【技术实现步骤摘要】
一种鲜蜂王浆中氟喹诺酮类成分的检测方法
本专利技术涉及蜂王浆检测
,尤其涉及一种鲜蜂王浆中氟喹诺酮类成分的检测方法。
技术介绍
蜂蜜是由蜜蜂采集花蜜而来,富含人体必须的各类营养物质,如葡萄糖、果糖、氨基酸、酶类、矿物和抗氧化物质等,是重要的天然食品。蜂王浆是由工蜂的舌腺和上颚腺分泌的混合物质,具有非常好的保健和药用价值。然而,实际生产中蜜蜂容易受到细菌、真菌、病毒和外来寄生螨类的侵染而引起病害。控制和治疗这些疾病通常的方法是直接饲喂兽药或者在蜂巢中喷洒兽药,因此可能导致蜂蜜和蜂王浆等蜂产品中的兽药残留问题,对消费者造成潜在威胁。喹诺酮类药物作为一种常用抗生素类兽药,在养蜂生产中通常用来防治和治疗各类细菌疾病,尤其是可以有效地防治美洲幼虫腐臭病引起的蜜蜂数量减少和蜂蜜产量降低。目前,一些文献中报道了蜂蜜或蜂王浆中喹诺酮类药物残留的检测方法,主要有液相色谱法和液相色谱-串联质谱法,因液相色谱-串联质谱法检出限低、灵敏度和精确度高而广泛使用,它也是我国蜂蜜和蜂王浆中的规定方法。前处理方法多采用固相萃取技术,因其都需要分别经过净化、浓缩等一些列过程,操作复杂、费时费力,灵敏度和重复性差。目前,很少有能够简单、快速的样品前处理方法用于检测蜂王浆中喹诺酮类药物残留。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鲜蜂王浆中氟喹诺酮类成分的检测方法,具有样品前处理简单、快速的优点。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案得以实现的:一种鲜蜂王浆中氟喹诺酮类成分的检测方法,包括如下的检测步骤,(1)样品前处理:步骤1:提取,称取2g鲜蜂王浆样品至50ml离心管中,在离心管中加 ...
【技术保护点】
1.一种鲜蜂王浆中氟喹诺酮类成分的检测方法,其特征在于,包括如下的检测步骤,(1)样品前处理:步骤1:提取,称取2g鲜蜂王浆样品至50ml离心管中,在离心管中加入5.0ml乙酸锌溶液震荡5min溶解样品,向样品溶液中加入10ml乙酸乙酯,震荡提取10min后,加入1.0g氯化钠和4.0g无水硫酸锌,涡动1min后,震荡5min,8000‑10000rpm条件下离心5min;步骤2:净化,准确移取上清液5.0ml于装有500mg PSA 的15 mL 离心管中,振荡5min,6000rpm 离心5min,取上清液1.0 mL 于2 mL 离心管中30℃下氮气吹干;步骤3:上清液氮气吹干后,向离心管中加入500μL 碳酸钠溶液涡旋复溶,再加入500μL 丹磺酰氯‑丙酮溶液立刻涡旋混匀;于60℃加热15min;衍生化结束后,置于4℃冰箱冷藏10min;最后样品溶液过0.2μm 滤膜;(2)样品检测:利用氟诺喹酮类药物的检测试剂盒检测。
【技术特征摘要】
1.一种鲜蜂王浆中氟喹诺酮类成分的检测方法,其特征在于,包括如下的检测步骤,(1)样品前处理:步骤1:提取,称取2g鲜蜂王浆样品至50ml离心管中,在离心管中加入5.0ml乙酸锌溶液震荡5min溶解样品,向样品溶液中加入10ml乙酸乙酯,震荡提取10min后,加入1.0g氯化钠和4.0g无水硫酸锌,涡动1min后,震荡5min,8000-10000rpm条件下离心5min;步骤2:净化,准确移取上清液5.0ml于装有500mgPSA的15mL离心管中,振荡5min,6000rpm离心5min,取上清液1.0mL于2mL离心管中30℃下氮气吹干;步骤3:上清液氮气吹干后,向离心管中加入500μL碳酸钠溶液涡旋复溶,再加入500μL丹磺酰氯-丙酮溶液立刻涡旋混匀;于60℃加热15min;衍生化结束后,置于4℃冰箱冷藏10min;最后样品溶液过0.2μm滤膜;(2)样品检测:利用氟诺喹酮类药物的检测试剂盒检测。2.根据权利要求1所述的一种鲜蜂王浆中氟喹诺酮类成分的检测方法,其特征在于,所述氟喹诺酮类药物的检测试剂盒的检测方法包括如下步骤,S1.氟喹诺酮类试剂盒回升至室温;S2.取出需要数量的微孔板备齐并插入微孔架上,记录样品和标准品对应微孔并按顺序编号,每个样品和标准孔做2孔平行试验;S3.加标准品/样品,吸取50μL诺氟沙星标准溶液至对应的微孔中,吸取50μL样品溶液于其余微孔中,吸取75μL诺氟沙星单克隆抗体和甲状腺过氧化物酶标记羊抗鼠抗抗体的混合液于每个微孔中轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置25℃避光环境中反应30min;S4.洗板、揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液250μL/孔,充分洗涤三次,每次间隔10s,用吸水纸拍干;S5.显色:加入底物显色A液50μl/孔,底物显色B液50μl/孔,轻轻振荡混匀...
【专利技术属性】
技术研发人员:张暘,
申请(专利权)人:杭州康力食品有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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