一种靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞、构建方法及肠癌特异性CTL细胞的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞、构建方法和肠癌特异性CTL细胞的制备方法，属于肿瘤靶向治疗技术领域，所述靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞的构建方法包括以下步骤：1)分析某一肠癌患者的HLA分型和KRAS突变序列组合的亲和力，选择亲和力最高的组合合成融合基因；2)将合成的融合基因连接到表达载体上获得重组载体；3)将所述重组载体转入健康来源的单核细胞，进行诱导培养获得靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞。所述靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞，解决了异体DC与患者HLA分型不匹配的问题，可以刺激更强的免疫反应。所述肠癌特异性CTL细胞对靶细胞具有良好的杀伤效果。

A Kind of Allogeneic Antigen Presenting Cells Targeting KRAS Mutation, Construction Method and Preparation Method of Colorectal Cancer Specific CTL Cells

【技术实现步骤摘要】
一种靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞、构建方法及肠癌特异性CTL细胞的制备方法
本专利技术属于肿瘤靶向治疗
，尤其涉及一种靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞、构建方法和肠癌特异性CTL细胞的制备方法。
技术介绍
肠癌患者中，KRAS突变，是对靶向药抗药的原因之一；因此，KRAS突变患者很难从靶向药中获益，生存期短，因此，迫切需要开发针对KRAS突变的免疫细胞治疗手段。同时，患者来源的树突状细胞DC，数量少，能力差，如果以自体的DC作为KARS的抗原提呈，制备的细胞毒性T淋巴细胞CTL中，特异性细胞比例少，杀伤能力弱。如果是异体DC，HLA又不匹配，无法使用。因此，如何制备高效提呈KRAS突变抗原的DC，并以此DC制备靶向各种KRAS突变的CTL，以杀伤各种KRAS突变的实体肿瘤是目前急需解决的技术难题。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞的构建方法。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：一种靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞的构建方法，包括以下步骤：1)分析某一肠癌患者的HLA分型和KRAS突变序列组合的亲和力本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞的构建方法，包括以下步骤：1)分析某一肠癌患者的HLA分型和KRAS突变序列组合的亲和力，选择亲和力最高的组合合成融合基因；2)将步骤1)中合成的融合基因连接到表达载体上获得重组载体；3)将步骤2)所述重组载体转入健康来源的单核细胞，进行诱导培养获得靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞。

【技术特征摘要】
1.一种靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞的构建方法，包括以下步骤：1)分析某一肠癌患者的HLA分型和KRAS突变序列组合的亲和力，选择亲和力最高的组合合成融合基因；2)将步骤1)中合成的融合基因连接到表达载体上获得重组载体；3)将步骤2)所述重组载体转入健康来源的单核细胞，进行诱导培养获得靶向KRAS突变的异体抗原递呈细胞。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述分析亲和力的工具为NetMHCpan4.0Server在线软件。3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述融合基因还包括连接HLA分型和KRAS突变序列的剪切肽的编码序列。4.根据权利要求1或3所述的构建方法，其特征在于，所述肠癌患者的HLA分型包括HLA-A0206、HLA-A2601、HLA-B4001、HLA-B1301、HLA-C0304和HLA-C0702。5.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：焦顺昌，张嵘，周子珊，
申请(专利权)人：焦顺昌，北京鼎成肽源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11