一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，用苯胺对奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷进行柱前衍生化，然后采用全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相对奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷进行分离，色谱条件如下：流速1.5±0.2mL/min；柱温：25±3℃；进样量：20μl；运行时间：45min；检测波长：210nm；流动相为磷酸氢钠溶液‑乙腈体系，进行梯度洗脱,从而确认奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷的残留量，为确认该方法的可行性和有效性，对其在系统适用性、专属性、精密度、检测限、定量限、线性和范围、准确度和耐用性等方面进行验证，使其完全符合中国药典方法验证的指导原则，并且可用于奥美沙坦酯原料药的质量控制。

A Method for the Detection of Triphenylchloromethane in Olmesartan Ester

【技术实现步骤摘要】
一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法
本专利技术涉及一种HPLC法测定奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的方法，属于药物分析

技术介绍
奥美沙坦酯（CAS号：144689-63-4）是一种淡黄色至类白色粉末，英文名称OlmesartanMedoxomil，其化合物英文名称为2,3-dihydroxy-2-butenyl4(1-hydroxy-1-methylethyl)-2-propyl-1-[p-(o-1H-tetrazol-5-ylphenyl)benzyl]imidazole5-carboxylate,cyclic2,3-carbonate。奥美沙坦酯商品名为Benicar，其口服后在小肠壁完全去酯转化成活性代谢产物奥美沙坦(olmesartan)，不需经肝细胞色素CYP450酶代谢；其血浆浓度达峰时间是1～3小时，血中半衰期12～18小时，即使血浆浓度最低时仍是AT1受体50%被抑制浓度(IC50)的5～6倍；口服吸收不受食物影响，吸收剂量的35%～50%从尿中排泄，其他部分经肠道排泄，呈现较平衡的双径路排泄。上述特点保证了奥美沙坦酯具有口服1次全天降压、肝肾功能障碍者服用方便，以及与其他药物同时应用时相互作用较少等优点。奥美沙坦酯具有降压、延缓2型糖尿病患者微量蛋白尿的发生、保护靶器官和抗动脉粥样硬化(AS)等作用。具有反向激动剂效应的奥美沙坦酯不仅能抑制AngⅡ（血管紧张素Ⅱ）所引起的AT1受体的活性，也能够抑制机械刺激导致的AT1受体的活性，特别是还能抑制AT1受体的结构性基础活性，这可能是具有反向激动剂效应的ARB具有强效降压和更好的靶器官保护作用的主要原因。奥美沙坦酯通过降低系统高血压，扩张出球小动脉强于入球小动脉而直接降低肾小球内压，改善肾小球滤过膜的通透性，减少细胞外基质蓄积，从而延缓尿蛋白的发生，延缓DN进展；奥美沙坦可在不影响心率和心输出量的情况下降低周围血管阻力，在血浆肾素代谢活跃时，其降低周围血管阻力作用增强。三苯基氯甲烷是奥美沙坦酯的合成过程中潜在的基因毒性杂质，根据ICH指导原则中的质量指导原则部分，需要控制原料药中的杂质含量。为确认奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的残留量，公司自主开发液相色谱方法进行检测，为证明此方法的有效性和可行性，对本方法进行了验证。目前还没有文献报道奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷含量的检测方法，本专利技术首次提出了一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷含量的检测方法，采用全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相对奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷进行柱层析，从而实现奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷的含量测定。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，用苯胺对奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷进行柱前衍生化，然后采用全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相对奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷进行分离，从而确认奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷的残留量，为确认该方法的可行性和有效性，对其在系统适用性、专属性、精密度、检测限、定量限、线性和范围、准确度和耐用性等方面进行验证，使其完全符合中国药典方法验证的指导原则，并且可用于奥美沙坦酯原料药的质量控制。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制空白溶液、参比溶液、奥美沙坦酯定位溶液；所述空白溶液包括苯胺溶液；所述参比溶液由三苯基氯甲烷、苯胺和稀释液配制而成；所述奥美沙坦酯定位溶液由奥美沙坦酯样品、苯胺和稀释液配制而成；（2）测定方法：分别将空白溶液、参比溶液和奥美沙坦酯定位溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱条件如下：色谱柱：用全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相为填充剂；流速1.5±0.2mL/min；柱温：25±3℃；进样量：20μl；运行时间：45min；检测波长：210nm；流动相为A-B体系，进行梯度洗脱。本专利技术提供了一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，进一步的，所述空白溶液的配制步骤：取容量瓶，加入苯胺溶解后，用稀释液稀释至刻度，摇匀即得空白溶液；所述参比溶液：称取三苯基氯甲烷对照品，置容量瓶中，加入苯胺溶解后，用稀释液稀释配制参比溶液；所述奥美沙坦酯定位溶液：称取奥美沙坦酯样品，精密称定，置容量瓶中，加入苯胺溶解，用稀释液稀释至刻度，摇匀即得奥美沙坦酯定位溶液；所述流动相A为0.1%（W/V）磷酸二氢钠溶液；所述流动相B为乙腈；所述稀释液为乙腈；所述流动相梯度过程如下：。更优选的，本专利技术提供了一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，进一步的，配制空白溶液时，所述容量瓶选自20mL容量瓶，苯胺溶液为2mL；配制参比溶液时，具体步骤为：称取三苯基氯甲烷对照品约7.5mg，置20ml容量瓶中，加入2.0ml苯胺溶解后，用稀释液稀释至刻度，摇匀；精密量取上述20ml容量瓶中的溶液1.0ml置100ml容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；精密量取上述100ml容量瓶中的溶液5.0ml置50ml容量瓶中，加稀释液稀释至刻度，摇匀；配制奥美沙坦酯定位溶液时，所述奥美沙坦酯样品为0.2g，所述容量瓶选自20mL，所述苯胺溶液为2mL；更优选的，本专利技术提供了一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，进一步的，所述测定方法为：分别将空白溶液、参比溶液和奥美沙坦酯定位溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱条件如下：色谱柱：用全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相为填充剂；流速1.5mL/min；柱温：25℃；进样量：20μl；运行时间：45min；检测波长：210nm；流动相为A-B体系，进行梯度洗脱。其中，所述色谱柱具体的选自AgilentEclipseXDB-C8，4.6×250mm，5.0μm，或效能相当的色谱柱；其中，所述流动相梯度过程如下：。所述磷酸二氢钠为AR及以上级；所述苯胺为AR及以上级；所述三苯基氯甲烷对照品为外购或自制。（3）三苯基氯甲烷(ppm)=×；其中：RU：测试溶液图谱中三苯基氯甲烷的峰面积；RS：5针参比溶液图谱中三苯基氯甲烷的平均峰面积；CS：参比溶液中三苯基氯甲烷的浓度(μg/ml)；CU：测试溶液的浓度(g/ml)。所述的三苯基氯甲烷含量的测定方法还包括在检测之前的方法验证，该方法验证为按照正式检测的色谱条件，测定结果为：有益效果本专利技术检测奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的方法是用苯胺对奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷进行柱前衍生化，然后采用全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相对奥美沙坦酯中的三苯基氯甲烷进行分离，进而测定奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的残留量，所述的检测方法对奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的色谱峰分离度高、具有较高的系统适用性，同时在专属性、精密度、定量限、检测限、准确度、线性和范围和耐用性都符合标准。为确认奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的残留量，本专利技术利用方便快捷的高效液相色谱法，为证明此方法的有效性和可行性，对本方法进行了验证。对奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测，可用于监测奥美沙坦酯原料药及制剂的质量。本专利技术首次提出了奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，具有准确度高、精密度高、重现性好、稳定性好、专属性强等特点，同时本专利技术的测定方法耗时短，操作简单，成本低等优点。附图说明图1为空白溶液的液相色谱图；图2为空白溶液的放大液相色谱图；图3为系统适用性溶液的液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制空白溶液、参比溶液、奥美沙坦酯定位溶液；所述空白溶液包括苯胺溶液；所述参比溶液由三苯基氯甲烷、苯胺和稀释液配制而成；所述奥美沙坦酯定位溶液由奥美沙坦酯样品、苯胺和稀释液配制而成；（2）测定方法：分别将步骤（1）配制的空白溶液、参比溶液和奥美沙坦酯定位溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱条件如下：色谱柱：用全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相为填充剂；流速1.5±0.2mL/min；柱温：25±3℃；进样量：20μl；运行时间：45min；检测波长：210nm；流动相为A‑B体系，进行梯度洗脱。

【技术特征摘要】
1.一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）配制溶液，分别配制空白溶液、参比溶液、奥美沙坦酯定位溶液；所述空白溶液包括苯胺溶液；所述参比溶液由三苯基氯甲烷、苯胺和稀释液配制而成；所述奥美沙坦酯定位溶液由奥美沙坦酯样品、苯胺和稀释液配制而成；（2）测定方法：分别将步骤（1）配制的空白溶液、参比溶液和奥美沙坦酯定位溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，色谱条件如下：色谱柱：用全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相为填充剂；流速1.5±0.2mL/min；柱温：25±3℃；进样量：20μl；运行时间：45min；检测波长：210nm；流动相为A-B体系，进行梯度洗脱。2.根据权利要求1所述的一种奥美沙坦酯中三苯基氯甲烷的检测方法，其特征在于，所述流动相A为0.1%W/V磷酸二氢钠溶液；所述流动相B为乙腈；所述稀释液为乙腈；所述流动相梯...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘杰，吴挺强，汤伟彬，郭锐，谢金昌，赵旭，黄坚涛，李琴，蔡强，王晴晴，
申请(专利权)人：珠海润都制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44