一种肝素检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种肝素检测试剂盒及其应用，涉及抗凝效果检测技术领域，具体而言，该肝素检测试剂盒包括有肝素检测试剂，肝素检测试剂包括有肝素酶I，肝素酶I为液体酶制剂，长期保存需要进行冻干后固体保存，而在肝素酶I中加入一定量的无水氯化钙、丙三醇以及D‑海藻糖能够作为保护剂使检测检测试剂长期稳定地存在，达到可以长期保存的要求。该肝素检测试剂盒能够快速、特异地中和肝素的抗凝血活性，而不影凝血的其他血液成分，以更加精准快速地评估肝素钠盐的残留情况，评估肝素钠盐的抗凝效果，为临床用药提供依据。

A Kit for Heparin Detection and Its Application

The invention discloses a heparin detection kit and its application, which relates to the technical field of anticoagulant effect detection. Specifically, the heparin detection kit includes heparin detection reagent, heparin detection reagent includes heparin enzyme I, heparin enzyme I is a liquid enzyme preparation, which needs solid preservation after freeze-drying for long-term preservation, and a certain amount of anhydrous calcium chloride and tri-C in heparin enzyme I is added. Alcohols and D trehalose can be used as protective agents to make the detection reagents exist stably for a long time and meet the requirements of long-term preservation. The heparin detection kit can quickly and specifically neutralize the anticoagulant activity of heparin without affecting other blood components of coagulation, so as to evaluate the residual situation of heparin sodium salt more accurately and rapidly, and evaluate the anticoagulant effect of heparin sodium salt, so as to provide a basis for clinical medication.

【技术实现步骤摘要】
一种肝素检测试剂盒及其应用
本专利技术涉及抗凝效果检测
，具体而言，涉及一种肝素检测试剂盒及其应用。
技术介绍
肝素钠盐是一种抗凝剂，是需要迅速达到抗凝作用的首选药物。目前临床上可用于外科预防血栓形成以及妊娠者的抗凝治疗。对于急性心肌梗死患者，可用肝素预防病人发生静脉栓塞，并可预防大块的前壁透壁性心肌梗死病人发生动脉栓塞，用于心脏、手术和肾脏透析时维持血液体外循环畅通。治疗各种原因引起的弥散性血管内凝血(DIC)，也用于治疗肾小球肾炎、肾病综合征、类风湿性关节炎等。目前，临床上对肝素抗凝效果评价主要用APTT(活化部分凝血酶时间)来评估，血液中有肝素钠盐物质存在将导致APTT延长，但易受先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ降低，纤维蛋白原缺乏，纤溶活力增强或其他抗凝物质都会影响检测结果的准确性。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种肝素检测试剂盒，该试剂盒能够快速、特异地中和肝素的抗凝血活性，而不影凝血的其他血液成分，以更加精准快速地评估肝素钠盐的残留情况，评估肝素钠盐的抗凝效果，为临床用药提供依据。本专利技术的第二目的在于提供一种肝素检测试剂的制备方法，其能够有效快速地制备出能够精准检测肝素抗凝效果的肝素检测试剂。本专利技术的第三目的在于提供一种活化凝血检测试剂盒，其包括有能够有效快速地制备出能够精准检测肝素抗凝效果的肝素检测试剂。本专利技术的第四目的在于提供上述肝素检测试剂在血栓弹力图仪检测或凝血检测中的应用，其能够快速精准检测肝素抗凝效果。本专利技术是这样实现的：本专利技术实施例提供一种肝素检测试剂盒，其包括有肝素检测试剂，该肝素检测试剂包括有肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖，其中肝素酶I为液态。肝素酶I为液体酶制剂，长期保存需要进行冻干后固体保存，而本专利专利技术人通过长期的创造性劳动，将无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖与肝素酶I结合，使肝素酶I能够长期稳定的以液体的形式保存，简化了操作过程，加快实验进度，提高检测效率，同时也降低了运输以及保存成本，实用性强。具体地，在肝素检测试剂中，肝素酶I的浓度为60％-80％(5IU/ml-10IU/ml)、无水氯化钙的浓度为0.05％-0.4％、丙三醇的浓度为0.2％-0.8％以及D-海藻糖的浓度为0.2％-0.8％。本专利技术实施例还提供了一种肝素检测试剂的制备方法，其包括有以下步骤：将肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖混合。具体地，肝素酶I的浓度为60％-80％(5IU/ml-10IU/ml)、无水氯化钙的浓度为0.05％-0.4％、丙三醇的浓度为0.2％-0.8％以及D-海藻糖的浓度为0.2％-0.8％。进一步地，本专利技术实施例还提供了一种活化凝血检测试剂盒，其包括有肝素检测试剂以及活化凝血检测试剂。具体地，肝素检测试剂包括有肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖，其中，肝素酶I为液态。该肝素检测试剂中组分的配比和浓度同上，在此不在赘述。本专利技术实施例还提供上述肝素检测试剂盒或上述活化凝血检测试剂盒在血栓弹力图仪检测或凝血检测中的应用。具体地，血栓弹力图仪(thromboela-stogram,TEG)检测为一种从血小板聚集、凝血、纤溶等整个动态过程来监测凝血过程的分析仪，用于监测和分析血样的凝结状态。其原理是基于凝血过程的最终结果为形成血凝块,而血凝块的物理特性(血凝块强度和稳定性)决定其是否具有正常凝血功能。R值为血栓弹力图仪的检测参数，R为最初的纤维蛋白的形成的时间，R值延长代表使用抗凝剂，凝血因子缺乏；R值缩短：血液呈高凝状态。在本专利技术实施例中，血栓弹力图仪检测包括第一通道检测和第二通道检测：第一通道检测为检测活化凝血检测试剂诱导后的待测样品，该检测为普通杯检测，测得R普通杯；第二通道检测为将活化凝血检测试剂诱导后的待测样品与上述肝素检测试剂盒的肝素检测试剂或上述活化凝血检测试剂盒中的肝素检测试剂混合后检测，该检测为肝素酶杯检测，测得R肝素酶杯；然后，根据测得的R普通杯和R肝素酶杯判断肝素类药物对凝血的影响。具体地，在判断肝素类药物对凝血影响过程中：当|R普通杯﹣R肝素酶杯︱≤1min，则判断被检血样中不受肝素类物质影响；当R肝素酶杯﹤R普通杯，且R普通杯﹣R肝素酶杯≥1min，则判断待测样品受肝素类物质影响。进一步地，上述凝血检测为活化部分凝血酶时间检测。本专利技术具有以下有益效果：本专利技术实施例提供了一种肝素检测试剂盒及其制备方法，该肝素检测试剂盒包括有肝素检测试剂，肝素检测试剂包括有肝素酶I，肝素酶I为液体酶制剂，长期保存需要进行冻干后固体保存，而在肝素酶I中加入一定量的无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖能够作为保护剂使检测检测试剂长期稳定地存在，达到可以长期保存的要求。该肝素检测试剂盒能够快速、特异地中和肝素的抗凝血活性，而不影凝血的其他血液成分，以更加精准快速地评估肝素钠盐的残留情况，评估肝素钠盐的抗凝效果，为临床用药提供依据。本专利技术实施例还提供了一种活化凝血检测试剂盒及其应用，该活化凝血检测试剂盒包括有能够快速、特异地中和肝素的抗凝血活性，而不影凝血的其他血液成分。而将该活化凝血检测试剂盒应用于血栓弹力检测或凝血检测能够更加精准有效地检测肝素钠盐的残留情况，以评估肝素钠盐的抗凝效果。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1本实施例提供一种肝素检测试剂的制备方法，该制备方法包括以下步骤：将该肝素检测试剂包括：肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖；其中，肝素酶I为液态。具体地，肝素酶I的浓度为8IU/mL、无水氯化钙的浓度为0.2％、丙三醇的浓度为0.6％，以及D-海藻糖的浓度为0.6％。实施例2本实施例提供一种肝素检测试剂的制备方法，该制备方法与实施例1提供的方法大致相同，区别在于组分的不同，区别如下：将该肝素检测试剂按照质量百分比包括：肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖；其中，肝素酶I为液态。具体地，肝素酶I的浓度为7IU/mL、无水氯化钙的浓度为0.2％、丙三醇的浓度为0.5％，以及D-海藻糖的浓度为0.6％。实施例3本实施例提供一种肝素检测试剂的制备方法，该制备方法与实施例1、2提供的方法大致相同，区别在于组分的不同，区别如下：将该肝素检测试剂按照质量百分比包括：肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖；其中，肝素酶I为液态。具体地，肝素酶I的浓度为7IU/mL、无水氯化钙的浓度为0.3％、丙三醇的浓度为0.4％，以及D-海藻糖的浓度为0.4％。实施例4本实施例提供肝素检测试剂在血栓弹力图仪检测中的应用。在本实施例中，肝素检测试剂为实施例1提供的制备方法制备的肝素检测试剂。(1)在血栓弹力图仪的第一通道和第二通道上均装载样品杯，在两个通道的样品杯中均加入0.2mol/L氯化钙溶液20μL；(2)取1mL未离心的枸橼酸抗凝全血(待测血样)，将待测血样与活化凝血检测试剂(为现有技术，在此不再赘述)混合，上下颠倒5次后静置1min得到待测样品；(3)吸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肝素检测试剂盒，其特征在于，其包括肝素检测试剂，所述肝素检测试剂包括：肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D‑海藻糖；其中，所述肝素酶I为液态。

【技术特征摘要】
1.一种肝素检测试剂盒，其特征在于，其包括肝素检测试剂，所述肝素检测试剂包括：肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖；其中，所述肝素酶I为液态。2.根据权利要求1所述的肝素检测试剂盒，其特征在于，按照质量百分比，在所述肝素检测试剂中，所述肝素酶I的浓度为5IU/ml-10IU/ml、无水氯化钙的浓度为0.05％-0.4％、丙三醇的浓度为0.2％-0.8％以及D-海藻糖的浓度为0.2％-0.8％。3.一种肝素检测试剂的制备方法，其特征在于，其包括以下步骤：将肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖混合；所述肝素酶I的浓度为5IU/ml-10IU/ml、无水氯化钙的浓度为0.05％-0.4％、丙三醇的浓度为0.2％-0.8％以及D-海藻糖的浓度为0.2％-0.8％。4.一种活化凝血检测试剂盒，其特征在于，其包括有肝素检测试剂；所述肝素检测试剂包括有肝素酶I、无水氯化钙、丙三醇以及D-海藻糖；所述肝素酶I为液态。5.根据权利要求4所述的活化凝血检测试剂盒，其特征在于，所述肝素酶I的浓度为5IU/ml-10IU/ml、无水氯化钙的浓度为0.05％-0.4％、丙三醇的浓度为0.2％-0.8％以及D-...

【专利技术属性】
技术研发人员：张亚林，黄蓓，王华亮，戎剑，陈善钰，张自彬，陶光铖，
申请(专利权)人：贵州金玖生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52