一种谷胱甘肽的合成方法技术

本发明专利技术涉及一种谷胱甘肽的合成方法，将活化后的重组菌按照0.5~1.5%的体积比接种至培养基中，并加入谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸至添加终浓度为3~5 mM，IPTG浓度为0.1~1 mM，调节pH为3~7，在16~25℃下反应6~18h，反应结束后，经萃取分离得到所述的谷胱甘肽；其中，所述的重组菌包括重组质粒，所述的重组质粒包括GshF片段和载体片段；所述的载体片段为pET‑22b。本发明专利技术既能够高效表达谷胱甘肽，又能够减少谷胱甘肽的降解，从而使得合成谷胱甘肽的效率提高，生产成本和能耗降低。

A Synthesis Method of Glutathione

【技术实现步骤摘要】
一种谷胱甘肽的合成方法
本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种谷胱甘肽的合成方法。
技术介绍
谷胱甘肽(γ-L-glutamyl-cysteinyl-glycine，GSH)是细胞内的一类非蛋白类巯基化合物，由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸三种氨基酸缩合而成的具有生物活性的三肽，谷胱甘肽具有游离的巯基和氧化还原能力，其是胞内最丰富的抗氧化剂，能够保护DNA、蛋白质免受ROS的伤害，此外谷胱甘肽还参与细胞信号的转导，是维持细胞正常生理活动必不可少的物质；同时，谷胱甘肽还能增强机体免疫力，发挥抗病毒作用。在食品行业，含有或添加谷胱甘肽的奶制品、肉类能够提高奶制品和肉类的保鲜能力，防止褐变，保持色泽和营养。谷胱甘肽还被用于化妆品行业，其能够改善皮肤光泽、缓解皮肤皱纹增多现象，因此国内外医药市场、食品，化妆品领域对于谷胱甘肽的需求正在稳步提升。近年来，随着谷胱甘肽需求量的增多，市场迫切需要更多的谷胱甘肽，目前谷胱甘肽的生产方法主要有微生物发酵法、化学合成法、溶剂萃取法和酶催化合成法，其中属化学合成法生产的谷胱甘肽纯度最高，但由于化学合成的操作步骤复杂，成本高，对环境破坏严重，不利于可本文档来自技高网...

【技术保护点】
1. 一种谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：将活化后的重组菌按照0.5~1.5%的体积比接种至培养基中，并加入谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸至添加终浓度为3~5 mM，IPTG浓度为0.1~1 mM，调节pH为3~7，在16~25℃下反应6~18 h，反应结束后，经萃取分离得到所述的谷胱甘肽；其中，所述的重组菌包括重组质粒，所述的重组质粒包括GshF片段和载体片段；所述的载体片段为pET‑22b。

【技术特征摘要】
1.一种谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：将活化后的重组菌按照0.5~1.5%的体积比接种至培养基中，并加入谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸至添加终浓度为3~5mM，IPTG浓度为0.1~1mM，调节pH为3~7，在16~25℃下反应6~18h，反应结束后，经萃取分离得到所述的谷胱甘肽；其中，所述的重组菌包括重组质粒，所述的重组质粒包括GshF片段和载体片段；所述的载体片段为pET-22b。2.根据权利要求1所述的谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的GshF片段位于所述的载体片段的T7启动子之下。3.根据权利要求1所述的谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的GshF片段的DNA序列与SEQIDNO.1所示序列至少具有80%的同源性。4.根据权利要求3所述的谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的GshF片段的DNA序列与SEQIDNO.1所示序列至少具有85%的同源性。5.根据权利要求4所述的谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的GshF片段的DNA序列与SEQIDNO.1所示序列至少具有90%的同源性。...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐继嗣，许激扬，
申请(专利权)人：张家港市华天药业有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32