一种用于检测沙门氏菌的生物传感器及方法技术

本发明专利技术涉及分子生物学技术领域，特别涉及一种用于检测沙门氏菌的生物传感器及方法。该生物传感器包括RPA反应试剂、Lambda核酸外切酶切割反应试剂、HCR反应试剂和显色试剂。本发明专利技术通过多酶系统对沙门氏菌的双链核酸进行扩增，得到在5’端磷酸化的dsDNA。Lambda外切酶消化dsDNA中的5’‑磷酸化链，RPA产物变成单链。通用接头被暴露出来，启动HCR反应，释放出的G‑四联体与Hemin结合，形成G4 DNAzyme，可催化H2O2将无色的TMB氧化为肉眼可见的蓝色oxTMB，进而通过颜色变化和吸光值的改变对沙门氏菌进行检测。本发明专利技术具有可视化、通用性、快速和高敏感性等特点。

A Biosensor and Method for Detecting Salmonella

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测沙门氏菌的生物传感器及方法
本专利技术涉及分子生物学
，特别涉及一种用于检测沙门氏菌的生物传感器及方法。
技术介绍
沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的疾病的总称。感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品，可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。目前沙门氏菌的检测技术主要依靠酶联免疫技术、DNA分子核酸探针或基因探针技术、生化鉴定技术、生物传感器技术。生物传感器技术相对于传统的检测方法最主要的优点是其有很高的灵敏度，能高灵敏的对靶标物质进行检测，这主要是由于其对检测信号进行了放大，信号放大方式主要包括两种：一种是基于工具酶的核酸扩增技术，如PCR技术、RCA技术、SDA技术和RPA技术等。另一种是不依赖酶信号放大技术，如杂交链式反应(HCR反应)。相对于以上提到过的一系列扩增技术，HCR最大的不同点是不需要酶的参与就可发生反应。杂交链式反应是一种体外自组装的信号放大技术，是Dirks等人在2004年首次提出的。它的原理是利用一条单链DNA引发两个不同核酸发夹交替识别，发生杂交反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测沙门氏菌的生物传感器，其特征在于，包括RPA反应试剂、Lambda核酸外切酶切割反应试剂、HCR反应试剂和显色试剂；所述RPA反应试剂包括缓冲液、序列如SEQ ID NO：1所示的上游引物、序列如SEQ ID NO：2所示的下游引物、序列如SEQ ID NO：3所示的通用引物、乙酸镁和水。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测沙门氏菌的生物传感器，其特征在于，包括RPA反应试剂、Lambda核酸外切酶切割反应试剂、HCR反应试剂和显色试剂；所述RPA反应试剂包括缓冲液、序列如SEQIDNO：1所示的上游引物、序列如SEQIDNO：2所示的下游引物、序列如SEQIDNO：3所示的通用引物、乙酸镁和水。2.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述Lambda核酸外切酶切割反应试剂包括Lambda核酸外切酶、缓冲液和水。3.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述HCR反应试剂包括发夹H1、发夹H2和缓冲液。4.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述发夹H1序列如SEQIDNO：4所示，发夹H2序列如SEQIDNO：5所示。5.根据权利要求1所述的生物传感器，其特征在于，所述显色试剂包括缓冲液、Hemin、TMB显色剂和H2SO4。6.一种沙门氏菌的检测方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：许文涛，田洪涛，罗云波，张媛，李舒婷，田晶晶，朱龙佼，杜再慧，
申请(专利权)人：中国农业大学，河北农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11