一种替米考星颗粒含量检测前处理方法技术

本发明专利技术公开了一种替米考星颗粒含量检测前处理方法，操作简便快速、检测数据结果准确；而且本发明专利技术针对颗粒的特点，使替米考星原料在检测时易于与载体辅料以及辅料分离，使替米考星颗粒含量检测更加准确，相对误差较少、回收率高、准确性好、重复性高、检测限达到0.015μg/ml，更能准确把控替米考星颗粒的实际含量质量，对替米考星缓释颗粒生产发展有重大的意义。

A Pre-treatment Method for Timicocin Particle Content Detection

The invention discloses a pretreatment method for temicosin granule content detection, which is simple, fast and accurate in operation; moreover, according to the characteristics of particles, the invention makes the raw materials of temicosin easy to be separated from carrier accessories and accessories in detection, and makes the temicosin granule content detection more accurate, with less relative error, high recovery rate, good accuracy, high repeatability, and so on. The detection limit is 0.015 ug/ml, which can more accurately control the actual content and quality of telmicosin granules. It is of great significance for the production and development of telmicosin sustained-release granules.

【技术实现步骤摘要】
一种替米考星颗粒含量检测前处理方法
本专利技术属于兽药领域，关于一种替米考星颗粒含量检测前处理方法。
技术介绍
替米考星(Tilmicosin)，化学名称为4A-O-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-L-核糖-吡喃己基)-20-脱氧-20-(3，5-二甲基-1-哌啶基)-[20(顺式：反式)泰乐菌素。属第4代大环内酯类抗生素，属于动物专用。猪蓝耳病为免疫抑制性疾病，大量的研究结果显示，动物专用抗生素替米考星在防控猪蓝耳病方面具有明显的效果，目前替米考星制剂主要包括替米考星预混剂、替米考星溶液、替米考星注射液等。但由于替米考星味道极苦，口服制剂在使用过程中存在适口性问题，注射剂由于存在一些副作用等问题，一直都被较少应用。在适口性方面，微丸或者微囊颗粒制剂则是首选。其用天然或人工合成的可成膜的高分子材料包裹上固态或液态药物，包括合成药、半合成药、生物制品等，成为药库型微型胶囊，简称微囊。微囊从最初的毫米范围粒径发展到现在的微米级范围，甚至达到较小的纳米范围。微丸是制备长效制剂的首选方法，由于微丸结构的特殊性减低了药物在靶部位的扩散速度，因此延长了药物在体内的过程。药物微囊化后可改善被包裹药物的物理性质，便于贮藏和运输；屏蔽被包裹药物的气味及味道，增加适口性；改善被包裹药物的外界环境，增加其稳定性；减少被包裹药物的刺激，防止药物失活；提高生物活性物质的活性及稳定性；达到缓释控释的目的，增加药物浓度维持时间；阻止药物活性成分间发生反应，减少复方制剂的配伍禁忌。由于微囊颗粒具有适口性好，容易保存，有缓释的效果，能增加药物浓度维持时间，减少用药量等特点，替米考星微囊颗粒具有较好的发展前景，针对目前国内还没有针对替米考星微囊颗粒的检测方法，因此研究出一种能够准确测量替米考星微囊颗粒的前处理方法及检测方法具有十分重要的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的之一在于一种替米考星颗粒含量检测前处理方法。本专利技术所采取的技术方案是：一种替米考星颗粒含量检测的前处理方法，包括以下步骤：(1)称取样品，加入三氯甲烷，一边添加一边振摇使其溶解，再加入三氯甲烷得溶液；(2)将溶液过滤取续滤液；(3)将续滤液置于分液漏斗，加入磷酸，振摇静置，弃去三氯甲烷层，取水层并过滤取滤液。进一步的，步骤(1)所述的样品中的替米考星与三氯甲烷的质量体积比为：0.2～0.3g:40～60ml。进一步的，步骤(2)先弃去初滤液约10～15ml，再收集续滤液5～20ml。进一步的，步骤(3)所述的续滤液与磷酸的体积比为5～15:50～150。进一步的，步骤(3)震摇3～15分钟。进一步的，步骤(3)静置1～5分钟。进一步的，步骤(3)加入磷酸后替米考星的浓度为400～600μg/ml。进一步的，所述方法适用于载体辅料为单硬脂酸甘油酯、硬脂醇、硬脂酸、氢化蓖麻油、饱和甘油三脂、石蜡、聚乙二醇-4000和动物蜡中的至少一种的替米考星颗粒；所述方法适用于辅料为淀粉、轻质碳酸钙、二氧化硅的至少一种的替米考星颗粒；进一步的，适用于重量为15％～20％的替米考星颗粒。一种替米考星颗粒含量的检测方法，采用上述替米考星颗粒含量检测的前处理方法所得的滤液用于后续替米考星颗粒含量检测。进一步的，所述的后续替米考星颗粒含量检测包括使用液相色谱进行检测。进一步的，所述的液相色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶(250mm×4.6mm，5μm)为填充剂流动相：水-乙腈-磷酸二丁胺溶液-四氢呋喃(805：115：25：55)检测波长：280nm流速：1.0ml/min进样量：10μl。进一步的，所述方法适用于载体辅料为单硬脂酸甘油酯、硬脂醇、硬脂酸、氢化蓖麻油、饱和甘油三脂、石蜡、聚乙二醇-4000和动物蜡中的至少一种的替米考星颗粒；所述方法适用于辅料为淀粉、轻质碳酸钙、二氧化硅的至少一种的替米考星颗粒；进一步的，适用于重量为15％～20％的替米考星颗粒。本专利技术的有益效果是：本专利技术的前处理方法操作简便快速、检测数据结果准确；本专利技术针对颗粒的特点，使替米考星原料在检测时易于与载体辅料以及辅料分离，使替米考星颗粒含量检测更加准确，相对误差较少、回收率高、准确性好、重复性高、检测限达到0.015μg/ml，更能准确把控替米考星颗粒的实际含量质量，对替米考星缓释颗粒生产发展有重大的意义。附图说明图1为空白样品色谱图；图2为对照品色谱图；图3为0.015μg/ml溶液色谱图；图4为0.035μg/ml溶液色谱图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但并不局限于此。本实施例1～3的替米考星样品含有替米考星、高分子载体辅料以及辅料，所述高分子载体辅料为能溶解于三氯甲烷，或者加入三氯甲烷后能使颗粒分散的材料；所述高分子载体辅料为：单硬脂酸甘油酯、硬脂醇、硬脂酸、氢化蓖麻油、饱和甘油三脂、石蜡、聚乙二醇-4000、动物蜡中的一种或任意配比；所述适宜的辅料为淀粉、轻质碳酸钙、二氧化硅中的一种或任意配比。实施例11.取样品适量，精密称定，置于50ml容量瓶中，加入三氯甲烷20ml，边加边振摇使替米考星溶化，用三氯甲烷补足至50ml得到溶液。2.用滤纸将上述步骤1中的溶液过滤，先弃去初滤液10ml，收集续滤液。3.精密移取上述步骤2中的续滤液5.00ml置于分液漏斗中，精密加入磷酸溶液50ml，振摇3min后放置静置1分钟，使其分层，弃去三氯甲烷层，取水层，用滤纸过滤取滤液。4.精密量取上述步骤3中的滤液10μl注入液相色谱仪中，记录色谱图。另取替米考星对照品同法测定。按外标法以顺式和反式异构体峰面积的和，按下式计算，即得。含量(cx)＝cR×(Ax/AR)，式中：cR为对照品浓度。Ax为供试品的峰面积。AR为对照品的峰面积。5.检测仪器以及检测色谱条件为：检测仪器：高效液相色谱仪色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶(250mm×4.6mm，5μm)为填充剂流动相：水-乙腈-磷酸二丁胺溶液-四氢呋喃(805：115：25：55)检测波长：280nm流速：1.0ml/min进样量：10μl。此样品含有15％替米考星(含有替米考星0.20g)、高分子载体辅料单硬脂酸甘油酯以及辅料淀粉、轻质碳酸钙。实施例21.取样品适量，精密称定，置于50ml容量瓶中，加入三氯甲烷25ml，边加边振摇使替米考星颗粒溶化，用三氯甲烷补足至50ml得到溶液。2.用滤纸将上述步骤1中的溶液过滤，先弃去初滤液12ml，收集续滤液。3.精密移取上述步骤2中的续滤液10.00ml置于分液漏斗中，精密加入磷酸溶液100ml，振摇10min后放置静置3min使其分层，弃去三氯甲烷层，取水层，用滤纸过滤取滤液。4.精密量取上述步骤3中的滤液10μl注入液相色谱仪中，记录色谱图。另取替米考星对照品同法测定。按外标法以顺式和反式异构体峰面积的和计算，即得。5.检测仪器以及检测色谱条件为：检测仪器：高效液相色谱仪色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶(250mm×4.6mm，5μm)为填充剂流动相：水-乙腈-磷酸二丁胺溶液-四氢呋喃(805：115：25：55)检测波长：280nm流速：1.0ml/min进样量：10μl。此样品中含有替米考星20％(含有替米考星0.25g)、高分子载体辅料硬脂醇、硬脂酸、氢化蓖麻油以及辅料二氧化硅。实施例31.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种替米考星颗粒含量检测的前处理方法，包括以下步骤：(1)称取样品，加入三氯甲烷，一边添加一边振摇使其溶解，再加入三氯甲烷得溶液；(2)将溶液过滤取续滤液；(3)将续滤液置于分液漏斗，加入磷酸，振摇静置，弃去三氯甲烷层，取水层并过滤取滤液。

【技术特征摘要】
1.一种替米考星颗粒含量检测的前处理方法，包括以下步骤：(1)称取样品，加入三氯甲烷，一边添加一边振摇使其溶解，再加入三氯甲烷得溶液；(2)将溶液过滤取续滤液；(3)将续滤液置于分液漏斗，加入磷酸，振摇静置，弃去三氯甲烷层，取水层并过滤取滤液。2.根据权利要求1所述的替米考星颗粒含量检测前处理方法，其特征在于，步骤(1)所述的样品中替米考星与三氯甲烷的质量体积比为：0.2～0.3g:40～60ml。3.根据权利要求1所述的替米考星颗粒含量检测前处理方法，其特征在于，步骤(2)先弃去初滤液约10～15ml，再收集续滤液5～15ml。4.根据权利要求1所述的替米考星颗粒含量检测前处理方法，其特征在于，步骤(3)所述的续滤液与磷酸的体积比为5～15:50～150。5.根据权利要求1所述的替米考星颗粒含量检测前处理方法，其特征在于，步骤(3)振摇3～15分钟。6.根据权利要求1所述的替米考星颗粒含量检测前处理方法，其特征在于，步骤(3)静置1～5分钟。7.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎剑坤，刘肖娟，黎健业，张秀英，谭志坚，黄显会，王俊，
申请(专利权)人：佛山市正典生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44