一种白地霉Y069及其在白酒调味中的应用制造技术

本发明专利技术属于酒类调味技术领域，具体涉及一种白地霉Y069及其在白酒调味中的应用。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2018年10月12日，保藏编号：CGMCC No.16581。白地霉Y069筛选及调味液的制备方法，包括如下步骤：白地霉Y069分离鉴定；白地霉Y069培养；白地霉Y069扩大培养；调味液处理等，白地霉Y069添加入白酒中混匀，在白酒调味中应用。本发明专利技术白地霉Y069的筛选方法操作简单、所选菌种易于分离、成本较低，利用白地霉调味液提高白酒的质量，可控性强、节能环保。所利用的白地霉调味液不会破坏酒体骨架成分，并能有效提升白酒口感，并且持续时间长，在储存18个月后仍能达到较好的改善效果，具有很好的实际应用效果。

A Geotrichum albicans Y069 and its application in liquor flavoring

【技术实现步骤摘要】
一种白地霉Y069及其在白酒调味中的应用
本专利技术属于酒类调味
，具体涉及一种白地霉Y069及其在白酒调味中的应用。
技术介绍
二锅头酒属于清香型白酒，白酒中98%的成分是乙醇和水，其余约2%为微量的风味物质，如酸类、酯类、醇类、醛酮类及芳香族化合物，这些仅占2%的微量有机化合物成为二锅头酒的呈香呈味物质，决定了二锅头白酒的风格特点和产品质量，同时各种风味物质之间协调的量比关系也是优质白酒的基本保证。在白酒的生产过程中，基础酒经过陈酿、勾兑后，主体风味物质已基本协调，而调味则是对基础酒所进行的最后一道精细加工，利用少量或微量的调味酒来弥补基础酒在香气和口感方面的不足，使其酒体优雅醇厚，回味悠长，具有画龙点睛的作用。目前用于改善白酒风味的主要手段是通过特殊工艺制作调味酒或食品添加剂进行调味，基本可分为酸味调味酒、酯味调味酒、长酵调味酒、陈味调味酒等。而调味酒的生产工艺较为复杂，生产周期较长，且需要经过长期的储藏过程使其老熟以达到最好的调味效果，这大大降低了生产效率，而单独使用食品添加剂调味则会给酒体带来不自然、不协调的感官特征，降低了清香型白酒作为自然发酵产品的消费者预期价值。利用微生物发酵液对基础酒进行合理调味则无上述弊端，菌种来源于清香型白酒发酵酒醅，即满足了改善风味的需求，又符合食品安全要求，同时具有创新口味和不可复制性。
技术实现思路
基于上述问题，本专利技术的目的在于通过梯度稀释法结合平板涂布法从酿造酒醅中分离获得一种白地霉菌株，以及利用该菌株生产调味液来改善白酒口感，有效提升产品质量。本专利技术采用的技术方案是：一种白地霉（Geotrichumcandidum）Y069，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2018年10月12日，保藏编号：CGMCCNo.16581。本专利技术所述白地霉调味液添加入白酒中混匀，在白酒调味中应用。进一步的，所述的调味液添加量为0.25‱。进一步的，所述的白酒为清香型白酒。进一步的，所述的清香型白酒为二锅头白酒。本专利技术所述的白地霉的筛选及调味液的制备方法，包括如下步骤：（1）白地霉Y069分离鉴定：称取10g大茬发酵酒醅溶解于40ml无菌水中，振荡器震荡混匀，制成微生物菌悬液，标记浓度为10-1，依次稀释梯度为10-2、10-3、10-4、10-5，吸取0.1mL不同梯度菌悬液涂布YPD平板中，28~32℃培养48~72h，根据形态挑取差异菌落进行菌种鉴定；提取不同酵母DNA后，利用PCR扩增酵母菌D1/D2区，测序后进行序列矫正比对；（2）白地霉Y069培养：接种环挑取一环白地霉菌体接种于YPD平板中，25~30℃培养48h活化菌体，挑取一环新鲜菌体接种于种子培养液中，28℃，180r/min条件下培养48h；（3）白地霉Y069扩大培养：吸取1~5%的步骤1中液体转入新配制的种子培养液中扩大培养，培养条件为25~28℃、转速180r/min培养8~9d；培养结束后，8000rpm转离心获得上清液，备用；（4）调味液处理：步骤（3）制备的上清液真空抽滤过0.25滤膜后即可得到白地霉调味液，备用。进一步的，所述的步骤（2）和（3）中的种子培养液为用10%豆芽汁配制的20g/L的葡萄糖溶液，115℃灭菌30min。本专利技术白地霉Y069的筛选方法操作简单、所选菌种易于分离、成本较低，利用白地霉调味液提高白酒的质量，可控性强、节能环保。本专利技术所利用的白地霉Y069调味液不会破坏酒体骨架成分，并能有效提升白酒口感，并且持续时间长，在储存18个月后仍能达到较好的改善效果，具有很好的实际应用效果。附图说明图1为白地霉Y069的鉴定发育树图2为在40×100倍下白地霉Y069的形态。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术的
技术实现思路
进行详细的说明。实施例1白地霉Y069分离鉴定称取10g大茬发酵酒醅溶解于40ml无菌水中，振荡器震荡混匀，制成微生物菌悬液，标记浓度为10-1，依次稀释梯度为10-2、10-3、10-4、10-5，吸取0.1ml不同梯度菌悬液涂布YPD平板中，28~32℃培养48~72h，根据形态挑取差异菌落进行菌种鉴定。提取不同酵母DNA后，利用PCR扩增酵母菌D1/D2区，测序后进行序列矫正比对（详见附图1）。利用MEGA5.10软件将模式菌株和鉴定菌株的基因序列进行比对，该菌种与菌GalactomycescandidumCBS357.86相似度为100%，因此确定为Geotrichumcandidum，标记为Y069。挑取白地霉Y069菌体进行显微观察，如附图2所示，发现Y069不产生有性孢子，以分生孢子进行繁殖，孢子梗外露，子实体无明显界限，菌落呈绒毛状，分生孢子和孢子梗无色。初步认定为半知菌类、丛梗孢目、丛梗菌科。分生孢子梗短，直，顶端分生孢子串生，为丛梗菌孢目中的卵形孢霉族。分生孢子近乎方形或长方形，短两端平切，由菌丝断裂而形成。属于卵形孢霉族、地霉属。同时由于其菌丝为丛白色粉状，分生孢子5~10×4μm。结合分子鉴定结果，确定Y069属于半知菌类、丛梗孢目、丛梗菌科、孢霉族、地霉属、白地霉（Geotrichumcandidum）。实施例2白地霉Y069调味液的制备（1）用10%豆芽汁配制的20g/L的葡萄糖溶液，115℃灭菌30min，作为种子培养液备用；（2）接种环挑取一环白地霉菌体接种于YPD平板中，25℃培养48h活化菌体，挑取一环新鲜菌体接种于100ml种子培养液中，28℃，180r/min条件下培养48h；（3）吸取1~5%的步骤（2）中液体转入新配制的500ml种子培养液中扩大培养，培养条件为25℃、转速180r/min摇床培养8d；培养结束后，8000rpm转离心15min，收集上清液，0.25滤膜真空抽滤，所得液体即可用于酒体添加。实施例3白地霉Y069调味液的制备（1）用10%豆芽汁配制的20g/L的葡萄糖溶液，115℃灭菌30min，作为种子培养液备用；（2）接种环挑取一环白地霉菌体接种于YPD平板中，28℃培养48h活化菌体，挑取一环新鲜菌体接种于100ml种子培养液中，28℃，180r/min条件下培养48h；（3）吸取1~5%的步骤（2）中液体转入新配制的500ml种子培养液中扩大培养，培养条件为26℃、转速180r/min摇床培养9d；培养结束后，8000rpm转离心15min，收集上清液，0.25滤膜真空抽滤，所得液体即可用于酒体添加。实施例4白地霉Y069调味液的制备（1）用10%豆芽汁配制的20g/L的葡萄糖溶液，115℃灭菌30min，作为种子培养液备用；（2）接种环挑取一环白地霉菌体接种于YPD平板中，30℃培养48h活化菌体，挑取一环新鲜菌体接种于100ml种子培养液中，28℃，180r/min条件下培养48h；（3）吸取1~5%的步骤（2）中液体转入新配制的500ml种子培养液中扩大培养，培养条件为28℃、转速180r/min摇床培养9d；培养结束后，8000rpm转离心15min，收集上清液，0.25滤膜真空抽滤，所得液体即可用于酒体添加。实施例5白地霉调味液差异风味分析1、白地霉调味液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种白地霉Y069，其特征在于，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2018 年10月12日，保藏编号：CGMCC No.16581。

【技术特征摘要】
1.一种白地霉Y069，其特征在于，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2018年10月12日，保藏编号：CGMCCNo.16581。2.根据权利要求1所述的一种白地霉Y069，其特征在于，所述白地霉Y069的调味液添加入白酒中混匀，在白酒调味中应用。3.根据权利要求1或2所述的一种白地霉Y069的筛选及调味液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）白地霉Y069分离鉴定：称取10g大茬发酵酒醅溶解于40ml无菌水中，振荡器震荡混匀，制成微生物菌悬液，标记浓度为10-1，依次稀释梯度为10-2、10-3、10-4、10-5，吸取0.1mL不同梯度菌悬液涂布YPD平板中，28~32℃培养48~72h，根据形态挑取差异菌落进行菌种鉴定；提取不同酵母DNA后，利用PCR扩增酵母菌D1/D2区，测序后进行序列矫正比对；（2）白地霉Y069培养：接种环挑取...

【专利技术属性】
技术研发人员：王勇，周森，魏金旺，王瑛，
申请(专利权)人：北京顺鑫农业股份有限公司牛栏山酒厂，
类型：发明
国别省市：北京,11