【技术实现步骤摘要】
一种具有高耐碱性的酯酶突变体及其应用
本专利技术属于生物
，具体涉及具有高耐碱性的酯酶突变体及其应用，并涉及通过定点突变的方法提高来源于海洋细菌CroceicoccusmarinusE4A9T的酯酶CrmE10耐碱性。
技术介绍
酯酶是一类能够将酯类通过化学反应分解为酸和醇的水解酶类。酯酶通常存在一个由丝氨酸、组氨酸和天冬氨酸三个氨基酸残基组成的催化三角为其活性中心；其中，丝氨酸残基经常出现在GXSXG这样一个保守的五肽序列中。大部分酯酶催化反应时不需要辅助因子参与，并且对反应底物具有广泛性和一定的立体结构特异性，这些特性使其作为一种生物催化剂越来越受到人们关注。如今，酯酶作为一种环境友好、经济并且清洁的催化剂，在食品、造纸、精细化学合成以及医疗诊断等领域扮演着越来越重要的角色。工业上应用的酯酶主要来源于不同的生物体内，特别是来自于真菌和细菌，这主要是由于微生物来源的酯酶具有产量高、反应稳定、副产物毒性小及分子生物学操作简单等优点。近年来，随着对酯酶极端反应条件（高温、低温、耐酸、耐碱、耐盐、耐受有机溶剂等）需求的日益增加，从极端环境中分离新型酯酶或工业应用...
【技术保护点】
1.一种酯酶突变体，所述的突变体相对于Seq ID No：1所示的酯酶CrmE10具有如下改变位点：D77X1，其中X1选自K或R；E86X2，其中X2选自K或R；D123X3，其中X3选自K或R；E159X4，其中X4选自K或R；D200X5, 其中X5选自K或R。
【技术特征摘要】
1.一种酯酶突变体，所述的突变体相对于SeqIDNo：1所示的酯酶CrmE10具有如下改变位点：D77X1，其中X1选自K或R；E86X2，其中X2选自K或R；D123X3，其中X3选自K或R；E159X4，其中X4选自K或R；D200X5,其中X5选自K或R。2.根据权利要求1所述的酯酶突变体，其特征在于，所述的突变体相对于SeqIDNo：1所示的酯酶CrmE10具有如下改变位点：D77K、E86K、D123K、E159K、D200K。3.编码权利要求1-2任一项所述的酯酶突变体的多核苷酸。4.一种核酸构建体，其包含与一种或多种调控序列可操作地连接的权利要求3所述的多核苷酸，所述调控序列在合适的表达宿主中指导...
【专利技术属性】
技术研发人员：李继喜，李正阳，鲍路瑶，刘雪鹤，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海,31
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