一种L-高丝氨酸生产菌株及其构建方法和应用技术

本发明专利技术的L‑高丝氨酸生产菌株中的一个或多个与L‑高丝氨酸代谢途径相关的基因被敲除或弱化，并且/或者一个或多个与L‑高丝氨酸代谢途径相关的基因被过表达或增强，并且/或者一个或多个与L‑高丝氨酸代谢途径相关的基因被突变。本发明专利技术还提供了该生产菌株的构建方法以及其应用。本发明专利技术的L‑高丝氨酸生产菌株，具有产量高、成本低、条件温和、环境污染少等诸多优点，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种L-高丝氨酸生产菌株及其构建方法和应用本申请为申请日为2017年2月27日、申请号为201710106474.8、专利技术名称为“一种L-高丝氨酸生产菌株及其构建方法和应用”的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种L-高丝氨酸生产菌株及其构建方法和应用。
技术介绍
L-高丝氨酸是一种天然存在的非蛋白氨基酸，作为生物合成苏氨酸、蛋氨酸和赖氨酸共有的中间体而少量存在于很多物种中。由于L-高丝氨酸具有L-型-α氨基酸基本骨架，并且其γ-羟基具有多样的化学活性，因此，L-高丝氨酸及其衍生物作为医药中间体在药物学、生理学等方面有重要应用前景。目前，国内外生产L-高丝氨酸主要有以下几种方法：(1)化学法；该方法合成L-高丝氨酸主要是采用相对昂贵的L-蛋氨酸为原料，并使用具有严重生物毒性的碘甲烷或溴甲烷作为甲基化试剂，经亲核进攻以保护氨基，再在弱碱性条件下水解得到产物。该方法不仅成本高，并且需要使用碘化物、生成硫化物，对环境不友好；(2)化学手性拆分方法；该方法是利用混旋的高丝氨酸与手性试剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种L-高丝氨酸生产菌株，其特征在于，所述L-高丝氨酸生产菌株中的thrB基因被弱化；thrL基因被敲除；thrA基因被突变为thrA*，且所述thrA*具有抑制产物的反馈抑制的特性；以及rhtA、thrA*、ppc、pntAB和asd基因被过表达或增强，其中所述rhtA的过表达或增强通过rhtA23实现，所述thrB基因的弱化通过thrB基因的氨基酸序列的R235H突变实现，所述thrA*是通过thrA基因的氨基酸序列的G433R突变实现。/n

【技术特征摘要】
1.一种L-高丝氨酸生产菌株，其特征在于，所述L-高丝氨酸生产菌株中的thrB基因被弱化；thrL基因被敲除；thrA基因被突变为thrA*，且所述thrA*具有抑制产物的反馈抑制的特性；以及rhtA、thrA*、ppc、pntAB和asd基因被过表达或增强，其中所述rhtA的过表达或增强通过rhtA23实现，所述thrB基因的弱化通过thrB基因的氨基酸序列的R235H突变实现，所述thrA*是通过thrA基因的氨基酸序列的G433R突变实现。


2.根据权利要求1所述的L-高丝氨酸生产菌株，其特征在于，所述L-高丝氨酸生产菌株属于大肠杆菌种属。


3.一种权利要求1或2所述的L-高丝氨酸生产菌株的构建方法，其特征在于，包括任意顺序的以下步骤：
A、弱化菌株中的thrB基因；
B、过表达菌株中的rhtA基因；
C、敲除菌株中的thrL基因；
D、突变菌株中的thrA基因为thrA*，所述thrA*具有抑制产物的反馈抑制的特性；
E、将含有thrA*基因、asd基因、pcc基因和pntAB基因的重组质粒转入菌株中；
即获得了L-高丝氨酸生产菌株；
其中所述rhtA的过表达通过rhtA23实现，所述thrB基因的弱化通过thrB基因的R235H突变实现，所述thrA*是通过thrA基因的氨基酸序列的G433R突变实现。


4.根据权利要求3中所述的L-高丝氨酸生产菌株的构建方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢新开，徐伟，刘婷，
申请(专利权)人：四川利尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51