The present invention provides a strain producing L_high serine, which is characterized by having a single stable chromosome, without plasmid form or other free DNA vectors, knocking out or weakening one or more genes related to L_threonine synthesis on its chromosomal DNA, and/or mutating to enhance, and/or integrating one or more L_high serine substitutes on its chromosomal DNA. Genes related to metabolic pathways.
【技术实现步骤摘要】
一种L-高丝氨酸的生产菌株及其构建方法和应用
本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种L-高丝氨酸的生产菌株及其构建方法和应用。
技术介绍
L-高丝氨酸是一种天然存在的非蛋白氨基酸，作为生物合成苏氨酸、蛋氨酸和赖氨酸共有的中间体而少量存在于很多物种中。由于L-高丝氨酸具有L-型-α氨基酸的基本骨架，并且其γ-羟基具有多样的化学活性，因此，L-高丝氨酸及其衍生物作为医药中间体在药物学、生理学等方面有重要应用前景。目前，国内外生产L-高丝氨酸主要有以下几种方法：(1)化学法；该方法采用相对昂贵的L-蛋氨酸为原料，并使用具有严重生物毒性的碘甲烷或溴甲烷作为甲基化试剂，经亲核进攻以保护氨基，再在弱碱性条件下水解得到产物。该方法不仅成本高，并且需要使用碘化物、生成硫化物，对环境不友好；(2)化学手性拆分方法；该方法是利用混旋的高丝氨酸与手性试剂反应后，会形成非对应异构体的性质差异，由此分离出L-高丝氨酸。该方法产率低，试剂成本高且需使用大量有机溶剂，对环境有较大污染威胁。(3)生物酶催化法；该方法利用丙酮酸和甲醛在缩醛酶和L-氨基酸脱氢酶的共同作用下生成氨基酸高丝氨酸。该方...
【技术保护点】
1.一种L‑高丝氨酸的生产菌株，其特征在于，其具有单一稳定的染色体，不含质粒形式或其他游离DNA载体，其染色体DNA上一个或多个与L‑苏氨酸合成相关的基因被敲除或弱化，和/或被突变以增强，和/或其染色体DNA上整合拷贝一个或多个与L‑高丝氨酸代谢途径相关的基因。
【技术特征摘要】
1.一种L-高丝氨酸的生产菌株，其特征在于，其具有单一稳定的染色体，不含质粒形式或其他游离DNA载体，其染色体DNA上一个或多个与L-苏氨酸合成相关的基因被敲除或弱化，和/或被突变以增强，和/或其染色体DNA上整合拷贝一个或多个与L-高丝氨酸代谢途径相关的基因。2.如权利要求1所述的L-高丝氨酸的生产菌株，其特征在于，所述被敲除或弱化的基因为thrB和/或thrL；所述被突变以增强的基因为thrA和/或rhtA，所述整合拷贝的基因为thrA*、ppc、pntA、pntB、asd、aspA和aspC中的一个或多个。3.如权利要求1所述的L-高丝氨酸的生产菌株，其特征在于，所述L-高丝氨酸生产菌株由大肠杆菌种属构建。4.如权利要求3所述的L-高丝氨酸的生产菌株，其特征在于，所述菌株为大肠杆菌K-12野生型MG1655。5.一种L-高丝氨酸生产菌株的构建方法，包括以下步骤中一步或多步：A、构建菌株中一个或多个与L-高丝氨酸代谢途径相关的基因被敲除或...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢新开，徐伟，
申请(专利权)人：四川利尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51
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