一种检测炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的高效液相方法组成比例

本发明专利技术提供了一种可适用于整体控制炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒质量的高效液相特征图谱检测方法。本发明专利技术的HPLC特征图谱检测方法，能整体控制炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒中的特征成分，确保炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒整体质量的稳定，且方法操作简单，精密度高，稳定性好，重复性好，准确度高。

A High Performance Liquid Chromatography Method for Detecting Characteristic Atlas of Fried Wang Buliuxing Decoction Pieces, Standard Decoction and Formula Granules

The invention provides a high performance liquid chromatographic method for overall control of the quality of fried Wangbuliuxin Decoction pieces, standard decoction and formula granules. The method for detecting the characteristic Atlas of the high performance liquid chromatography can control the characteristic components in fried Wangbuliuxin Decoction pieces, standard decoction and formula granules as a whole, and ensure the stability of the overall quality of fried Wangbuliuxin Decoction pieces, standard decoction and formula granules. The method has the advantages of simple operation, high precision, good stability, good repeatability and high accuracy.

【技术实现步骤摘要】
一种检测炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的高效液相方法
本专利技术具体涉及一种炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的HPLC检测方法。
技术介绍
王不留行始载于《神农本草经》，为妇科及外科主药，临床应用较广，有活血通经，下乳消肿，利尿通淋之功，主治经闭，痛经，乳汁不下，乳痈肿痛，淋症涩痛，疗效显著。但由于种子药质地坚硬，难于煎出有效成分，故常用其炮制品。历代对王不留行的炮制方法主要有清蒸、酒蒸、清炒、炒炭、酒炒等，现清炒法使用较多。炒王不留行是王不留行的主要炮制品，相对于其生品，有效成分更易煎出，走散力更强，长于活血通经、下乳和通淋。目前，《中国药典》2015年版一部炒王不留行项下仅收载采用高效液相色谱法测定王不留行黄酮苷单一成分含量的方法，尚未进行其特征图谱控制。其他有部分文献研究报道建立了炒王不留行饮片及其炮制前后的成分及含量变化，如周国洪.炒王不留行化学成分及炮制对其影响研究[D].中国中医科学院,2016,5；陈琳,胡昌江,冯建,等.炒王不留行配方颗粒高效液相指纹图谱研究[J].亚太传统医药,2013,9(4):16-18；黄懿,欧阳波,肖作奇,等.不同产地炒王不留行HPLC指纹图谱及含量测定研究[J].中南药学,2017(7):879-882.然而，上述报道仅针对炒王不留行饮片炮制前后及炒王不留行配方颗粒建立的指纹图谱研究，未见其标准汤剂的报道。因此，现有的检测方法难以有效对比和分析炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的差异与变化，难以深入认识炒王不留行药效物质基础在从原料到配方颗粒成品的工艺过程的传递情况，难以整体评价和控制从炒王不留行饮片到配方颗粒成品的工艺过程。因此，建立统一的炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱测定方法，有利于整体评价炒王不留行相关工艺过程的科学性、合理性，更能整体控制炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的内在质量，确保炒王不留行的临床疗效。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种适用于炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱测定的HPLC检测方法。本专利技术的整体控制炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的高效液相特征图谱检测方法，包括如下操作步骤：1)对照品溶液制备：取对照品，溶解，即得对照品溶液；2)对照饮片溶液制备：取炒王不留行对照饮片，经提取，即得对照药材溶液；3)供试品溶液制备：取炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒，经提取，即得供试品溶液；3)分别吸取对照品溶液、对照饮片溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：240～270nm；流动相：乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱程序如下：其中，步骤1)所述对照品包括：5-羟甲基糠醛、王不留行黄酮苷、原儿茶酸、刺桐碱、肥皂草苷、王不留行环肽A、王不留行环肽B、异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷八种对照品。其中，步骤1)所述溶解是加入甲醇或70％甲醇溶液溶解。其中，步骤2)所述提取是指：加入70％甲醇溶液，超声提取。其中，步骤3)所述提取是指：加入70％甲醇溶液，超声提取。优选地，所述提取方法如下：取炒王不留行饮片，加入10倍70％甲醇，或取炒王不留行标准汤剂粉末，加入100倍70％甲醇，或取炒王不留行配方颗粒研细后粉末，加入50倍70％甲醇；超声提取30分钟，放冷，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得炒王不留行饮片、标准汤剂或配方颗粒的供试品溶液；所述超声提取的功率为600W、频率为40kHz。其中，所用色谱柱为ZORBAXSB-AqC18色谱柱，规格均为4.6mm×250mm，5μm。其中，所述检测波长为270nm。其中，所述色谱条件还包括：流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL。本专利技术的炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒高效液相特征图谱的检测方法，能整体控制炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒中的特征成分，确保炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒整体质量的稳定，且方法操作简单，精密度高，稳定性好，重复性好，准确度高。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。附图说明图1炒王不留行饮片对照图谱，峰2：5-羟甲基糠醛；峰4：原儿茶酸；峰5：刺桐碱；峰6(S)：王不留行黄酮苷；峰7：肥皂草苷；峰9：异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷；峰12：王不留行环肽B；峰13：王不留行环肽A。图2炒王不留行标准汤剂对照图谱，峰2：5-羟甲基糠醛；峰4：原儿茶酸；峰5：刺桐碱；峰6(S)：王不留行黄酮苷；峰7：肥皂草苷；峰9：异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷；峰12：王不留行环肽B；峰13：王不留行环肽A。图3炒王不留行配方颗粒对照图谱，峰2：5-羟甲基糠醛；峰4：原儿茶酸；峰5：刺桐碱；峰6(S)：王不留行黄酮苷；峰7：肥皂草苷；峰9：异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷；峰12：王不留行环肽B；峰13：王不留行环肽A。图4饮片、标准汤剂、配方颗粒对照特征图谱叠加图，峰2：5-羟甲基糠醛；峰4：原儿茶酸；峰5：刺桐碱；峰6(S)：王不留行黄酮苷；峰7：肥皂草苷；峰9：异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷；峰12：王不留行环肽B；峰13：王不留行环肽A。具体实施方式仪器与试药1仪器高效液相色谱仪：安捷伦1260型高效液相色谱仪、waterse2695型高效液相色谱仪、岛津30AD型高效液相色谱仪；电子天平：ME204E/02、MS205DU、XP26(梅特勒-托利多仪器有限公司)；超纯水机：细胞型1810A(上海摩勒科学仪器有限公司)；超声波清洗器：KQ-600DB型(600W，40KHz；昆山市超声仪器有限公司)；色谱柱：ZORBAXEclipseXDB-C18Analytical4.6×250mm5-Micron、Diamonsil5μmC18(2)250×4.6mm、Shim-packGIST5μmC184.6×250mm。2试药乙腈、磷酸为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。5-羟甲基糠醛(成都普菲生物技术有限公司，批号：17011104)；王不留行黄酮苷(中国食品药品检定研究院，批号：111853-201704，含量以96.9％计)；原儿茶酸(中国食品药品检定研究院，批号：110809-201205，含量以99.9％计)；刺桐碱(四川省维克奇生物科技有限公司，批号：wkq18012302，含量≥98％)；肥皂草苷(四川省维克奇生物科技有限公司，批号：wkq18011711)；王不留行环肽A(成都曼斯特生物科技有限公司，批号：MUST-18033102，含量以99.24％计)；王不留行环肽B(成都曼斯特生物科技有限公司，批号：MUST-18051007，含量以99.6％计)；异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷(四川省维克奇生物科技有限公司，批号：wkq18010308，含量≥98％)；炒王不留行对照饮片(四川新绿色药业科技发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC特征图谱的检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：1)对照品溶液制备：取对照品，溶解，即得对照品溶液；2)对照饮片溶液制备：取炒王不留行对照饮片，经提取，即得对照饮片溶液；3)供试品溶液制备：取炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒，经提取，即得供试品溶液；4)分别吸取对照品溶液、对照饮片溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：240‑270nm；流动相：乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱程序如下：

【技术特征摘要】
1.一种炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC特征图谱的检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：1)对照品溶液制备：取对照品，溶解，即得对照品溶液；2)对照饮片溶液制备：取炒王不留行对照饮片，经提取，即得对照饮片溶液；3)供试品溶液制备：取炒王不留行饮片、标准汤剂、配方颗粒，经提取，即得供试品溶液；4)分别吸取对照品溶液、对照饮片溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：240-270nm；流动相：乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱程序如下：2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述对照品包括：5-羟甲基糠醛、王不留行黄酮苷、原儿茶酸、刺桐碱、肥皂草苷、王不留行环肽A、王不留行环肽B、异牡荆素-2”-O-阿拉伯糖苷八种对照品。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤1)所述溶解是加入甲醇或70％甲醇溶液溶解。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤3)所述提取是指：加入70％甲醇溶液，超声...

【专利技术属性】
技术研发人员：周厚成，胡昌江，钟磊，仰莲，李文兵，冯健，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51