶于氯仿中，按摩尔比，PtdSer:PEG-PPS@Drug:氯仿＝1:0.03～0.05:30～50，旋转蒸发直至瓶底出现透明薄膜，真空烘箱烘干后取出，加入pH＝7.4的PBS缓冲溶液，PtdSer与P本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于过氧化氢响应的多功能脂质体，由磷脂酰丝氨酸PtdSer和双嵌段聚合物聚乙二醇‑聚硫化丙烯PEG‑PPS共同构成；所述的磷脂酰丝氨酸的结构式为：
【技术特征摘要】
1.一种基于过氧化氢响应的多功能脂质体，由磷脂酰丝氨酸PtdSer和双嵌段聚合物聚乙二醇-聚硫化丙烯PEG-PPS共同构成；所述的磷脂酰丝氨酸的结构式为：所述的聚乙二醇-聚硫化丙烯的结构式为：2.一种如权利要求1所述的基于过氧化氢响应的多功能脂质体的制备方法，具有以下步骤：1)过氧化氢响应型双嵌段聚合物PEG-PPS的制备取聚乙二醇单甲醚2000，三乙胺，4-二甲氨基吡啶按摩尔比1:1.2～1.6:0.08～0.12)溶于无水氯仿中，并置于冰盐浴中反应，加入对甲苯磺酰氯搅拌5～10min，按摩尔计，聚乙二醇单甲醚2000:对甲苯磺酰氯＝1:1.2～1.6；随后将反应装置置于室温下反应16～24h，反应结束后，蒸发浓缩产物，在乙醚沉淀析出产物，过滤后经真空烘箱烘干48～72h后，得到白色粉状产物，记为第一中间体；按摩尔比为8～12:30～50:1将硫代乙酸钾和三乙胺加入第一中间体的甲醇溶液中，反应30～40h，反应结束后，旋蒸除去溶剂，将剩余物重溶于氯仿中，用饱和碳酸氢钠、氯化钠溶液进行萃取，最后，用无水硫酸镁干燥处理20～30h，过滤，旋蒸浓缩液体并沉淀到乙醚中，再过滤后置于真空烘箱干燥40～50h，得到淡黄色粉状产物，记为第二中间体；按摩尔比10～20:1，将溶于甲醇的甲醇钠加入第二中间体的四氢呋喃溶液中，室温下搅拌1～3h后，于冰盐浴冷却至0℃，逐滴加入硫化丙烯，按摩尔比第二中间体:硫化丙烯为1:40～50，反应1～2h，除去冰盐浴装置，将溶液在室温下继续搅拌10～15h，反应结束后，旋蒸除去溶剂，置于真空烘箱内烘干24～36h，得到黄色固体产物PEG-PPS；2)过氧化氢响应的多功能脂质体的制备将磷脂酰丝氨酸PtdSer和步骤1)制备的双嵌段聚合物PEG-PPS按摩尔比1:0.03～0.05溶于氯仿中，旋转蒸发除去有机溶剂，在瓶底形成薄膜，真空烘箱烘干后，加入pH＝7.4的PBS缓冲溶液，按摩尔比PtdSer:PBS＝1:30～50，进行震荡水化，后经微孔滤膜过滤后得到过氧化氢响应多功能脂质体PtdSer@PEG-PPS。3.一种权利要求1所述的基于过氧化氢响应的多功能脂质体在体外成像上的应用，其特征在于，用所述的基于过氧化氢响应的多功能脂质体PtdSer@PEG-PPS包覆双模态探针FITC-SiO2@Fe3O4；具体步骤如下：1)双模态探针FITC-SiO2@Fe3O4的合成超声条件下将SiO2@Fe3O4纳米粒子加入到摩尔比为1:100～130:180～220:2～2.2的去离子水、无水乙醇、氨水的混合溶液中，待分散均匀后在黑暗处进行机械搅拌，并...
【专利技术属性】
技术研发人员：李亚鹏，李少静，于艳辉，朱焓毓，姚顺雨，沈美丽，武小东，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22
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