禽流感病毒血凝素抗原及其制备方法、应用和禽流感疫苗技术

本发明专利技术提供了一种禽流感病毒血凝素抗原及其制备方法、应用和禽流感疫苗，涉及生物技术领域。该禽流感病毒血凝素抗原为具有如SEQ ID NO.1所示序列表达的血凝素蛋白，同时为哺乳动物表达系统表达的蛋白，兼具广谱性和良好的免疫原性，免疫禽类后可产生较高滴度的抗体并且预防多种亚型的禽流感。该禽流感病毒血凝素抗原的制备方法可以获得具有广谱性和抗原免疫原性好的血凝素蛋白，并且该方法操作简单，适合规模化生产。包含该禽流感病毒血凝素抗原的疫苗生产成本低，免疫效力高，免疫3‑4周龄SPF鸡后，14日即可检测到H5亚型抗原测定HI抗体几何平均滴度(GMT)均不低于1:64，优于常规疫苗。

Hemagglutinin Antigen of Avian Influenza Virus and Its Preparation, Application and Avian Influenza Vaccine

The present invention provides an avian influenza virus hemagglutinin antigen and its preparation method, application and avian influenza vaccine, and relates to the field of biotechnology. The haemagglutinin antigen of avian influenza virus is a haemagglutinin protein expressed in SEQ ID NO.1 sequence and mammalian expression system. It has broad spectrum and good immunogenicity. It can produce high titers of antibodies and prevent various subtypes of avian influenza after immunization. The preparation method of hemagglutinin antigen of avian influenza virus can obtain hemagglutinin protein with broad spectrum and good antigenicity. The method is simple and suitable for large-scale production. The vaccine containing haemagglutinin antigen of avian influenza virus has low production cost and high immune efficacy. After immunizing SPF chickens aged 3 to 4 weeks, H5 subtype antigen can be detected on 14 days. The geometric mean titer (GMT) of HI antibody determined by H5 subtype antigen is not less than 1:64, which is superior to conventional vaccine.

【技术实现步骤摘要】
禽流感病毒血凝素抗原及其制备方法、应用和禽流感疫苗
本专利技术涉及生物术领域，尤其是涉及一种禽流感病毒血凝素抗原及其制备方法、应用和禽流感疫苗。
技术介绍
禽流感病毒(AIV)为单股负链病毒，呈球形或丝状，球形直径80-120nm。基因组分为8个节段，共编码10种蛋白，其中HA、NA和M位于病毒的囊膜表面，是AIV的主要保护性抗原。位于病毒双层脂包膜下是基质蛋白M，它是病毒颗粒中含量最多的蛋白，其构成了病毒包膜的框架。在脂质双层膜上则镶嵌了两种由病毒基因编码的糖蛋白刺突，即血凝素(Hemagglutinnin，HA)与神经氨酸酶(Neuraminidase，NA)，两者是划分流感病毒亚型的依据，且其抗原性极易变异，一旦形成新的亚型，极易导致禽流感的爆发。HA是构成病毒囊膜纤突的主要成分，属于Ⅰ型糖蛋白。HA以三聚体的形式存在。HA在病毒吸附、穿模以及决定病毒与细胞融合等方面均起关键作用。它能否被裂解为HA1和HA2两部分是病毒致病力高低的重要因素。AIV感染后可以产生抗HA抗体，HA抗体是主要的保护性抗体，在防止病毒感染中起重要作用。HA蛋白是禽流感流感病毒的主要保护性抗原之一。它不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种禽流感病毒血凝素抗原，其特征在于，所述禽流感病毒血凝素抗原为具有如SEQ ID NO.1所示序列表达的血凝素蛋白；所述血凝素蛋白为哺乳动物表达系统表达的蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种禽流感病毒血凝素抗原，其特征在于，所述禽流感病毒血凝素抗原为具有如SEQIDNO.1所示序列表达的血凝素蛋白；所述血凝素蛋白为哺乳动物表达系统表达的蛋白。2.根据权利要求1所述的禽流感病毒血凝素抗原，其特征在于，所述哺乳动物表达系统中，以HEK293-F细胞作为宿主细胞。3.一种权利要求1或2所述的禽流感病毒血凝素抗原的制备方法，其特征在于，包括：在哺乳动物表达系统中，表达所述禽流感病毒血凝素抗原的基因。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，在HEK293-F细胞表达系统中表达所述禽流感病毒血凝素抗原的基因。5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，提供包含表达所述禽流感病毒血凝素抗原的基因的表达载体，将所述表达载体导入宿主细胞中，然后对宿主细胞进行加压筛选，使宿主细胞表达所述禽流感病毒血凝素抗原；优选地，对加压筛选后的宿主细胞进行单克隆筛选。6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，使用遗传霉素筛选系统筛选表达所述禽流感病毒血凝素抗原的宿主细胞；优选地，所述遗传霉素筛选系...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺笋，李俊辉，潘晓梅，程兰玲，张伟，王遵宝，
申请(专利权)人：天康生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：新疆,65