【技术实现步骤摘要】
微流控芯片以及外泌体的分离方法
本专利技术涉及材料和生物
，特别是涉及一种微流控芯片以及外泌体的分离方法。
技术介绍
外泌体是一种细胞内分泌至胞外的直径为30-120nm的膜性囊泡。外泌体最初发现是被认为是细胞排泄的垃圾。直到2007年发现外泌体可以作为细胞间基因交流的机制，外泌体才引起科学家们的关注。人类几乎所有的细胞都能产生和分泌外泌体，在血液、尿液、唾液、脑脊液中均可检测到外泌体，在临床上可以实现无创检测外泌体。现有的外泌体分离提取方法主要有超高速离心，免疫法，超滤法，商业化试剂盒，色谱排阻等。超高速离心先通过差速离心除去细胞及碎片，然后超高速离心(16000rpm)富集外泌体。超高速离心法一般需要6-8小时，回收率比较低，只有5-25％，费用昂贵。免疫法主要是利用抗体修饰的磁珠来捕获外泌体，得到的外泌体高纯度，回收率高，但普适性低，只捕获含有目标蛋白的外泌体，容易造成失真的分析。超滤法是利用抽真空的方法使含外泌体的溶液通过微滤膜，从而把外泌体富集在微滤膜上，这种方法富集效率比较高，但是易于堵塞，而且外泌体会受到压力损伤。现已有一些商业化的试剂盒(比如...
【技术保护点】
1.一种碟式的微流控芯片，其特征在于，包括芯片基体，所述芯片基体开设有旋转中心孔，所述芯片基体上设置集成反应单元；所述集成反应单元包括开设在所述芯片基体的同一表面的中央池、多个旁侧池以及连通所述中央池与所述旁侧池之间的通道；至少一个所述通道包括多个液体截留腔，所述液体截留腔将所述通道分隔为多段子通道，不同的所述通道包括不同数量的所述液体截留腔，通过对所述碟式的微流控芯片进行交替的高速离心和低速离心，能够使所述集成反应单元中的液体按照预定顺序在所述旁侧池和所述中央池之间流通。
【技术特征摘要】
1.一种碟式的微流控芯片，其特征在于，包括芯片基体，所述芯片基体开设有旋转中心孔，所述芯片基体上设置集成反应单元；所述集成反应单元包括开设在所述芯片基体的同一表面的中央池、多个旁侧池以及连通所述中央池与所述旁侧池之间的通道；至少一个所述通道包括多个液体截留腔，所述液体截留腔将所述通道分隔为多段子通道，不同的所述通道包括不同数量的所述液体截留腔，通过对所述碟式的微流控芯片进行交替的高速离心和低速离心，能够使所述集成反应单元中的液体按照预定顺序在所述旁侧池和所述中央池之间流通。2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述液体截留腔的宽度大于所述子通道的宽度和深度，使得在所述低速离心下液体能够被截留在所述液体截留腔外，在所述高速离心下液体能够进入所述液体截留腔并突破所述液体截留腔。3.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述液体截留腔选自毛细阀、疏水阀和石蜡阀中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述旁侧池为以所述旋转中心孔为中心的扇环形槽，所述子通道包括多个交替设置并首尾相连的正U型和倒U型结构，所述倒U型结构的顶端与所述旋转中心孔的距离小于所述扇环形槽的内弧形侧壁与所述旋转中心孔的距离，所述正U型结构的底端与所述旋转中心孔的距离大于所述扇环形槽的外弧形侧壁与所述旋转中心孔的距离。5.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述集成反应单元包括近端和远端，所述近端靠近所述旋转中心孔，所述远端远离所述旋转中心孔；所述旁侧反应池包括近端池和远端池，所述中央池设置在所述近端池和所述远端池之间，使得在离心力下，所述近端池的液体能够流入所述中央池，所述中央池的液体能够流入所述远端池。6.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述集成反应单元包括近端、远端、第一侧和第二侧，所述近端靠近所述旋转中心孔，所述远端远离所述旋转中心孔，所述第一侧和第二侧沿所述芯片基体的转动方向设置在所述中央池的两侧；所述旁侧反应池包括设置在所述近端和所述第一侧的两个第一旁侧池，分别为第一池和第二池，设置在所述近端和所述第二侧的第二旁侧池，设置在所述远端和所述第一侧的第三旁侧池，以及设置在所述远端和所述第二侧的第四旁侧池；所述第一池与所述中央池之间的所述通道的所述液体截留腔的数量为4个，所述第二池与所述中央池之间的所述通道不包括所述液体截留腔，所述第二旁侧池与所述中央池之间的所述通道的所述液体截留腔的数量为2个。7.一种外泌体的分离方法，利用根据权利要求1-6任一项所述的微流控芯片，所述旁侧池包括样品池、清洗液储存池、洗脱液储存池、废液池和收集池，并包括以下步骤：将酸化玻璃珠设置于所述中央池；将生物样品、清洗液和洗脱液分别设置于所述样品池、清洗液储存池、洗脱液储存池，所述生物样品中具有外泌体，所述外泌体能够结合在所述酸化玻璃珠上，所述清洗液用于去除所述生物样品和所述酸化玻璃珠结合后的杂质，所述洗脱液用于将所述外泌体从所述酸化玻璃珠上洗脱下来；对所述微流控芯片进行交替的高速离心和低速离心，使所述集成反应单元中的液体按照预定顺序在所述旁侧池和所述中央池之间流通；所述微流控芯片内的液体流动顺序依次为：由所述样品池流向所述中央池、由所述中央池流向所述废液池、由所述清洗液储存池流向所述中央池、由所述中央池流向所述废液池、由所述洗脱液流向所述...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。