The invention relates to a method and preparation for preparing mature red blood cells from peripheral blood in vitro, in particular to a Lin in peripheral blood.
【技术实现步骤摘要】
利用外周血体外制备成熟红细胞的方法及制剂
本专利技术涉及干细胞与细胞再生领域，特别涉及一种利用外周血体外制备成熟红细胞的方法及直接，还涉及利用所述方法制备得到的成熟红细胞，以及单个核细胞用于制备成熟红细胞的用途。
技术介绍
众多周知，输血是治疗严重缺血患者(例如：急性贫血、严重的血小板减少症、血友病)的救命手段，但是目前在临床医学中存在很多的问题，主要体现在血液短缺以及输血风险两个方面。临床用血短缺一直是全国乃至全球医疗健康领域存在的问题，据研究显示，医疗临床用血量每年以两位数的比例逐年呈增长趋势，而与此同时，合格献血者数量在减少，再加上我国部分地方陆续取消互助献血，导致了严重的血液供需矛盾-供不应求；并且不容忽视的是，通过同种异体输血的方式还存在血源传播性疾病传播的风险，由于血液存在“窗口期”，很多新型病原体在检测期间是不会被检测出来的，从而带来了一定程度的输血风险。另外输血医学还面临着抗原/抗体不匹配导致患者发生免疫反抗以及稀有血型患者难以及时得到合适的血源的问题，以上种种用血问题引发了人们对临床用血问题的关注，如何解决用血紧张的问题，成为了迫在眉睫的难题。为...
【技术保护点】
1.利用外周血体外制备成熟红细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1：从外周血中提取Lin
【技术特征摘要】
1.利用外周血体外制备成熟红细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1：从外周血中提取Lin-CD34-细胞；步骤S2：富集Lin-CD34-细胞；步骤S3：诱导所述Lin-CD34-细胞向红系分化并进行扩增；以及步骤S4：通过红细胞脱核得到成熟的红细胞。2.根据权利要求1所述的利用外周血体外制备成熟红细胞的方法，其特征在于，在步骤S1中，利用添加牛血清白蛋白和EDTA的细胞分离缓冲液重悬细胞，添加生物素标记的抗体以及链霉亲和素标记的磁珠，磁力作用下去除带有特殊表面标志物的细胞，提取Lin-CD34-细胞。3.根据权利要求1或2任一所述的利用外周血体外制备成熟红细胞的方法，其特征在于，在步骤S2中，在第0-5天，将所述Lin-CD34-细胞接种干细胞扩增培养基中，并添加添加细胞因子组合以及青链霉素，富集Lin-CD34-细胞；在步骤S3中，将步骤S2得到的Lin-CD34-细胞接种到分化第一阶段培养基，其中所述分化第一阶段培养基内只提供向红系发育相关的细胞因子，继续培养9-11天，诱导Lin-CD34-细胞向红系分化并扩增；在步骤S4中，将步骤S4中得到的Lin-CD34-细胞接种到分化第二阶段培养基，其中所述分化第二阶段培养基相对于所述分化第一阶段培养基缺少部分细胞因子，继续培养至7-9天，促进红细胞脱核成熟。4.根据权利要求3所述的利用外周血体外制备成熟红细胞的方法，其特征在于，所述细胞因子组合包括但不限于50-100ng/ml重组人类fms样酪氨酸激酶3配体、50-100ng/ml重组人干细胞因子、50-100ng/ml重组人白细胞介素三、200-800pg/ml重组人白细胞介素六。5.根据权利要求3所述的利用外周血体外制备成熟红细胞的方法，其特征在于，所述生物素标记的抗体包括但不限于生物素标记的鼠抗人C...
【专利技术属性】
技术研发人员：高晓飞，黄彦杰，张清，
申请(专利权)人：西湖生物医药科技杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。