用于调节LAIR信号转导的组合物和方法技术

提供了用于调节LAIR‑1的组合物以及其使用方法。例如，提供了降低LAIR‑1表达、配体结合、交联、负性信号传导或它们的组合的免疫调节剂。此类剂可用于增加有需要的受试者的免疫应答。示例性剂包括(i)可溶性LAIR‑2多肽或融合蛋白，(ii)可溶性LAIR 1多肽或融合蛋白，(iii)功能阻断性抗LAIR‑1抗体，(iv)消减LAIR‑1阳性细胞的抗体，以及(v)它们的组合。还提供了增加LAIR‑1表达、配体结合、交联、负性信号传导或它们的组合的免疫调节剂。此类剂可用于降低有需要的受试者的免疫应答。示例性剂包括：(i)功能活化性抗LAIR‑1抗体，(ii)功能阻断性抗LAIR‑2抗体，以及(iii)它们的组合。

Compositions and Methods for Regulating LAIR Signal Transduction

Compositions for regulating LAIR 1 and their use methods are provided. For example, immunomodulators that reduce LAIR_1 expression, ligand binding, cross-linking, negative signal transduction or their combination are provided. These agents can be used to increase the immune response of subjects in need. Examples include (i) soluble LAIR 2 polypeptide or fusion protein, (ii) soluble LAIR 1 polypeptide or fusion protein, (iii) functional blocking anti-LAIR 1 antibody, (i v) subtracting anti-LAIR 1 positive cell antibody, and (v) their combination. Immunomodulators that increase LAIR_1 expression, ligand binding, cross-linking, negative signal transduction or their combination are also provided. These agents can be used to reduce the immune response of subjects in need. Examples include: (i) functional activating anti-LAIR_1 antibody, (ii) functional blocking anti-LAIR_2 antibody, and (iii) their combination.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节LAIR信号转导的组合物和方法相关申请的交叉引用本申请要求2016年8月3日提交的美国临时专利申请号62/370,334和2017年1月25日提交的美国临时专利申请号62/450,300的权益和优先权，所述专利申请两者均以引用的方式整体并入。对序列表的引用以名称为“LAIR1ST25.txt”的文本文件于2017年8月3日提交的序列表(于2017年8月3日创建并且具有136千字节大小)依据美国法典第37篇第1.52条(e)款(5)特此以引用的方式并入。
本专利技术总体上涉及免疫调节领域，并且更特别地涉及用于调节LAIR-1信号传导以增加或降低免疫应答和用于通过直接调控白血病细胞存活和自我更新来治疗白血病的组合物和方法。专利技术背景白细胞相关的免疫球蛋白样受体-1(LAIR-1)是一种抑制性细胞表面受体，其在许多免疫细胞上表达并且通过两个细胞质基于免疫受体酪氨酸的抑制性基序(ITIM)结构域发挥抑制信号传导(Verbrugge等人,2006,J.Leukoc.Biol.79:828-836)。LAIR-1通过多种胶原、补体组分C1q和表面活性蛋白D(SP-D)交联以诱导抑制免疫细胞成熟、增殖和脱粒的负性信号传导(Lebbink等人,2009,MatrixBiol.28:202-210；Meyaard.,2008,J.Leukoc.Biol.83:799-803)。人(而不是小鼠)基因组编码可溶性LAIR-2蛋白(Sun等人,2014,Gene552:140-145)。LAIR-2蛋白与LAIR-1结合相同的配体，并且因此可充当诱饵以减少通过LAIR-1的抑制信号。LAIR-1抑制性信号传导可预防自身免疫性疾病，如红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性甲状腺疾病和动脉粥样硬化以及接触性超敏反应(Sun等人,2014,Gene552:140-145)。慢性淋巴细胞性白血病细胞上LAIR-1的表达降低与疾病增加相关(Poggi等人,2008,Leukemia22:980-988；Perbellini等人,2014,Haematolagica99:881-887)。LAIR-1还已显示在上皮性卵巢癌细胞和其他人肿瘤上表达，但是在实体瘤上表达的LAIR-1的功能仍不清楚(Meyaard等人,1997,Immunity7:283-290；Cao等人,2015,Biochem.Biophys.Res.Commun.458:399-404)。急性骨髓性白血病(AML)细胞和潜在地急性成淋巴细胞性白血病(ALL)细胞上的LAIR-1表达已被证明是它们通过磷酸酶独立性LAIR-1-SHP-1-CAMK1-CREB信号传导途径的生长所必需的，所述信号传导途径抑制白血病干细胞的细胞凋亡和分化以保留这些细胞的自我更新能力或“干性质(stemness)”(Kang等人,2015,Nat.CellBiol.17:665-677)。总之，关于LAIR-1的累积数据表明免疫稳态中的重要作用，然而，仍然需要调节LAIR-1以用于治疗疾病和病症的组合物和方法。因此，本专利技术的目的是提供增加LAIR-1负性信号传导的组合物以及所述组合物用于治疗炎性疾病和病症以及自身免疫性疾病的使用方法。本专利技术的另一个目的是提供减少LAIR-1负性信号传导的组合物以及所述组合物用于治疗癌症和感染性疾病的使用方法。
技术实现思路
提供了用于调节LAIR-1的组合物以及其使用方法。例如，提供了降低LAIR-1表达、配体结合、交联、信号转导或它们的组合的免疫调节剂。LAIR-1可由例如骨髓细胞、T细胞、自然杀伤(NK)细胞或它们的组合表达。骨髓细胞可以是抗原呈递细胞，例如单核细胞、巨噬细胞或树突细胞。在一些实施方案中，所述组合物特异性地靶向前述细胞类型中的一种或多种。所公开的剂可用于增加有需要的受试者的免疫应答。免疫应答可以是，例如，对抗原的初次免疫应答或效应细胞功能的增加，如增加T细胞的抗原特异性增殖、促进T细胞产生细胞因子、刺激分化或它们的组合。示例性剂包括(i)可溶性LAIR-2多肽或融合蛋白，(ii)可溶性LAIR-1多肽或融合蛋白，(iii)功能阻断性抗LAIR-1抗体，(iv)可用于消减LAIR-1阳性细胞的抗体，以及(v)它们的组合。在一些实施方案中，所述免疫调节剂是LAIR-1的拮抗剂。在特定实施方案中，所述剂是LAIR-2融合蛋白，例如包含与免疫球蛋白结构域连接的LAIR-2或其功能变体的细胞外结构域的融合蛋白。示例性融合蛋白包含SEQIDNO:16的氨基酸序列。在其他实施方案中，所述剂是LAIR-2蛋白或其功能片段或变体。例如，所述LAIR-2蛋白或其功能片段或变体可与SEQIDNO:6具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性。所述剂可以是LAIR-1融合蛋白，例如包含与免疫球蛋白结构域连接的LAIR-1或其功能变体的细胞外结构域的融合蛋白。示例性LAIR-1融合蛋白包含SEQIDNO:9的氨基酸序列。在其他实施方案中，所述剂是可溶性LAIR-1蛋白或其功能片段或变体。例如，所述可溶性LAIR-1蛋白可由LAIR-1或其功能片段或变体的细胞外结构域组成。示例性可溶性蛋白质与SEQIDNO:2具有至少80％、90％、95％或100％序列同一性。增加受试者的免疫应答的方法通常包括向有需要的受试者施用有效量的降低LAIR-1表达、配体结合、交联、信号转导或它们的组合的免疫调节剂。所述受试者可患有例如癌症或感染性疾病。在一些实施方案中，所述受试者、所述癌症或所述疾病的特征在于LAIR-1的表达增加、LAIR-1配体的表达增加、LAIR-2的表达降低或它们的组合。在特定实施方案中，所述癌症是卵巢癌、肺癌、胃肠癌、急性骨髓性白血病(AML)或急性淋巴性白血病(ALL)。所述剂可作为单一组合物与疫苗或其组分一起同时或组合施用。还提供了增加LAIR-1表达、配体结合、交联、负性信号传导或它们的组合的免疫调节剂。此类剂可用于降低有需要的受试者的免疫应答。示例性剂包括：(i)功能活化性抗LAIR-1抗体，(ii)功能阻断性抗LAIR-2抗体，和(iii)它们的组合。一个实施方案提供了一种抗LAIR抗体，所述抗LAIR抗体由选自由以下组成的组的杂交瘤产生：1E11、1G7、4B3、5A6、5E1、6B2、6F4、6G6、7G3、9H6、11B3、12E10a以及12E10b。另一个实施方案提供了一种抗LAIR抗体，所述抗LAIR抗体具有由选自由以下组成的组的杂交瘤中的一者或多者产生的抗体的至少一条轻链或至少一条重链：1E11、1G7、4B3、5A6、5E1、6B2、6F4、6G6、7G3、9H6、11B3、12E10a和12E10b。另一个实施方案提供了一种抗LAIR抗体，所述抗LAIR抗体具有可变轻链，所述可变轻链与具有根据SEQIDNO:19、27、35、43、51、59、67、75、83、91、99、107或115的氨基酸序列的可变轻链具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性。另一个实施方案提供了一种抗LAIR抗体，所述抗LAIR抗体具有可变重链，所述可变重链与具有根据本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种药物组合物，其包含有效量的选自由以下组成的组的降低LAIR‑1表达、配体结合、交联、负性信号传导或它们的组合的免疫调节剂：(i)可溶性LAIR‑2多肽或融合蛋白，(ii)可溶性LAIR‑1多肽或融合蛋白，(iii)增加免疫应答的LAIR‑1mAb。(iv)消减LAIR‑1阳性细胞的抗体，以及(iv)它们的组合；以增加有需要的受试者的免疫应答。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.03 US 62/370,334;2017.01.25 US 62/450,3001.一种药物组合物，其包含有效量的选自由以下组成的组的降低LAIR-1表达、配体结合、交联、负性信号传导或它们的组合的免疫调节剂：(i)可溶性LAIR-2多肽或融合蛋白，(ii)可溶性LAIR-1多肽或融合蛋白，(iii)增加免疫应答的LAIR-1mAb。(iv)消减LAIR-1阳性细胞的抗体，以及(iv)它们的组合；以增加有需要的受试者的免疫应答。2.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述免疫调节剂是LAIR-2融合蛋白。3.如权利要求2所述的药物组合物，其中所述LAIR-2融合蛋白包含与免疫球蛋白结构域连接的LAIR-2或其功能变体的细胞外结构域。4.如权利要求3所述的药物组合物，其中所述LAIR-2融合蛋白包含SEQIDNO:16的氨基酸序列。5.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述免疫调节剂是LAIR-1融合蛋白。6.如权利要求5所述的药物组合物，其中所述LAIR-1融合蛋白包含与免疫球蛋白结构域连接的LAIR-1或其功能变体的细胞外结构域。7.如权利要求6所述的药物组合物，其中所述LAIR-1融合蛋白包含SEQIDNO:9的氨基酸序列。8.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述免疫调节剂是LAIR-2蛋白或其功能片段或变体。9.如权利要求2所述的药物组合物，其中所述LAIR-2蛋白或其功能片段或变体包含与SEQIDNO:6的至少80％、90％、95％或100％序列同一性。10.如权利要求1所述的药物组合物，其中所述免疫调节剂是可溶性LAIR-1蛋白或其功能片段或变体。11.如权利要求10所述的药物组合物，其中所述LAIR-1蛋白由LAIR-1或其功能片段或变体的细胞外结构域组成。12.如权利要求10所述的药物组合物，其中所述LAIR-1蛋白或其功能片段或变体包含与SEQIDNO:2的至少80％、90％、95％或100％序列同一性。13.如权利要求1-12中任一项所述的药物组合物，其中所述免疫应答是对抗原的初次免疫应答或效应细胞功能的增加，如增加T细胞的抗原特异性增殖、促进T细胞产生细胞因子、刺激分化或它们的组合。14.一种增加有需要的受试者的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用如权利要求1-13中任一项所述的药物组合物。15.如权利要求14所述的方法，其中所述受试者患有癌症。16.如权利要求15所述的方法，其中所述癌症的特征在于LAIR-1的表达增加、LAIR-1配体的表达增加、LAIR-2的表达降低或它们的组合。17.如权利要求14或15所述的方法，其中所述癌症是卵巢癌、肺癌或胃肠癌。18.如权利要求14所述的方法，其中所述受试者患有感染性疾病。19.如权利要求14-18中任一项所述的方法，其中向所述受试者同时施用所述药物组合物与疫苗或其组分。20.如权利要求14-19中任一项所述的方法，其还包括向所述受试者施用第二治疗剂。21.一种药物组合物，其包含有效量的选自由以下组成的组的增加LAIR-1表达、配体结合、交联、负性信号传导或它们的组合的免疫调节剂：(i)功能活化性抗LAIR-1抗体，(ii)功能阻断性抗LAIR-2抗体，以及(iii)它们的组合；以降低有需要的受试者的免疫应答。22.如权利要求21所述的药物组合物，其中所述免疫应答是对抗原的初次免疫应答或效应细胞功能的增加，如增加T细胞的抗原特异性增殖、促进T细胞产生细胞因子、刺激分化或它们的组合。23.一种降低有需要的受试者的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用如权利要求21或22所述的药物组合物。24.如权利要求23所述的方法，其中所述受试者患有炎症。25.如权利要求23所述的方法，其中所述受试者患有自身免疫性病症。26.如权利要求25所述的方法，其中所述自身免疫性病症是类风湿性关节炎。27.如权利要求21-26中任一项所述的方法，其中所述受试者或疾病或疾患的特征在于LAIR-1的表达降低、LAIR-1配体的表达降低、LAIR-2的表达增加或它们的组合。28.如权利要求21-27中任一项所述的方法，其还包括向所述受试者施用第二治疗剂。29.如前述权利要求中任一项所述的组合物或方法，其中所述LAIR-1在骨髓细胞、T细胞、自然杀伤(NK)细胞或它们的组合上表达。30.如权利要求29所述的组合物或方法，其中所述骨髓细胞是抗原呈递细胞。31.如权利要求30所述的组合物或方法，其中所述抗原呈递细胞是单核细胞、巨噬细胞或树突细胞。32.一种用于治疗有需要的受试者的白血病的方法，所述方法包括：向所述受试者施用有效量的包含LAIR-1单克隆抗体、可溶性LAIR-1多肽、可溶性LAIR-2多肽、LAIR-1融合蛋白、LAIR-2融合蛋白或它们的组合的药物组合物，以抑制或减少白血病细胞中的LAIR-1信号转导来由此抑制白血病细胞存活或促进对所述白血病细胞的抗肿瘤免疫应答。33.如权利要求32所述的方法，其中所述白血病是急性骨髓性白血病。34.一种抗LAIR抗体，其由选自由以下组成的组的杂交瘤产生：1E11、1G7、4B3、5A6、5E1、6B2、6F4、6G6、7G3、9H6、11B3、12E10a以及12E10b。35.一种抗LAIR抗体，其包含如权利要求34所述的抗体的至少一条轻链或至少一条重链。36.一种抗LAIR抗体，其包含可变轻链，所述可变轻链与具有选自由以下组成的可变轻链的组的氨基酸序列的可变轻链具有至少95％序列同一性：SEQIDNO19、27、35、43、51、59、67、75、83、91、99、107以及115。37.一种抗LAIR抗体，其包含可变重链，所述可变重链与具有选自由以下组成的可变重链的组的氨基酸序列的可变重链具有至少95％序列同一性：SEQIDNO23、31、39、47、55、63、71、79、87、95、103以及111。38.一种抗LAIR抗体，其包含互补决定区(CDR)，所述互补决定区选自具有选自由以下组成的组的氨基酸序列的CDR的组：SEQIDNO:20-22、24-26、28-30、32-34、36-38、40-42、44-46、48-50、52-54、56-58、60-62、64-66、68-70、72-74、76-78、80-82、84-86、88-90、92-94、96-98、100-102、104-106、108-110、112-114以及116-118。39.一种抗LAIR抗体，其具有选自由以下组成的组的多个CDR：SEQIDNO:20-22、24-26、28-30、32-34、36-38、40-42、44-46、48-50、52-54、56-58、60-62、64-66、68-70、72-74、76-78、80-82、84-86、88-90、92-94、96-98、100-102、104-106、108-110、112-114以及116-118。40.如权利要求39所述的抗体，其中所述多个CDR是2-12个CDR。41.一种用于治疗癌症的方法，所述方法包括与抗PD-1抗体或其抗原结合片段组合或交替向有需要的受试者施用有效量的LAIR-2Fc。42.如权利要求40所述的方法，其中所述癌症是卵巢癌。43.一种用于降低有需要的受试者的肿瘤负荷的方法，所述方法包括与抗PD-1抗体或其抗原结合片段组合或交替向有需要的受试者施用有效量的LAIR-2Fc。44.如权利要求43所述的方法，其中所述肿瘤是卵巢肿瘤。45.如权利要求41或43中任一项所述的方法，其中所述癌症或肿瘤是淋巴瘤。46.一种用于促进有需要的受试者的原代T细胞扩增的方法，所述方法包括向宿主施用治疗有效量的LAIR-2Fc。47.一种特异性地结合至LAIR-1的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含轻链互补决定区，所述轻链互补决定区具有SEQIDNO.:20、SEQIDNO.:21和SEQIDNO.:22中列出的氨基酸序列；以及重链互补决定区，所述重链互补决定区具有SEQIDNO.:24、SEQIDNO.:25和SEQIDNO.:26中列出的氨基酸序列。48.一种特异性地结合至LAIR-1的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含轻链互补决定区，所述轻链...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·B·法尔斯，L·刘，S·朗格曼，
申请(专利权)人：奈斯科尔公司，
类型：发明
国别省市：美国,US