一种中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量检测方法技术

本发明专利技术涉及一种中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量检测方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取中链甘油三酯，加入甲醇溶解并稀释，摇匀，得到供试品溶液；(2)对照品溶液的制备：取辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯对照品，加入甲醇溶解并稀释，得到混合对照品溶液；(3)含量测定：精密量取供试品溶液和混合对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法分别以峰面积计算供试品中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量。本发明专利技术的测定方法实用性强，操作简便、结果准确、重现性好，为中链甘油三酯的质量标准制订及制备工艺筛选提供数据支持和参考，保证甘油二酯测定的科学性和先进性。

A method for determination of octanoic glyceride and decanoic glyceride in medium chain triglycerides

The present invention relates to a method for determination of octanoic glycerol diester and decanoic glycerol diester in medium chain triglycerides, including the following steps: (1) preparation of sample solution: dissolving and diluting the medium chain triglyceride with methanol, shaking it evenly, and obtaining sample solution; (2) preparation of reference solution: taking the reference substance of octanoic glycerol diester and decanoic glycerol, dissolving it with methanol and adding methanol. Dilute and get mixed reference solution; (3) Content determination: Precise quantity of sample solution and mixed reference solution is injected into liquid chromatography to record chromatogram, and the content of octanoic glycerol diester and decanoic glycerol diester in sample is calculated by peak area according to external standard method. The method has strong practicability, simple operation, accurate results and good reproducibility, and provides data support and reference for the formulation of the quality standard of medium chain triglycerides and the screening of the preparation process, so as to ensure the scientificity and advancement of the determination of glycerides.

【技术实现步骤摘要】
一种中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量检测方法
本专利技术涉及一种中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量检测方法，属于药用原料与食品检测领域。
技术介绍
中链甘油三酯(Medium－chaintriglycerides，MCT)，又名中链油，是由椰子CocosnucifemL.的胚乳硬干部分或由油棕ElaeisguineensisJacq.的干胚乳提取的脂肪油分离出的脂肪酸-辛癸酸混合酸，与甘油酯化而成的饱和脂肪酸的甘油三酯混合物。一般认为，典型的MCT是指饱和辛酸甘油三酯或饱和癸酸甘油三酯或饱和辛酸-癸酸混合的甘油三酯，属于一种天然油酯的改性产品。国内外多年来应用证明其为一种安全可靠的产品，可作为乳化剂、润滑剂和稳定剂广泛应用，作为药品、食品、保健品及化妆品等生产的原辅料。目前在药品生产中应用的中链甘油三酯，被用做中/长链脂肪乳注射液的生产原料。以中碳链脂肪酸(MCFA)和甘油为原料，通过化学或酶催化工艺制备医用中链甘油三酯，其中甘油二酯是其中一种主要副产物。甘油二酯(Diacylglycerol，DG)是一类甘油三酯(Triacylglycerol，TG)中一个脂肪酸被烃基取代的结构脂质，是天然植物油脂中的微量成分，主要存在1,3-DG和1,2-DG两种同分异构体，其含量常小于5％，是公认安全的食品成分，同时也是一种多功能添加剂，在食品、医药、化工等行业有着广阔的应用前景。为了获得满足医用注射脂肪乳要求的中链结构酯原料，就需要对副产物甘油二酯进行控制。目前国内外专利、文献中，尚未有关于中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯绝对量测定方法的报道。目前，最常用的甘油二酯分析方法有薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱法(GC)等几种。TLC法的缺点是精度不高，GC法的缺点是需要高温柱、响应值波动大、重现性差等，HPLC法最适合分析甘油二酯含量。HPLC法根据检测器种类大体上HPLC-UV、HPLC-ELSD等多种方法。HPLC-UV明显的缺点是紫外检测器对脂肪酸双键数非常敏感，因此饱和度不同的物质可以产生差异巨大的响应值，在做油脂的定量分析方面可行性差。HPLC-ELSD法属质量型检测方法，是最适合、最通用的酯类分析方法，具有分辩率高、速度快、灵敏度高、色谱柱可反复使用等优点。中链甘油三酯中含甘油二酯总量不超过2％，因为成分复杂而且含量低，用高效液相进行测定会受甘油三酯主成分峰的干扰影响，甘油二酯也存在着同分异构体，所以要把色谱峰进行完全分离后，再进行辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的绝对量测定难度非常大。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量检测方法，本专利技术的检测方法实用性强、操作简便、结果准确、重现性好，为中链甘油三酯的质量标准制订及制备工艺筛选提供数据支持和参考。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量检测方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取中链甘油三酯，加入甲醇溶解并稀释，摇匀，得到供试品溶液；(2)对照品溶液的制备：取辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯对照品，加入甲醇溶解并稀释，得到辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的混合对照品溶液；(3)含量测定：精密量取供试品溶液和混合对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法分别以峰面积计算供试品中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量。作为本专利技术所述检测方法的优选实施方式，所述步骤(1)中，中链甘油三酯与甲醇的质量体积比为200mg：10mL。作为本专利技术所述检测方法的优选实施方式，所述步骤(2)中，精密称取辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯对照品，加入甲醇溶解并稀释，制成每1mL甲醇含辛酸甘油二酯分别为70μg、150μg、210μg、300μg、450μg，含癸酸甘油二酯分别为30μg、60μg、90μg、120μg、180μg的混合对照品溶液。作为本专利技术所述检测方法的优选实施方式，所述步骤(3)中，液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；检测器：蒸发光散射检测器；流动相：以体积比为8:2的乙腈-水混合溶剂为流动相A，以体积比为1:1的乙腈-异丙醇混合溶剂为流动相B进行梯度洗脱；所述流动相梯度洗脱的条件为：0～10min，流动相中A(76％)，流动相中B(24％)；10～30min，流动相中A(76％→30％)，流动相中B(24％→70％)；30～40min，流动相中A(30％)，流动相中B(70％)；40～50min，流动相中A(30％→76％)，流动相中B(70％→24％)；50～60min，流动相中A(76％)，流动相中B(24％)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；分别精密量取供试品溶液和混合对照品溶液20μL，注入高效液相色谱仪，测定。作为本专利技术所述检测方法的优选实施方式，所述步骤(3)中，外标法的具体操作为：精密量取不同浓度的混合对照品溶液20μL注入液相色谱仪，测得不同浓度混合对照品溶液的峰面积，以混合对照品溶液峰面积对数值为纵坐标，以相对应混合对照品溶液浓度对数为横坐标作标准曲线，分别计算得线性回归方程；另精密量取供试品溶液20μL注入液相色谱仪，测得供试品中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的峰面积，分别用回归方程计算辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量。辛酸甘油二酯有1,3-辛酸甘油二酯、1,2-辛酸甘油二酯两个同分异构体，所以1,3-辛酸甘油二酯、1,2-辛酸甘油二酯的含量计算时，同时采用辛酸甘油二酯作为对照品，辛酸甘油二酯含量为两者之和。同理，癸酸甘油二酯有1,3-癸酸甘油二酯、1,2-癸酸甘油二酯两个同分异构体，所以1,3-癸酸甘油二酯、1,2-癸酸甘油二酯的含量计算时，同时采用癸酸甘油二酯作为对照品，癸酸甘油二酯含量为两者之和。作为本专利技术所述检测方法的优选实施方式，所述C18色谱柱的规格为250mm×4.6mm，5μm。作为本专利技术所述检测方法的优选实施方式，所述检测器的漂移管温度为72℃，载气流速为2.0mL/min，增益值为4，模式为分流模式。作为本专利技术所述检测方法的优选实施方式，所述辛酸甘油二酯的含量为1,3-辛酸甘油二酯、1,2-辛酸甘油二酯的含量之和，均采用混合对照品溶液中辛酸甘油二酯作为对照；所述癸酸甘油二酯的含量为1,3-癸酸甘油二酯、1,2-癸酸甘油二酯的含量之和，均采用混合对照品溶液中癸酸甘油二酯作为对照。相对于现有技术，本专利技术的有益效果为：(1)本专利技术建立了一种简便、准确可靠的测定方法，采用液相色谱分离技术，蒸发光散射检测器检测，利用液相外标法计算中链甘油三酯中甘油二酯成分的含量，供试品直接用甲醇溶解，不需经过水解、氧化酶、衍生化、酯化等步骤，即可利用液相测定并计算其辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯成分的含量；(2)本专利技术的液相色谱系统分离效果好，供试品的甘油二酯成分色谱峰峰形良好，各色谱峰之间分离度优，均达基线分离，故该检测方法能准确有效地测定中链甘油三酯样品中甘油二酯成分的含量；(3)本专利技术的测定方法实用性强，操作简便、结果准确、重现性好，为中链甘油三酯的质量标准制订及制备工艺筛选提供数据支持和参考，保证甘油二酯测定的科学性和先进性。附图说明图1为本专利技术辛酸甘油二本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取中链甘油三酯，加入甲醇溶解并稀释，摇匀，得到供试品溶液；(2)对照品溶液的制备：取辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯对照品，加入甲醇溶解并稀释，得到辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的混合对照品溶液；(3)含量测定：精密量取供试品溶液和混合对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法分别以峰面积计算供试品中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量。

【技术特征摘要】
1.一种中链甘油三酯中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取中链甘油三酯，加入甲醇溶解并稀释，摇匀，得到供试品溶液；(2)对照品溶液的制备：取辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯对照品，加入甲醇溶解并稀释，得到辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的混合对照品溶液；(3)含量测定：精密量取供试品溶液和混合对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法分别以峰面积计算供试品中辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯的含量。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中，中链甘油三酯与甲醇的质量体积比为200mg：10mL。3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中，精密称取辛酸甘油二酯和癸酸甘油二酯对照品，加入甲醇溶解并稀释，制成每1mL甲醇含辛酸甘油二酯分别为70μg、150μg、210μg、300μg、450μg，含癸酸甘油二酯分别为30μg、60μg、90μg、120μg、180μg的混合对照品溶液。4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中，液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱；检测器：蒸发光散射检测器；流动相：以体积比为8:2的乙腈-水混合溶剂为流动相A，以体积比为1:1的乙腈-异丙醇混合溶剂为流动相B进行梯度洗脱；所述流动相梯度洗脱的条件为：0～10min，流动相中A(76％)，流动相中B(24％)；10～30min，流动相中A(76％→30％)，流动相中B(24％→70％...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁北梅，袁诚，许文东，李咏华，王小妹，曾静凯，唐顺之，王国财，牟肖男，
申请(专利权)人：广州白云山汉方现代药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44