一种具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物及其制备方法，该鬼臼毒素衍生物为8‑(3,4,5‑三羟乙氧基苯基)‑11,11a‑二氢‑8H‑[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3‑de]呋喃[3,4‑h]噌啉‑9(8aH)‑酮，本发明专利技术提供了一种结构新颖的鬼臼毒素衍生物及该鬼臼毒素衍生物的制备方法，该鬼臼毒素衍生物对正常细胞具有安全性，对肿瘤细胞具有明显的抑制作用；该鬼臼毒素衍生物的制备方法简单、安全、易于操作和控制。

A Podophyllotoxin Derivative with Anti-Tumor Activity and Its Preparation Method

The invention provides a podophyllotoxin derivative with anti-tumor activity and a preparation method thereof. The pododophyllototoxin derivative is 8 (3,4,5 3,4,5 trihydroxethoxyphenyl) 3 hydroxethoxyphenyl) 11,11a dihydrogen 8H [1,3] dioxide [4', 5':5,5,5,6] benzo [1,2,2,3 de] furfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfurfur [3,4,4 Toxin derivatives The preparation method shows that the podophyllotoxin derivative is safe to normal cells and has obvious inhibitory effect on tumor cells. The preparation method of the podophyllotoxin derivative is simple, safe, easy to operate and control.

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物及其制备方法
本专利技术涉及药物合成
，具体为一种具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物及其制备方法。
技术介绍
鬼臼毒素存在于小檗科多年生草本类群鬼臼亚科、山荷叶属、八角莲属、足叶草属和桃儿七属植物的根和茎中，其具有的抗肿瘤作用得到广泛关注，研究者对鬼臼毒素进行结构改造并研制出依托泊苷和替尼泊苷等临床一线抗肿瘤药物，其衍生物如NK-611、GL331等也进入药物临床前研究，虽然现有的已合成的鬼臼毒素类衍生物具有抗肿瘤活性，但是存在水溶性差的问题，导致其形成的制剂在体内的利用度较低的缺陷，不利于制剂的生产及制备。
技术实现思路
鉴于此，本专利技术提供了一种具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物及其制备方法，提供了一种结构新颖的鬼臼毒素衍生物及该鬼臼毒素衍生物的制备方法，该鬼臼毒素衍生物对正常细胞具有安全性，对肿瘤细胞具有明显的抑制作用；该鬼臼毒素衍生物的制备方法简单、安全、易于操作和控制。本专利技术的技术方案如下：一种具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物，其化学结构式为：制备上述具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物的方法，步骤如下：(1)把鬼臼毒素溶于四氢呋喃中，将反应温度降至-20℃，缓慢滴加二异丙基氨基锂的四氢呋喃溶液，滴加完后降温至-40℃，缓慢滴加羰基提供化合物，滴加完后，降温至-60℃，在-60℃条件下反应20min，然后升温至-40℃，在-40℃条件下反应20min，然后升至0℃，在0℃条件下反应30min，最后倒入冰水中，缓慢滴加稀盐酸溶液，调节反应液pH为中性，然后用二氯甲烷萃取反应液多次，浓缩反应液后得到6-醛基-鬼臼毒素；其中，鬼臼毒素与二异丙基氨基锂和羰基提供化合物的投料量摩尔比为1:2:10；(2)方法一：将6-醛基-鬼臼毒素和叠氮化钠加入到氯仿中，再缓慢滴加三氟乙酸，滴加完后缓慢升至室温，在室温条件下反应至原料反应完全，缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液，调节反应液pH为中性，分出有机相，有机相再经饱和氯化钠溶液洗涤，水相用氯仿萃取多次，合并有机相，浓缩后经硅胶柱层析分离得到4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素；方法二：将6-醛基-鬼臼毒素和TMS-N3加入到二氯甲烷中，滴加完后缓慢升至室温，在室温条件下反应原料反应完全，分出有机相，有机相再经饱和氯化钠溶液洗涤，水相用氯仿萃取多次，合并有机相，浓缩后经硅胶柱层析分离得到4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素；4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素的制备方法为方法一、方法二的任一种；(3)在高压釜中，把4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素和脱水剂加入四氢呋喃中，再向反应釜内通入氨气，使反应釜内的压力得到0.05MPa，在50℃条件下反应一段时间，反应结束后，向反应液中滴加稀盐酸溶液，固体析出，抽滤反应液，将滤饼加入二氯甲烷中，然后用碳酸钾溶液调节二氯甲烷溶液的pH为中性，至固体完全溶解，再用无水硫酸钠干燥反应液，然后对反应液抽滤，将抽滤液浓缩得到4-叠氮-6-亚甲氨基-鬼臼毒素；其中，4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素与脱水剂的投料量质量比为1:2；(4)把4-叠氮-6-亚甲氨基-鬼臼毒素加入到丙酮中，再加入铁基催化剂，加热回流至原料反应完全，过滤反应液；在减压条件下，对过滤后的反应液进行浓缩，去除溶剂四氢呋喃，然后将浓缩后的反应液进行硅胶柱层析，分离获得纯净的8-(3,4,5-三甲氧苯基)-11,11a-二氢-8H-[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3-de]呋喃[3,4-h]噌啉-9(8aH)-酮；(5)把8-(3,4,5-三甲氧苯基)-11,11a-二氢-8H-[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3-de]呋喃[3,4-h]噌啉-9(8aH)-酮放入四氢呋喃中，搅拌均匀后加入无水溴化锂，升温到30℃，搅拌均匀后溶液逐渐变澄清；加热回流至原料反应完全，停止加热，冷却至室温，水洗后减压旋蒸除去大部分四氢呋喃，获得浓缩液，向浓缩液中然后加入二氯甲烷，在室温条件下边搅拌边加入稀盐酸调节浓缩液的pH为3±0.5，然后会浓缩液进行萃取，水相用二氯甲烷萃取后合并有机相，将合并的有机相进行浓缩，浓缩后加入甲醇，有大量固体析出，继续浓缩至少量体积，再加入一定量甲醇，缓慢搅拌下，加热至回流搅拌一段时间，停止加热；油浴自然降至室温后用冰水浴冷却，搅拌后过滤，滤饼以冷甲醇洗涤，抽干后得到8-(3,4,5-三羟基苯基)-11,11a-二氢-8H-[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3-de]呋喃[3,4-h]噌啉-9(8aH)-酮；(6)在高压釜中，把8-(3,4,5-三羟基苯基)-11,11a-二氢-8H-[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3-de]呋喃[3,4-h]噌啉-9(8aH)-酮和PAMAM-OH树枝状聚合物加入到甲醇中，缓慢通入环氧乙烷，然后通入氮气使反应体系压强维持在0.2MPa，反应温度控制在80±0.5℃，保温反应5h后，立即降温终止反应，向反应液中滴加盐酸调节pH为4-5，再加入活性炭加热回流0.5h后，趁热过滤，将滤液冷却至10℃，在搅拌条件下结晶，然后进行过滤、真空干燥得到粗品；将得到的粗品加入正己烷，加热回流至完全溶解，加入活性炭，继续回流一段时间后，趁热抽滤，将滤液降至室温静置析晶，抽滤、干燥得到8-(3,4,5-三羟乙氧基苯基)-11,11a-二氢-8H-[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3-de]呋喃[3,4-h]噌啉-9(8aH)-酮。在上述具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物的制备方法的步骤(1)中，所述的羰基提供化合物为N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二乙基甲酰胺或N,N-二丁基甲酰胺。在上述具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物的制备方法的步骤(3)中，所述的脱水剂为无水硫酸钠、无水硫酸镁、无水氯化钙或无水氧化铝。在上述具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物的制备方法的步骤(4)中，所述的铁基催化剂为氯化亚铁、四氧化三铁或二氧化铁。在上述具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物的制备方法的步骤(6)中，所述的8-(3,4,5-三羟基苯基)-11,11a-二氢-8H-[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3-de]呋喃[3,4-h]噌啉-9(8aH)-酮与PAMAM-OH树枝状聚合物的投料量质量比为20:1～2。上述具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物在抗肿瘤中的应用。对比现有技术，本专利技术的有益效果在于：(1)提供了一种新的鬼臼毒素衍生物及其制备方法；(2)该鬼臼毒素衍生物易溶于水；(3)该鬼臼毒素衍生物对正常细胞具有安全性，对肿瘤细胞具有明显的抑制作用；(4)该鬼臼毒素衍生物的制备方法简单、安全、易于操作和控制。附图说明图1为鬼臼毒素分子与肿瘤细胞靶点蛋白结合示意图；图2为本专利技术提供的鬼臼毒素衍生物分子与肿瘤细胞靶点蛋白结合示意图。具体实施方式为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。本专利技术的实施例1-3提供了化合物6-醛基-鬼臼毒素的制本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物，其化学结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物，其化学结构式为：2.制备权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的鬼臼毒素衍生物的方法，其特征在于，步骤如下：(1)把鬼臼毒素溶于四氢呋喃中，将反应温度降至-20℃，缓慢滴加二异丙基氨基锂的四氢呋喃溶液，滴加完后降温至-40℃，缓慢滴加羰基提供化合物，滴加完后，降温至-60℃，在-60℃条件下反应20min，然后升温至-40℃，在-40℃条件下反应20min，然后升至0℃，在0℃条件下反应30min，最后倒入冰水中，缓慢滴加稀盐酸溶液，调节反应液pH为中性，然后用二氯甲烷萃取反应液多次，浓缩反应液后得到6-醛基-鬼臼毒素；其中，鬼臼毒素与二异丙基氨基锂和羰基提供化合物的投料量摩尔比为1:2:10；(2)方法一：将6-醛基-鬼臼毒素和叠氮化钠加入到氯仿中，再缓慢滴加三氟乙酸，滴加完后缓慢升至室温，在室温条件下反应至原料反应完全，缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液，调节反应液pH为中性，分出有机相，有机相再经饱和氯化钠溶液洗涤，水相用氯仿萃取多次，合并有机相，浓缩后经硅胶柱层析分离得到4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素；方法二：将6-醛基-鬼臼毒素和TMS-N3加入到二氯甲烷中，滴加完后缓慢升至室温，在室温条件下反应原料反应完全，分出有机相，有机相再经饱和氯化钠溶液洗涤，水相用氯仿萃取多次，合并有机相，浓缩后经硅胶柱层析分离得到4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素；4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素的制备方法为方法一、方法二的任一种；(3)在高压釜中，把4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素和脱水剂加入四氢呋喃中，再向反应釜内通入氨气，使反应釜内的压力得到0.05MPa，在50℃条件下反应一段时间，反应结束后，向反应液中滴加稀盐酸溶液，固体析出，抽滤反应液，将滤饼加入二氯甲烷中，然后用碳酸钾溶液调节二氯甲烷溶液的pH为中性，至固体完全溶解，再用无水硫酸钠干燥反应液，然后对反应液抽滤，将抽滤液浓缩得到4-叠氮-6-亚甲氨基-鬼臼毒素；其中，4-叠氮-6-醛基-鬼臼毒素与脱水剂的投料量质量比为1:2；(4)把4-叠氮-6-亚甲氨基-鬼臼毒素加入到丙酮中，再加入铁基催化剂，加热回流至原料反应完全，过滤反应液；在减压条件下，对过滤后的反应液进行浓缩，去除溶剂四氢呋喃，然后将浓缩后的反应液进行硅胶柱层析，分离获得纯净的8-(3,4,5-三甲氧苯基)-11,11a-二氢-8H-[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3-de]呋喃[3,4-h]噌啉-9(8aH)-酮；(5)把8-(3,4,5-三甲氧苯基)-11,11a-二氢-8H-[1,3]二氧[4',5':5,6]苯并[1,2,3-de]呋喃[3,4-h]噌啉-9(8aH)-酮放入四氢呋喃中，搅拌均匀后加入无水溴化锂...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宝亮，孙秀伟，刘晓斐，毛龙飞，姚小军，彭立增，
申请(专利权)人：济南爱思医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37