一种建立蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法技术

本发明专利技术公开了一种建立蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法。本发明专利技术保护一种制备蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法，包括如下步骤：将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物，得到蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型。本发明专利技术还保护一种制备蓖麻毒素致毒动物模型的方法，包括如下步骤：将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物，得到蓖麻毒素致毒动物模型。本发明专利技术提供的动物模型的制备方法，给予蓖麻毒素的量可以精确定量、操作简单、模型复制重复性好。本发明专利技术提供的动物模型可为后期经肺感染蓖麻毒素动物模型，为感染后药物干预与治疗奠定基础。

A Method for Establishing Animal Model of Acute Lung Injury Induced by Ricin

The invention discloses a method for establishing an animal model of acute lung injury caused by ricin. The invention protects an animal model of acute lung injury caused by ricin, including the following steps: delivering the solution of ricin to the experimental animal through liquid aerosol lung, and obtaining an animal model of acute lung injury caused by ricin. The invention also protects a method for preparing animal models of ricin poisoning, including the following steps: delivering the solution of ricin to experimental animals through liquid aerosol lung, and obtaining animal models of ricin poisoning. The preparation method of the animal model provided by the invention has the advantages of accurate quantification, simple operation and good replication repeatability of the model. The animal model provided by the invention can be used as an animal model of ricin infection through lung in later period, and lay a foundation for drug intervention and treatment after infection.

【技术实现步骤摘要】
一种建立蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法
本专利技术涉及一种建立蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法，具体涉及一种通过液体气溶胶肺递送蓖麻毒素溶液制备蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法。
技术介绍
蓖麻毒素属于蛋白质毒素中的一种(具有两条肽链的高毒性的植物蛋白)，是蓖麻油提取过程中的副产物。全球每年生产和加工至少1亿公吨蓖麻籽以制备蓖麻油。除了用于蓖麻油生产的种植外，蓖麻植物在世界气候变暖的同时也像杂草一样生长，分布区域包括非洲、中东、印度和法国南部。从蓖麻籽中可以比较容易地生产出剧毒的蓖麻毒素，作为致II型核糖体失活家族的成员之一，蓖麻毒素是迄今已知的毒性最强的植物源毒素之一，经肺感染机体后可导致肺水肿、急性肺损伤、类急性呼吸窘迫综合征等，最终导致死亡，且目前无有效治疗药物。蓖麻毒素符合生物战剂的标准，在国外已成为某些极端主义者的工具，其可能被用作恐怖分子武器并且易于通过气溶胶形式在人群扩散，目前被美国国立卫生研究院(NIAID)列为生物防御战略计划研究的B类优先病原体。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种建立蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法。本专利技术保护一种制备蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法，包括如下步骤：将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物，得到蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型。所述试验动物为小鼠。所述试验动物为C57BL/6小鼠。所述蓖麻毒素溶液中，蓖麻毒素的浓度为1-4μg/mL。所述蓖麻毒素溶液单次递送给试验动物，递送剂量为每只试验动物50μL。所述制备蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法还包括如下步骤：检测肺灌洗上清液中多种细胞因子浓度，如果肺灌洗上清液中所述多种细胞因子的浓度均显著高于参比，说明动物模型建立成功。所述多种细胞因子具体可为11种细胞因子。所述11种细胞因子为GM-CSF、GRO-α、IL-6、IL-18、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2和TNF-α。所述多种细胞因子具体可为18种细胞因子。所述18种细胞因子为IFN-γ、IL-13、IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α、GM-CSF、IL-18、IL-22、GRO-α、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2、RANTES和Eotaxin。所述检测肺灌洗上清液中多种细胞因子浓度，是在将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物的24小时后进行的。所述制备蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法还包括如下步骤：检测血清中2种细胞因子浓度，如果血清中所述2种细胞因子浓度均显著高于参比，说明动物模型建立成功。所述检测血清中2种细胞因子浓度，是在将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物的24小时后进行的。参比可为给予PBS缓冲液的试验动物。参比可为给予生理盐水的试验动物。所述制备蓖麻毒素引起的急性肺损伤动物模型的方法还包括如下步骤：检测肺是否发生肺水肿和中性粒细胞浸润，如果肺发生肺水肿和中性粒细胞浸润，说明动物模型建立成功。本专利技术还保护一种制备蓖麻毒素致毒动物模型的方法，包括如下步骤：将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物，得到蓖麻毒素致毒动物模型。所述试验动物为小鼠。所述试验动物为C57BL/6小鼠。所述蓖麻毒素溶液中，蓖麻毒素的浓度为1-4μg/mL。所述蓖麻毒素溶液单次递送给试验动物，递送剂量为每只试验动物50μL。所述制备蓖麻毒素致毒动物模型的方法还包括如下步骤：检测肺灌洗上清液中多种细胞因子浓度，如果肺灌洗上清液中所述多种细胞因子的浓度均显著高于参比，说明动物模型建立成功。所述多种细胞因子具体可为11种细胞因子。所述11种细胞因子为GM-CSF、GRO-α、IL-6、IL-18、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2和TNF-α。所述多种细胞因子具体可为18种细胞因子。所述18种细胞因子为IFN-γ、IL-13、IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α、GM-CSF、IL-18、IL-22、GRO-α、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2、RANTES和Eotaxin。所述检测肺灌洗上清液中多种细胞因子浓度，是在将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物的24小时后进行的。所述制备蓖麻毒素致毒动物模型的方法还包括如下步骤：检测血清中2种细胞因子浓度，如果血清中所述2种细胞因子浓度均显著高于参比，说明动物模型建立成功。所述检测血清中2种细胞因子浓度，是在将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物的24小时后进行的。参比可为给予PBS缓冲液的试验动物。参比可为给予生理盐水的试验动物。所述制备蓖麻毒素致毒动物模型的方法还包括如下步骤：检测肺是否发生肺水肿和中性粒细胞浸润，如果肺发生肺水肿和中性粒细胞浸润，说明动物模型建立成功。以上任一所述液体气溶胶肺递送采用手持式液体气溶胶肺递送装置。所述手持式液体气溶胶肺递送装置具体可为北京慧荣和科技有限公司的肺部液体定量雾化器。本专利技术还保护多种细胞因子作为蓖麻毒素引起的急性肺损伤的标志物的应用。所述多种细胞因子具体可为11种细胞因子。所述11种细胞因子为GM-CSF、GRO-α、IL-6、IL-18、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2和TNF-α。所述多种细胞因子具体还可为18种细胞因子。所述18种细胞因子为IFN-γ、IL-13、IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α、GM-CSF、IL-18、IL-22、GRO-α、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2、RANTES和Eotaxin。如果生物个体的肺灌洗上清液中所述多种细胞因子的浓度均显著高于参比，说明该生物个体发生了蓖麻毒素引起的急性肺损伤。参比可为正常生物个体。参比可为给予PBS缓冲液的生物个体。参比可为给予生理盐水的生物个体。所述生物个体为哺乳动物或人。所述哺乳动物具体可为小鼠。实际应用中，可结合如下标准判断：检测肺是否发生肺水肿和中性粒细胞浸润，如果肺发生肺水肿和中性粒细胞浸润，说明生物个体发生了蓖麻毒素引起的急性肺损伤。本专利技术还保护用于检测肺灌洗上清液中多种细胞因子浓度的物质在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的功能为检测蓖麻毒素引起的急性肺损伤。所述多种细胞因子具体可为11种细胞因子。所述11种细胞因子为GM-CSF、GRO-α、IL-6、IL-18、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2和TNF-α。所述多种细胞因子具体还可为18种细胞因子。所述18种细胞因子为IFN-γ、IL-13、IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α、GM-CSF、IL-18、IL-22、GRO-α、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2、RANTES和Eotaxin。如果生物个体的肺灌洗上清液中所述多种细胞因子的浓度均显著高于参比，说明该生物个体发生了蓖麻毒素引起的急性肺损伤。参比可为正常生物个体。参比可为给予PBS缓冲液的生物个体。参比可为给予生理盐水的生物个体。所述生物个体为哺乳动物或本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种制备蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法，包括如下步骤：将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物，得到蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型。

【技术特征摘要】
1.一种制备蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型的方法，包括如下步骤：将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物，得到蓖麻毒素引起急性肺损伤的动物模型。2.一种制备蓖麻毒素致毒动物模型的方法，包括如下步骤：将蓖麻毒素溶液通过液体气溶胶肺递送给试验动物，得到蓖麻毒素致毒动物模型。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述试验动物为小鼠。4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述试验动物为C57BL/6小鼠。5.如权利要求1至4中任一所述的方法：其特征在于：所述蓖麻毒素溶液中，蓖麻毒素的浓度为1-4μg/mL。6.如权利要求1至5中任一所述的方法：其特征在于：所述蓖麻毒素溶液单次递送给试验动物，递送剂量为每只试验动物50μL。7.多种细胞因子作为蓖麻毒素引起的急性肺损伤的标志物的应用；所述多种细胞因子为11种细胞因子或18种细胞因子；所述11种细胞因子为GM-CSF、GRO-α、IL-6、IL-18、IP-10、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2和TNF-α；所述18种细胞因子为IFN-γ、IL-13、IL-1β、IL-4、IL-6、T...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨慧盈，焦周光，周冬生，孙岩松，法云智，高波，邱业峰，干长娇，郝淮杰，杨文慧，胡凌飞，赵月娥，于学东，熊小路，焦俊，殷喆，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：北京,11