【技术实现步骤摘要】
一种甲醇蛋白发酵液中酶制剂的生产方法
本专利技术涉及生物工程领域,特别是一种甲醇蛋白发酵液中酶制剂的生产方法。
技术介绍
甲醇蛋白是一类以甲醇和无机盐为主要原料经液态通风发酵生产的单细胞蛋白,以毕赤酵母为菌种经过以上发酵过程制得的蛋白就是甲醇蛋白的一种。将表达产生酶制剂分子的目的基因通过基因工程手段构建成毕赤酵母工程菌,通过微生物发酵,可以在生产甲醇蛋白的同时联产酶制剂(见专利号:ZL201510667433.7一株同时生产甲醇蛋白和脂肪酶的毕赤酵母及其应用及ZL201510667645.5一株同时生产甲醇蛋白和木聚糖酶的毕赤酵母及其应用),常见的有脂肪酶、木聚糖酶、蛋白酶等。在实际生产中可从发酵醪中分离酵母菌体和清液,将酵母菌体喷雾干燥后制得单细胞蛋白,清液经一系列提取工艺制得某种特定的酶制剂。甲醇蛋白发酵液中酶制剂的生产工艺水平决定了酶制剂最终产品的有效成分的纯度、含量、卫生程度、产品质量及产品稳定性,最终影响酶制剂产品应用范围、生产效率、生产过程中的环境保护等方面。因此,加强酶制剂生产工艺的研究和开发,对酶制剂产业的发展有着重要的价值。传统酶制剂生产工艺为:发酵液中加入硅藻土、珍珠岩等助滤剂后经板框压滤,过滤产生的滤饼弃用,过滤出的清液进行超滤浓缩,其中超滤透过液弃用,超滤浓缩液在加入保护剂后喷雾干燥,得到酶制剂成品。但该生产工艺在实际应用中存在许多缺陷:(1)在板框过滤过程中为增加过滤速度会加入大量的助滤剂,过滤时菌体和助滤剂紧密压缩在一起形成滤饼,难以分离,无法对菌体进行进一步利用;大量料液完全通过板框过滤,会产生大量的滤饼,卸滤饼操作会耗费大量 ...
【技术保护点】
1.一种甲醇蛋白发酵液中酶制剂的生产方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、将重量浓度为350‑450g/L的甲醇蛋白发酵液A在20‑30℃下用碟片式高速离心机进行第一次分离,离心机转速9000‑11500rpm、离心力13000‑18000×g、进料速度1.5‑2m³/h,分别获得重相液B和轻相液C,重相液B和轻相液C体积比为1:1,重相液B的重量浓度为697‑899g/L,轻相液C的重量浓度为1‑3g/L;(2)、向步骤(1)得到的重相液B中加入1‑2倍体积的脱盐水进行稀释,得到菌液D;将菌液D在20‑30℃下输送至碟片式高速离心机进行二次离心分离,离心机转速9000‑11500 rpm,离心力13000‑18000×g,进料速度1.5‑2m³/h,经过二次离心分离,将菌体残余酶液被洗脱,分别获得重相液E和轻相液F,重相液E和轻相液F体积比为1:1‑1:2,重相液E的重量浓度为694‑898g/L,轻相液F的重量浓度为1‑3g/L;(3)、将步骤(1)轻相液C和步骤(2)轻相液F混合成混合液,并加入混合液体积重量的2%‑4%的硅藻土、1%‑2%的活性炭,输送至隔膜压滤机,进行除杂、 ...
【技术特征摘要】
1.一种甲醇蛋白发酵液中酶制剂的生产方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、将重量浓度为350-450g/L的甲醇蛋白发酵液A在20-30℃下用碟片式高速离心机进行第一次分离,离心机转速9000-11500rpm、离心力13000-18000×g、进料速度1.5-2m³/h,分别获得重相液B和轻相液C,重相液B和轻相液C体积比为1:1,重相液B的重量浓度为697-899g/L,轻相液C的重量浓度为1-3g/L;(2)、向步骤(1)得到的重相液B中加入1-2倍体积的脱盐水进行稀释,得到菌液D;将菌液D在20-30℃下输送至碟片式高速离心机进行二次离心分离,离心机转速9000-11500rpm,离心力13000-18000×g,进料速度1.5-2m³/h,经过二次离心分离,将菌体残余酶液被洗脱,分别获得重相液E和轻相液F,重相液E和轻相液F体积比为1:1-1:2,重相液E的重量浓度为694-898g/L,轻相液F的重量浓度为1-3g/L;(3)、将步骤(1)轻相液C和步骤(2)轻相液F混合成混合液,并加入混合液体积重量的2%-4%的硅藻土、1%-2%的活性炭,输送至隔膜压滤机,进行除杂、脱色,隔膜压滤机进料压力为0.8-1.0MPa,进料温度为20-30℃,进料量为10m³/h,分别得到滤饼G和过滤清液H;其中滤饼G只含有少量的菌渣,便于处理,因此具有较大的重复利用价值;步骤(2)重相液E为纯净的酵母菌液,可进一步处理加工为酵母粉、精蛋白和小分子肽的产品;(4)、过滤清液H进入超滤系统进行循环过滤,产生透过液I和浓缩酶液J,超滤系统滤膜采用聚醚砜材质,截留分子量为5000道尔顿,进料压力0.5-0.6MPa,浓缩倍数为3-5倍,透过液I含有大量无机盐,经进一步处理回用,作为下一批次发酵的培养基,不仅实现了废水回用同时大大减少了物料的投入,降低了生产成本;(5)、浓缩酶液J经微滤系统进行除菌过滤,微滤系统采用折叠过滤滤芯,材质为聚醚砜,过滤精度为0.22um,将酶液中所含微量的生产菌及杂菌过滤除掉,得到纯净的无菌酶液K,无菌酶液K加入无菌酶液K重量0.3%的山梨酸钾及0.4%的苯甲酸钠防腐处理,包装成液体酶成品,或添加无菌酶液K重量20-30%的玉米淀粉作为保护剂进行干燥处理,制成固体酶粉成品。2.根据权利要求1所述的甲醇蛋白发酵液中酶制剂的生产方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、将重量浓度为400g/L的甲醇蛋白发酵液A300L在30℃下用HFC15-01-177碟片式高速离心机进行第一次分离,离心机转速11500rpm、离心力18000×g、进料速度2m³/h,分别获得145L重相液B和145L轻相液C,甲醇蛋白发酵液A的损耗10L,重相液B的重量浓度为798g/L,轻相液C的重量浓度为2g/L;(2)、向步骤(1)得到的重相液B中加入290L脱盐水进行稀释,得到435L菌液D,重量浓度为266g/L;将菌液D在20-30℃下输送至碟片式高速离心机进行二次离心分离,离心机转速11000rpm,离心力16000×g,进料速度2m³/h,经过二次离心分离,将菌体残余酶液被洗脱,分别获得140L重相液E和280L轻相液F,菌液D损耗15L,重相液E的重量浓度为796g/L,轻相液F的重量浓度为1g/L;(3)、将步骤(1)轻相液C和步骤(2)轻相液F混合成混合液425L,并加入混合液体积重量的3%的硅藻土、1%%的活性炭,输送至隔膜压滤机,进行除杂、脱色,隔膜压滤机进料压力为1.0MPa,进料温度为25℃,进料量为10m³/h,分别得到34.57kg滤饼G和400L过滤清液H,混合液损耗25L;其中滤饼G只含有少量的菌渣,便于处理,因此具有较大的重复利用价值;步骤(2)重相液E为纯净的酵母菌液,可进一步处理加工为酵母粉、精蛋白和小分子肽的产品;(4)、过滤清液H进入超滤系统进行循环过滤,超滤系统滤膜采用聚醚砜材质,截留分子量为5000道尔顿,进料压力0.5MPa,浓缩倍数为5倍,产生320L透过液I和78L浓缩酶液J,透过液I含有大量无机盐,经进一步处理回用,采用专利号2013100017455的权利要求1给出的处理方法,作为下一批次发酵的培养基,不仅实现了废水回用同时大大减少了物料的投入,降低了生产成本;(5)、浓缩酶液J经微滤系统进行除菌过滤,微滤系统采用折叠过滤滤芯,材质为聚醚砜,过滤精度为0.22um,将酶液中所含微量的生产菌及杂菌过滤除掉,得到纯净的77...
【专利技术属性】
技术研发人员:苟万晓,赵利军,范延超,任晓辉,白冠章,买旭林,谢军,刘光铭,张锋涛,侯龙龙,段亚培,徐倩,李志红,尹聪乐,张瑛乐,郝景梅,范琳琳,
申请(专利权)人:义马煤业集团煤生化高科技工程有限公司,
类型:发明
国别省市:河南,41
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。