【技术实现步骤摘要】
甲型流感通用型病毒样颗粒及其制备方法和应用
本专利技术属于生物制药
，特别是涉及一种甲型流感通用型病毒样颗粒及其制备方法和应用。
技术介绍
季节性流感在温带地区最冷的季节流行，在热带和亚热带地区全年流行，全球每年约有十亿人感染流感病毒，其中3-5百万人出现严重并发症，30-50万人死亡，同时流感病毒不断变异，当一种新型流感病毒出现时，大多数人没有免疫力，尤其是幼儿、老人、孕妇和免疫系统低下的易感群体，新型流感病毒避开机体免疫系统，很容易使人感染并在人与人之间传播形成大流行性疾病，历史上曾经出现多次世界范围内的流感大流行；1918年西班牙H1N1流感大流行曾导致4000万人受影响，1933年首次鉴定出人流感的病原，1957年H2N2亚洲流感，1968年H3N2香港流感，2009年H1N1都曾导致流感病毒大流行，2017-18年美国国立疾病预防控制中心报道了美国达3万人次流感发病，171人因流感死亡，与2003-2004年度相比，2017-2018年度每个年龄段的病人都出现受感程度加重，流感病毒的发病率和死亡率大幅上升。因此不断改进当前的流感疫苗，提高疫苗的保护...
【技术保护点】
1.甲型流感通用型病毒样颗粒，其特征在于，病毒样颗粒是将3种融合蛋白分别嵌合展示在流感病毒M1蛋白表面制成的，分别记作sHA‑VLPs、mHA‑VLPs、cHA‑VLPs；3种融合蛋白分别是sHA蛋白、mHA蛋白和cHA蛋白；所述sHA蛋白基因序列如SEQ ID NO.1所示，sHA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述mHA蛋白的基因序列如SEQ ID NO.2所示，mHA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；所述cHA的基因序列如SEQ ID NO.3所示，cHA的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。
【技术特征摘要】
1.甲型流感通用型病毒样颗粒，其特征在于，病毒样颗粒是将3种融合蛋白分别嵌合展示在流感病毒M1蛋白表面制成的，分别记作sHA-VLPs、mHA-VLPs、cHA-VLPs；3种融合蛋白分别是sHA蛋白、mHA蛋白和cHA蛋白；所述sHA蛋白基因序列如SEQIDNO.1所示，sHA蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示；所述mHA蛋白的基因序列如SEQIDNO.2所示，mHA蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示；所述cHA的基因序列如SEQIDNO.3所示，cHA的氨基酸序列如SEQIDNO.8所示。2.如权利要求1所述的甲型流感通用型病毒样颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，通过PCR法获得流感病毒M1的编码基因，对M1蛋白的编码基因与pFastBacdual的基因进行多克隆位点分析，选择pFastBacdual上提供而目的片段上没有的两个限制性内切酶，设计目的片段的引物，经过目的片段扩增、双酶切后回收目的片段，将目的片段插入昆虫细胞表达载体p10启动子后的多克隆位点中，转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，得到pFastBacdual-M1质粒；步骤2，通过基因合成技术获得sHA蛋白、mHA蛋白和cHA蛋白的编码基因，将sHA蛋白、mHA蛋白和cHA蛋白的编码基因与pFastBacdual-M1质粒的基因进行多克隆位点分析，选择pFastBacdual-M1质粒上提供而目的片段上没有的两个限制性内切酶，双酶切后回收融合蛋白的目的片段，将目的片段插入pFastBacdual-M1质粒PH启动子后的多克隆位点，然后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，得到pFastBacdual-M1-融合蛋白穿梭质粒；步骤3，将pFastBacdual-M1-融合蛋白穿梭质粒转化大肠杆菌DH10Bac感受态细胞，得到重组杆状病毒质粒Bacmid，使用重组杆状病毒质粒Bacmid转染Sf9昆虫细胞，拯救获得重组杆状病毒，转...
【专利技术属性】
技术研发人员：高玉伟，任志广，夏咸柱，张亚敏，赵永坤，王铁成，李元果，王化磊，冯娜，孙伟洋，杨松涛，陈明涛，
申请(专利权)人：军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所，
类型：发明
国别省市：吉林,22
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