甜菊醇糖苷己糖转移酶及编码该物质的基因制造技术

本发明专利技术的目的在于提供一种甜菊醇糖苷己糖转移酶及使用该酶的含有葡萄糖及/或鼠李糖的甜菊醇糖苷的制造方法。本发明专利技术提供一种甜菊醇糖苷己糖转移酶及使用该酶的含有葡萄糖及/或鼠李糖的甜菊醇糖苷的制造方法。本发明专利技术提供一种导入了甜菊醇糖苷己糖转移酶基因的转化体及该转化体的制作方法。

Stevioside Hexose Transferase and the Gene Encoding the Substance

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】甜菊醇糖苷己糖转移酶及编码该物质的基因
本专利技术涉及一种对于甜菊醇糖苷具有转移己糖活性的蛋白质及编码该蛋白质的多核苷酸、利用该蛋白的甜菊醇糖苷的制造方法、对甜菊醇糖苷化酶进行高表达的转化体及根据所述方法制作的甜菊醇糖苷以及其利用。
技术介绍
在菊科甜菊(Steviarebaudiana)的叶中包含作为二萜的一种的被称作甜菊醇(Steviol)的次级代谢产物,由于甜菊醇糖苷呈现砂糖的约300倍的甜味而作为低热量的甜味剂在食品产业中被利用。肥胖作为深刻的社会问题在国际上日益严峻，从增进健康及削减医疗费的观点出发低热量甜味剂的需求也日益增大。目前，人工合成的氨基酸衍生物阿斯巴甜(Aspartame)、乙酰磺胺酸钾(AcesulfamePotassium)作为人工甜味剂被利用，但像甜菊醇糖苷这样天然存在的低热量甜味剂更为安全，从而期待其容易得到消费者理解(PublicAcceptance)。甜菊的主要甜菊醇糖苷，以糖最终修饰为附加了4个糖的被称为瑞鲍迪苷A(RebaudiosideA；Reb.A)的糖苷(图1)。作为其前体的甜菊醇3糖糖苷的甜菊苷(Stevioside)在量上最多，这两种物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.选自以下(a)～(c)中的任一项所记载的蛋白质：(a)由序列号2的氨基酸序列构成的蛋白质；(b)由序列号2的氨基酸序列中除氨基酸残基X7以外的1～48个氨基酸缺失、取代、插入、及/或添加的氨基酸序列构成的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质；(c)具有对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与氨基酸残基X7对应的氨基酸为同一氨基酸的氨基酸序列的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质，

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.12.27 JP 2016-2526431.选自以下(a)～(c)中的任一项所记载的蛋白质：(a)由序列号2的氨基酸序列构成的蛋白质；(b)由序列号2的氨基酸序列中除氨基酸残基X7以外的1～48个氨基酸缺失、取代、插入、及/或添加的氨基酸序列构成的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质；(c)具有对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与氨基酸残基X7对应的氨基酸为同一氨基酸的氨基酸序列的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质，式中，R1表示H、C1～C20烷基、C2～C20烯基、C2～C20炔基、C4～C20烷基二烯基、C6～C18芳基、C6～C20烷基芳基、C6～C20芳基烷基、C4～C20环烷基、C4～C20环烯基、(C3～C10环烷基)C1～C10烷基或糖残基。2.根据权利要求1所述的蛋白质，其特征在于，为，(b')由序列号2的氨基酸序列中除氨基酸残基X1～X7以外的1～48个氨基酸缺失、取代、插入、及/或添加的氨基酸序列构成的，且具有向所述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质；或(c')具有对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与氨基酸残基X1～X7对应的氨基酸为同一氨基酸的氨基酸序列的，且具有向所述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质。3.选自以下(b”)、(c”)、(d)～(i)中的任一项所记载的蛋白质：(b”)由序列号2的氨基酸序列中除氨基酸残基X2及/或X3以外的1～48个氨基酸缺失、取代、插入、及/或添加的氨基酸序列构成的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质；(c”)具有对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与氨基酸残基X2及/或X3对应的氨基酸为同一氨基酸的氨基酸序列的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质；(d)由序列号4的氨基酸序列中第156位的氨基酸残基为Val，及/或第233位的氨基酸残基为Phe的氨基酸序列构成的蛋白质；(e)由上述(d)的蛋白质中，1～48个氨基酸缺失、取代、插入、及/或添加，与序列号4的第156位的氨基酸残基对应的氨基酸残基为Val，及/或与序列号4的第233位的氨基酸残基对应的氨基酸残基为Phe的氨基酸序列构成的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质；(f)具有对于上述(d)的蛋白质的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与序列号4的第156位的氨基酸残基对应的氨基酸残基为Val，及/或与序列号4的第233位的氨基酸残基对应的氨基酸残基为Phe的氨基酸序列的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质；(g)序列号2的氨基酸序列中氨基酸残基X2为Thr，及/或氨基酸残基X3为Ser的蛋白质；(h)由上述(g)的蛋白质中，1～48个氨基酸缺失、取代、插入、及/或添加，与氨基酸残基X2对应的氨基酸残基为Thr，及/或与氨基酸残基X3对应的氨基酸残基为Ser的氨基酸序列构成的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质；(i)具有对于上述(g)的蛋白质的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与氨基酸残基X2对应的氨基酸残基为Thr，及/或与氨基酸残基X3对应的氨基酸残基为Ser的氨基酸序列的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质，式中，R1表示H、C1～C20烷基、C2～C20烯基、C2～C20炔基、C4～C20烷基二烯基、C6～C18芳基、C6～C20烷基芳基、C6～C20芳基烷基、C4～C20环烷基、C4～C20环烯基、(C3～C10环烷基)C1～C10烷基或糖残基。4.根据权利要求1～3中任一项所述的蛋白质，其特征在于，所述己糖为选自葡萄糖或鼠李糖中的物质。5.根据权利要求1～4中任一项所述的蛋白质，其特征在于，所述R1为H或葡萄糖单体或葡萄糖二聚体的糖残基。6.根据权利要求1～5中任一项所述的蛋白质，其特征在于，所述化合物为甜菊单糖苷或甜叶悬钩子苷。7.选自以下(a)～(d)中的多核苷酸：(a)含有序列号1的碱基序列的多核苷酸；(b)编码由序列号2的氨基酸序列构成的蛋白质的多核苷酸；(c)编码由序列号2的氨基酸序列中除氨基酸残基X7以外1～48个氨基酸缺失、取代、插入及/或添加的氨基酸序列构成的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位添加己糖的活性的蛋白质的多核苷酸；(d)编码具有对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与氨基酸残基X7对应的氨基酸为同一氨基酸的氨基酸序列的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质的多核苷酸，式中，R1表示H、C1～C20烷基、C2～C20烯基、C2～C20炔基、C4～C20烷基二烯基、C6～C18芳基、C6～C20烷基芳基、C6～C20芳基烷基、C4～C20环烷基、C4～C20环烯基、(C3～C10环烷基)C1～C10烷基或糖残基。8.根据权利要求7所述的多核苷酸，其特征在于，为，(c')编码由序列号2的氨基酸序列中除氨基酸残基X1～X7以外1～48个氨基酸缺失、取代、插入及/或添加的氨基酸序列构成的，且具有向所述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位添加己糖的活性的蛋白质的多核苷酸；或(d')编码具有对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与氨基酸残基X1～X7对应的氨基酸为同一氨基酸的氨基酸序列的，且具有向所述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质的多核苷酸。9.选自以下(c”)、(d”)、(e)～(j)中的多核苷酸：(c”)编码在序列号2的氨基酸序列中除氨基酸残基X2及/或X3以外的1～48个氨基酸缺失、取代、插入、及/或添加的氨基酸序列构成的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质的多核苷酸；(d”)编码具有对于序列号2的氨基酸序列具有90％以上的序列一致性，且与氨基酸残基X2及/或X3对应的氨基酸为同一氨基酸的氨基酸序列的，且具有向下述通式(I)所示的化合物的13位葡萄糖的2位上添加己糖的活性的蛋白质的多核苷酸；(e)编码序列号4的氨基酸序列中，第156位的氨基酸残基为...

【专利技术属性】
技术研发人员：小埜栄一郎，落合美佐，岩城一考，平井正良，
申请(专利权)人：三得利控股株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP