15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在抗纤维化药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，公开了15‑苄亚基‑14‑脱氧‑11,12‑脱氢穿心莲内酯衍生物在制备预防和治疗人体器官或组织纤维化药物中的应用。经实验证明，该类化合物显著抑制TGF‑β1诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549间充质转化；显著抑制TGF‑β1诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞HK‑2间充质转化；抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人原代心肌纤维化细胞HCFB增殖。显著降低博来霉素诱导的小鼠肺纤维化程度，显著降低单侧输尿管结扎诱导的大鼠肾纤维化程度和异丙肾上腺素ISO造成的昆明小鼠心肌纤维化程度。将该类化合物作为活性成份用于制备抗肾、肺、心脏等纤维化药物，高效低毒，为与纤维化相关疾病的治疗和预防提供了新的药物途径，从而扩大了临床用药的可选择范围，具有良好的应用开发前景。

Application of 15-Benzylidene-14-Deoxy-11,12-Dehydroandrographolide Derivatives in Antifibrotic Drugs

The invention belongs to the field of medical technology, and discloses the application of 15 benzylidene 14 deoxy 11,12 dehydroandrographolide derivatives in the preparation of drugs for preventing and Treating Fibrosis of human organs or tissues. These compounds have been shown to significantly inhibit the mesenchymal transformation of human alveolar type II epithelial cells A549 induced by TGF beta 1, HK 2 mesenchymal transformation of human proximal convoluted tubular epithelial cells induced by TGF beta 1, and HCFB proliferation induced by angiotensin II. The degree of pulmonary fibrosis in mice induced by bleomycin was significantly reduced, and the degree of renal fibrosis in rats induced by unilateral ureteral ligation and myocardial fibrosis in Kunming mice induced by isoprenaline ISO were significantly reduced. These compounds are used as active ingredients in the preparation of anti-fibrosis drugs such as kidney, lung and heart, with high efficiency and low toxicity, which provides a new drug approach for the treatment and prevention of fibrosis-related diseases, thus expanding the range of clinical medication options, and has a good prospect of application and development.

【技术实现步骤摘要】
15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在抗纤维化药物中的应用
本专利技术涉及穿心莲内酯衍生物作为抗人体器官或组织纤维化药物的应用，具体涉及14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯C15取代衍生物，属医药

技术介绍
组织纤维化是一种慢性疾病，多发于肝、肺、心脏、肾脏等部位。全球有1/3的人死于组织纤维化以及由此产生的器官衰竭。当组织受到损伤后，损伤部位发生一系列细胞反应，导致细胞外基质过度沉积，发生组织纤维化。最终可导致器官功能障碍，甚至死亡。心血管组织纤维化在高血压和心力衰竭引起的心血管组织重构中发挥了重要作用，同时也是引起动脉粥样硬化的主要原因。心肌纤维化的特征是细胞外基质蛋白在细胞间质中堆积，并引起心脏收缩和舒张功能障碍。心肌纤维化是失代偿性心肌肥厚和心力衰竭的重要标志，参与高血压、肥厚性心肌病、心力衰竭和心肌梗塞引起的心肌重构。近年来肺纤维化发病率和致死率呈不断上升趋势。肺纤维化是许多肺部疾病发展、演变、疤痕化的最终结局，其病因多种多样。许多慢性肺疾病，包括哮喘、支气管扩张、慢阻肺、肺结核、肺癌、间质性肺病等，都伴有纤维化病理改变。其主要病理特点包括肺组织间充质细胞增殖、细胞外基质增生沉积及肺实质的重构等。对于特发性肺纤维化、呼吸窘迫综合征、嗜酸性肉芽肿等多种肺疾病而言，肺组织纤维增生和纤维化程度决定了该疾病的临床愈后情况。这些疾病发展到晚期，严重妨碍病人正常工作和生活质量，甚至导致病人因呼吸衰竭或心力衰竭而死亡。在过去的20年间，特发性肺纤维化发病率总体呈现明显增长的趋势，诊断后平均存活时间约3年，5年生存率30％～50％，愈后极差。肾纤维化表现为细胞外基质和不适当结缔组织在肾聚集，导致肾结构改变和功能受损的病理过程，也是几乎所有肾脏疾病进展到终末期肾衰的共同通路。许多急慢性肾脏疾病也都与组织纤维化发生发展密切相关，特别是糖尿病肾病和高血压引起的肾纤维化改变。多种免疫和自身免疫疾病例如关节炎、全身硬化症和系统性红斑狼疮也有组织纤维化的改变。由于引起上述各种组织器官纤维增生性疾病的病因众多、发病机制复杂、病程迁延数年至几十年不等，目前组织纤维化的确切发病机制尚未完全阐明，也没有公认的、真正能够逆转组织纤维化的药物。目前对纤维化疾病的治疗药物非常少，大多仅起到辅助治疗作用。在肺纤维化方面糖皮质激素和免疫抑制药物等虽能改善肺纤维化的症状，延缓疾病发展，但具有强烈的副作用。美国FDA批准的药物只有由InterMune，Inc.公司研制生产的Esbriet(pirfenidone,吡非尼酮)和德国殷格翰公司研制生产的尼达尼布(Nintedanib)，但这两种药物目前患者获益并不理想。目前研究较多的与组织、器官纤维化发生发展相关的信号通路包括TGF-β1/Smad信号通路、Wnt/β-catenin信号通路、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路等。例如，黄柏内酯通过对小鼠纤维化肺组织中TGF-β信号通路的抑制，下调α-SMA和胶原蛋白的生成(专利号：CN105560255A)。甲蟛蟆菊内酯—硫酸酯可显著抑制TGF-β诱导的人胚肺成纤维细胞的增殖及其羟脯氨酸(HYP)含量从而发挥改善肺纤维化程度的药理作用(专利号：CN103919769A)。作用于TGF-β下游的PI3K抑制剂用于治疗肺纤维化疾病(专利号：CN104093408A)。还有利用土木香中的倍半菇一异土木香内酯类衍生物及其盐治疗肺纤维化(专利号：CN106496243A)的专利报道。在抗肾纤维化方面，灵芝内酯D可明显抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞Smad3磷酸化，对于肾脏纤维化具有治疗作用(专利号：CN106220643A)。中国人民解放军第三军医大学第三附属医院发现芹菜素通过TRPV4介导Ca2+的内流,激活AMPK/SITR1信号通路,抑制肾脏纤维化。穿心莲内酯是穿心莲Andrographispaniculata(Burm.f.)Nees中提取的二萜内酯类化合物，是中药穿心莲的主要有效成份之一。临床上主要用于治疗上呼吸道感染、细菌性痢疾等。近年来，穿心莲内酯在抗肿瘤、保肝利胆、抗病毒等方面的应用研究不断深入。黄成亮等发现穿心莲内酯可减轻博来霉素或者平阳霉素致肺纤维化大鼠肺泡炎和纤维化程度，降低肺组织PDGF表达和减少HYP含量；范贤明等研究发现穿心莲内酯可减轻博来霉素致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,降低肺组织I、III型胶原mRNA表达,降低支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α,TGF-β1浓度,且对肝、肾无明显毒副作用。孙景辉等研究发现穿心莲内酯注射液减轻病毒性心肌炎小鼠炎症和纤维化程度，机制可能是能抑制心肌中ST2的表达。聂梦琪等研究发现穿心莲内酯具有一定的抗肾间质纤维化作用，其机制可能与抗炎、抗氧化、降低TGF-β1及IGFBP-3的表达有关。钟星明等研究证明了穿心莲内酯可通过提高钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活性，降低羟脯氨酸含量，从而抑制心脏纤维化，起抗心肌肥厚作用。SinghaP等研究显示穿心莲内酯对乙醇引起的小鼠肝肾损伤具有一定的保护作用。RoyDN等研究证明穿心莲内酯与D-青霉胺联合治疗铜中毒比单一D-青霉胺在抗纤维化及细胞坏死方面效果更佳。本专利技术人在前期研究中(CN1978437；CN100999520；CN100999535；CN101003527)获得了大量结构新颖的穿心莲内酯衍生物，并对部分衍生物在抗肿瘤、抗炎、抗HBV、HCV及急性肝损伤保护作用等应用申请了专利保护，本专利技术人还对15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在制备抗肝纤维化药物中的应用进行了保护(申请号：201710214066.4)。进一步通过对15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在除了肝脏以外的其它组织(器官)纤维化方面进行了活性试验研究，目前未见相关文献报道。
技术实现思路
本专利技术人在前期研究成果的基础上，通过对合成的化合物进行抗人体组织或器官纤维化活性筛选，发现15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物具有显著的预防和治疗纤维化相关疾病的作用，高效低毒，具有开发为抗纤维化药物的潜力。为此，本专利技术目的在于提供15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在制备抗肺、肾和心脏纤维化药物中的应用。所述15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物结构如通式1所示。通式1其中：R1、R2分别为氢或苯基和它们的单取代、多取代物中的一种；R1、R2分别为环己基、环戊基等环状取代基团中的一种；R1、R2可以是相同的取代基团或者不同的取代基团。R3、R4分别为氢或CH2CH2COOHCH2CH2CH2CH2COOH、CH2CHCHCH2COOH、CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2COOH等中的一种或COR5，R5为取代或者未取代的苯基、吡啶基、吡咯基、呋喃基等芳香杂环或环己基、环戊基、环丙基、吗啉基、哌啶基等碳环或者杂环结构以及饱和或者不饱和的C1-18长度的碳链等。R3、R4可以同时是相同的取代基团或者不同的取代基团。优选如下化合物：R1，R2各自为氢或苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.结构如通式1所示的15‑苄亚基‑14‑脱氧‑11,12‑脱氢穿心莲内酯衍生物在制备药物中的应用，其特征在于，将其作为活性成份用于制备抗肾、肺或心肌纤维化药物；

【技术特征摘要】
2018.03.02 CN 201810174773X1.结构如通式1所示的15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在制备药物中的应用，其特征在于，将其作为活性成份用于制备抗肾、肺或心肌纤维化药物；其中：R1，R2各自为氢或苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3，5-三甲氧基苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、2-氟-3-甲氧基苯基、3-甲氧基-4-氯苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二溴苯基、2-氟-4-氯苯基、2-溴-4-氯苯基、3-氟-4-氯苯基、3-溴-4-氯苯基、3，4-二氟苯基、3，4-二氯苯基、3，4二溴苯基、2-氯-4-氟苯基、2-溴-4-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-溴-4-氟苯基、2-氟-4-溴苯基、2-氯-4-溴苯基、3-氟-4-溴苯基、3-氯-4-溴苯基、2，3，4-三氯苯基、2-甲氧基-4-氯苯基、2-羟基-4-氯苯基、2-羟基-4-甲氧基苯基、3-氨基-4-氯苯基、2-氨基-4-氯苯基，2-硝基-4-氟苯基，2-硝基-4-氯苯基，R1，R2同时相同或不同但不同时为氢；R3、R4各自为氢；或R3、R4分别为CH2CH2COOH或CH2CH2CH2CH2COOH、CH2CHCHCH2COOH、CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2COOH中的一种，或R3、R4各自为COR5，R5为取代或者未取代的苯基、吡啶基、吡咯基、呋喃基或环己基、环戊基、环丙基、吗啉基、哌啶基或饱和或者不饱和的C1-18长度的碳链；R3、R4选相同或不同的取代基团。2.如权利要求1所述的15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在制备药物中的应用，其特征在于，R1，R2各自为氢或苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3，5-三甲氧基苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、2-氟-3-甲氧基苯基、3-甲氧基-4-氯苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二溴苯基、2-氟-4-氯苯基、2-溴-4-氯苯基、3-氟-4-氯苯基、3-溴-4-氯苯基、3，4-二氟苯基、3，4-二氯苯基、3，4二溴苯基、2-氯-4-氟苯基、2-溴-4-氟苯基、3-氯-4-氟苯基、3-溴-4-氟苯基、2-氟-4-溴苯基、2-氯-4-溴苯基、3-氟-4-溴苯基、3-氯-4-溴苯基、2，3，4-三氯苯基、2-甲氧基-4-氯苯基、2-羟基-4-氯苯基、2-羟基-4-甲氧基苯基、3-氨基-4-氯苯基、2-氨基-4-氯苯基，2-硝基-4-氟苯基，2-硝基-4-氯苯基，但R1，R2不同；R3、R4各自为氢；或R3、R4分别为CH2CH2COOH、CH2CH2CH2CH2COOH、CH2CHCHCH2COOH、CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2COOH中的一种，或者R3、R4各自为COR5，R5为3-吡啶基或CH2CH2COOH，R3、R4选相同取代基团。3.如权利要求1所述的15-苄亚基-14-脱氧-11,12-脱氢穿心莲内酯衍生物在制备药物中的应用，其特征在于，当R1，R2其中之一为氢时，R1，R2其中之一...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴桂馥，王亚可，徐海伟，赵安琪，赵进，张淑秋，王丙顺，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：河南,41