一种功能多肽及应用制造技术

本发明专利技术提供一种功能多肽，包括多肽片段Ⅰ：识别及阻断淀粉样蛋白Aβ聚集的多肽片段和多肽片段Ⅱ：apoE受体结合区域的模拟肽，所述多肽片段Ⅰ与多肽片段Ⅱ通过连接肽或直接连接。本发明专利技术所述多肽可以抑制淀粉样蛋白Aβ聚集、抑制Aβ的细胞毒性、加速小胶质细胞对Aβ的清除，可用于制备治疗阿尔茨海默病的药物。

【技术实现步骤摘要】
一种功能多肽及应用
本专利技术涉及医药领域，尤其涉及一种功能多肽，可用于制备治疗阿尔茨海默病的药物。
技术介绍
阿尔茨海默病(AD)是最常见的神经退行性疾病，是老年人群中痴呆的主要原因。根据2018年世界老年痴呆症报告，到2018年全世界有5000万人患有痴呆症，到2050年，这一数字将增加三倍，达到1.52亿。估计2018年全球痴呆症总费用为1万亿美元，到2030年这个数字将增加到2万亿美元。AD发病机制复杂，涉及淀粉样蛋白-β(Aβ)代谢异常，tau蛋白过度磷酸化，氧化应激，反应性胶质细胞和小胶质细胞改变等病理事件。其中，脑内Aβ的异常积聚和聚集，称为“淀粉样蛋白假说”，被认为是发病机制中的一个重要事件。并且Aβ斑块的沉积被用作AD的病理标志之一。Aβ衍生自淀粉样蛋白前体蛋白(APP)通过两种酶活性的蛋白水解加工：β-和γ-分泌酶。APP在脑细胞和外周器官和组织中广泛表达，并且细胞外支配的APP由BACE1基因编码的β-分泌酶切割。然后，膜内的剩余部分APP被γ-分泌酶切割，形成Aβ。众所周知，可溶性Aβ在有毒低聚物，纤维和淀粉样蛋白斑中的积累引发了该疾病的所有其他标志，包括tau病理学，炎症，突触功能障碍，神经元丢失和痴呆。它暗示了降低Aβ产生，抑制Aβ积聚或增加其清除率足以治愈该疾病。基于此，在过去的十年中，通过抑制γ-分泌酶和β-分泌酶，加速Aβ的去除或抑制Aβ的聚集和沉积，已经进行了许多研究来减少脑内Aβ的产生。100多项临床试验在1998年至2017年宣布失败，导致研发失败的原因很多，著名神经学医生Yan-JiangWang也在其发表在NatureReviewsNeurology上的文章中提出AD病理发生涉及多种机制，对AD发病机制复杂性的忽视，采用单分子或单通路的靶向治疗是大多数靶向Aβ临床试验失败的原因。多策略、多效应联用，从而减少Aβ低聚物和纤维的形成以及清除可能是一种新的治疗AD的策略。研究表明与Aβ的过度产生相比，Aβ的清除受损是迟发性AD的标志。通过蛋白酶水解降解，转运至外周，通过小胶质细胞，星形胶质细胞和神经元通过受体介导的转运或受体介导的细胞清除是Aβ的清除的主要途径。载脂蛋白E(apoE)是胆固醇的主要转运蛋白，在中枢神经系统中起着多种作用。它与Aβ形成的复合物通过与外周细胞以及小胶质细胞表面LDL家族受体(包括LDL受体相关蛋白1(LPR1)，LDL受体(LDLR)和VLDL受体(VLDLR))来影响Aβ的清除。受体与单独的Aβ或与apoE复合的Aβ结合，递送至溶酶体或通过转胞吞作用透BBB进入血浆。然而LOAD中的神经病理学检查表明，APOEε4等位基因剂量与脑内Aβ，Aβ寡聚体和斑块积聚增加有关。实验表明，游离的ApoE能够促进Aβ寡聚体的形成以及斑块的沉积。由此可见，ApoE与生物体中的Aβ息息相关。
技术实现思路
本专利技术模拟ApoE设计了一种多肽，通过将Aβ同源肽与ApoE同源模拟肽连接，使其具备ApoE促进Aβ被小胶质细胞清除的优点同时又避免其促进Aβ寡聚体的形成并抑制Aβ聚集的特点，可有效降低Aβ寡聚体的含量。本专利技术具体技术方案如下：本专利技术提供一种功能多肽，包括多肽片段Ⅰ：识别及阻断淀粉样蛋白Aβ聚集的多肽片段和多肽片段Ⅱ：apoE受体结合区域的模拟肽，所述多肽Ⅰ与多肽Ⅱ通过连接肽或直接连接。优选地，所述多肽片段Ⅱ为apoE的氨基酸序列的第130位到150位的受体结合区域的模拟肽。优选地，所述多肽片段Ⅰ和/或多肽片段Ⅱ中的一个或几个氨基酸残基的可以被取代和/或缺失和/或添加，具有相同或相似的生物学功能。优选地，多肽片段Ⅰ的氨基酸序列如SEQIDNO：1～5所示，多肽片段Ⅱ的氨基酸序列如SEQIDNO：6-10所示。具体信息如下：SEQIDNO:1:Lys-Leu-Val-Phe-Phe(KLVFF)(Lowe,T.L.；Strzelec,A.；Kiessling,L.L.；Murphy,R.M.Structure-FunctionRelationshipsforInhibitorsofβ-AmyloidToxicityContainingtheRecognitionSequenceKLVFF.Biochemistry2001,40,7882-7889.)。SEQIDNO:2：Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala(KLVFFA)(Chalifour,R.J.；McLaughlin,R.W.；Lavoie,L.；Morissette,C.；Tremblay,N.；Boulé,M.；Sarazin,P.；Stéa,D.；Lacombe,D.；Tremblay,P.；Gervais,F.StereoselectiveInteractionsofPeptideInhibitorswiththeβ-AmyloidPeptide.J.Biol.Chem.2003,278,34874-34881.)SEQIDNO:3:Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Lys(KLVFFK)(Pallitto,M.M.；Ghanta,J.；Heinzelman,P.；Kiessling,L.L.；Murphy,R.M.RecognitionSequenceDesignforPeptidylModulatorsofβ-AmyloidAggregationandToxicity.Biochemistry1999,38,3570-3578.)。SEQIDNO:4:Arg-Gly-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Gly-Arg(RGKLVFFGR)(Austen,B.M.；Paleologou,K.E.；Ali,S.A.E.；Qureshi,M.M.；Allsop,D.；El-Agnaf,O.M.A.DesigningPeptideInhibitorsforOligomerizationandToxicityofAlzheimer’sβ-AmyloidPeptide.Biochemistry2008,47,1984-1992)SEQIDNO:5:Lys-Leu-Val-Phe-Ala(KLVFA)(TjernbergLO,NaslundJ,LindqvistF,etal.Arrestof-AmyloidFibrilFormationbyaPentapeptideLigand[J].JournalofBiologicalChemistry,1996,271(15):8545-8548.)SEQIDNO:6:Ala-Ser-His-Leu-Arg-Lys-Leu-Arg-Lys-Arg-Leu-Leu(ASHLRKLRKRLL)(LaskowitzDT,FillitH,YeungN,etal.ApolipoproteinE-derivedpeptidesreduceCNSinflammation:implicationsfortherapyofneurologicaldisease[J].ActaNeurologicaScandinavica,2010,114(s185):15-20.)SEQIDNO:7:Leu-Arg-Val-Arg--Leu-Ala-Ser-His-本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种功能多肽，其特征在于包括多肽片段Ⅰ：识别及阻断淀粉样蛋白Aβ聚集的多肽片段和多肽片段Ⅱ：apoE受体结合区域的模拟肽，所述多肽Ⅰ与多肽Ⅱ通过连接肽或直接连接。

【技术特征摘要】
1.一种功能多肽，其特征在于包括多肽片段Ⅰ：识别及阻断淀粉样蛋白Aβ聚集的多肽片段和多肽片段Ⅱ：apoE受体结合区域的模拟肽，所述多肽Ⅰ与多肽Ⅱ通过连接肽或直接连接。2.根据权利要求1所述的功能多肽，其特征在于所述多肽Ⅱ为apoE的氨基酸序列的第130位到150位的受体结合区域的模拟肽。3.根据权利要求1所述的功能多肽，其特征在于所述多肽片段Ⅰ和/或多肽片段Ⅱ中的一个或几个氨基酸残基可以被取代和/或缺失和/或添加，具有相同或相似的生物学功能。4.根据权利要求1所述的功能多肽，其特征在于所述多肽片段Ⅰ的氨基酸序列如SEQIDNO：1-5所示，所述多肽片段Ⅱ的氨基酸序列如SEQI...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖衍宇，陈志鹏，张珊珊，叶俊秀，林玲，胡子怡，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32