【技术实现步骤摘要】
一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒及细胞株
本专利技术涉及分子生物学与免疫学领域,尤其涉及一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒及细胞株。
技术介绍
诺如病毒(noroviruses,NoVs),曾称诺瓦克病毒(Norwalkvirus)、类诺瓦克病毒(Norwalk-likevirus)或小圆状病毒(smallroundstructuredvirus,SRSV),隶属于嵌杯科诺如病毒属成员,为单股正链RNA病毒。1972年Kapikian等利用免疫电镜的方法在1968年美国俄亥俄州Norwalk镇暴发的急性冬季呕吐症样品中首次发现了该病毒,并将其命名为Norwalkvirus。此后陆续出现关于该病毒暴发的报道,导致该病毒命名混乱。2002年,国际病毒分类委员会(theInternationalCommitteeonTaxonomyofViruses,ICTV)将其归为嵌杯状病毒科,并正式更名为诺如病毒。根据病毒主要结构蛋白核酸序列的不同,NoVs被分为7个组(GI-GVII),其中GI、GII和GIV组NoVs可以感染人类,被称为人源诺如病毒(humannoroviru ...
【技术保护点】
1.一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒,其特征在于,包括固相载体、检测抗体和样品处理液,其中所述固相载体包括样品垫、胶体金结合垫、具有检测线和质控线的承载膜、吸收垫及底板,所述胶体金结合垫包括结合垫本体和涂覆于所述结合垫本体上的胶体金标记抗体涂层,所述检测线为能够与所述胶体金标记抗体特异性结合的配对抗体形成的涂层,所述检测线位于所述承载膜的靠近所述胶体金结合垫一端,所述质控线位于所述承载膜的靠近所述吸收垫一端。
【技术特征摘要】
1.一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒,其特征在于,包括固相载体、检测抗体和样品处理液,其中所述固相载体包括样品垫、胶体金结合垫、具有检测线和质控线的承载膜、吸收垫及底板,所述胶体金结合垫包括结合垫本体和涂覆于所述结合垫本体上的胶体金标记抗体涂层,所述检测线为能够与所述胶体金标记抗体特异性结合的配对抗体形成的涂层,所述检测线位于所述承载膜的靠近所述胶体金结合垫一端,所述质控线位于所述承载膜的靠近所述吸收垫一端。2.如权利要求1所述的一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒,其特征在于,所述胶体金结合垫和所述检测线使用的抗体为人源诺如病毒S(GI/GII)区衣壳蛋白的单克隆抗体;所述质控线为羊抗鼠二抗形成的涂层。3.如权利要求1所述的一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒,其特征在于,所述承载膜采用NC膜,所述底板采用PVC材料。4.如权利要求1所述的一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒,其特征在于,所述样品处理液包括PBS溶液和DTT溶液,其中所述PBS溶液的pH值为9,所述DTT溶液的浓度为10.0%(w/v)。5.如权利要求1所述的一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中所述固相载体和所述检测抗体的搭配组合可采用以下方式:(1)纳米金颗粒标记的所述单克隆抗体与同种的所述单克隆抗体搭配;(2)纳米金颗粒标记的所述单克隆抗体与对应的所述单克隆抗体中具有不同抗原表位的单克隆抗体搭配。6.如权利要求1所述的一种人源诺如病毒免疫胶体金试剂盒,其特征在于,所述人源诺如病毒S(GI/GII)区衣壳蛋白的单克隆抗体通过以下步骤制备:步骤一、扩增所述人源诺如病毒S(GI/GII)区衣壳蛋白编码区基因,通过限制性内切酶在酶切位点酶切将其插入原核表达载体pET-28a,得到重组表达质粒pET28a-S(GI/GII),其中所述酶切位点为上游EcoRI,下游XhoI;步骤二、将所述步骤一中得到的所述重组表达质粒pET28a-S(GI/GII)转化至大肠杆菌BL21,加入诱导剂诱导所述S(GI/GII)区衣壳蛋白的表达,得到诱导后的重组细菌;步骤三、收集并破碎诱导后的所述重组细菌免疫实验动物;免疫后,适时融合所述免疫实验动物的脾细胞与骨...
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