磁微粒凝集解离剂制造技术

本发明专利技术公开了一种磁微粒凝集解离剂是由去垢剂、蛋白变性剂、蛋白水解酶、助溶剂和基础液配制而成，其中各组分的配制比例为：每100mL解离剂中包含去垢剂0.1~1g，蛋白变性剂0~20g,蛋白水解酶10000~5000U，助溶剂0.1~0.5mL,余量为基础液。本发明专利技术的优点在于：在以磁微粒为固相载体的化学发光反应过程中，将该解离剂加入磁珠和样本的反应体系中，可有效的抑制反应过程中磁珠间的聚集，亦可有效的分散已聚集磁珠；增加了试剂的精密性，减少因磁珠凝集造成的异常结果；同时本发明专利技术配制的解离剂不影响试剂组分的使用性能和分析性能。

【技术实现步骤摘要】
磁微粒凝集解离剂
本专利技术涉及一种解离剂，尤其是涉及一种能解决磁微粒化学发光反应过程中磁微粒相互聚合凝集的解离剂。
技术介绍
磁珠(Magneticbeads,MB)，是由微粒技术发展起来的一类新型材料。粒径在几百纳米到数十微米不等，是由内部磁性材料（γ-Fe2O4、Fe3O4等铁的氧化物）和外层高分子材料（聚苯乙烯、多糖等）构成，通常保存在液态中形成浅棕色的乳浊液。磁微粒根据合成条件的不同，其具有超顺磁性、较高的比表面积、可修饰功能基团等特性。可以使其表面带有化学功能基团，如-OH、-NH2、-COOH等，使得磁珠几乎可以偶联任何具有生物活性的蛋白。磁珠表面可以通过共价键结合抗体等生物分子，再与相对应的靶物质结合形成新的复合物。在通过磁场时，这种复合物可被滞留，与其它组分相分离，分离简便易行，分离纯度高，保留靶物质活性，且高效、快速、低毒，可广泛应用于细胞分离和提纯、免疫检测、核酸分析和基因工程、作靶向释药的载体等领域。目前，磁微粒广泛应用于免疫诊断行业。磁微粒化学发光免疫分析技术综合了磁微粒载体技术和化学发光免疫检测技术，使测量结果更准确，更稳定。磁微粒用于化学发光领域的方法包括间接法、竞争法，夹心法。磁微粒的应用增加了包被表面积，增加抗原或抗体的吸附量，使反应速度加快，也使清洗和分离更简便，从而减少污染，降低交叉污染概率；反应中使用碱性磷酸酶（ALP）或者辣根酶（HRP）标记抗原或抗体，作用于其底物由其在激发态与基态的动力学变化中发生发光反应。磁微粒化学发光产品在存放和运输及反应过程中，由于磁微粒混悬液倒置或者倾斜有出现磁微粒的板结的可能性，从而影响磁微粒的分散性，导致检测结果异常。另外，在磁微粒混悬液与样本反应过程中，受样本中红细胞、纤维蛋白、脂蛋白、糖蛋白等粘性蛋白或长链蛋白桥连作用的影响，导致反应过程中磁珠凝集，减少与酶标抗体的结合，影响试剂盒的试剂使用性能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种磁微粒凝集解离剂，以解决磁微粒化学发光反应过程中磁微粒相互聚合凝集、影响试剂盒使用性能的问题。为实现上述目的，本专利技术可采取下述技术方案：本专利技术所述的磁微粒凝集解离剂是由去垢剂、蛋白变性剂、蛋白水解酶、助溶剂和基础液配制而成，其中各组分的配制比例为：每100mL解离剂中包含去垢剂0.1~1g，蛋白变性剂0~20g,蛋白水解酶10000~5000U，助溶剂0.1~0.5mL,余量为基础液。本专利技术所述基础液为中性缓冲液，优选pH7.35的磷酸盐缓冲液。本专利技术所用去垢剂为阴离子去垢剂（如SDS）、两性离子去垢剂（如CHAPS）或中性离子去垢剂（如PEG400、CHAPS或TritionX-100）。本专利技术所用蛋白变性剂可选用尿素或盐酸胍（优选尿素）。本专利技术所用蛋白水解酶可选用尿激酶或外切酶（优选尿激酶）。本专利技术所用助溶剂可选用吐温、PEG或异辛醇，优选PEG400。本专利技术的优点在于：在以磁微粒为固相载体的化学发光反应过程中，将该解离剂加入磁珠和样本的反应体系中，可有效的抑制反应过程中磁珠间的聚集，亦可有效的分散已聚集磁珠；增加了试剂的精密性，减少因磁珠凝集造成的异常结果；同时本专利技术配制的解离剂不影响试剂组分的使用性能和分析性能。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术做更加详细的介绍，以便于本领域技术人员的理解。实施例1配制100mL能提高磁珠分散性及促进已凝集磁珠分散的解离剂准确称量0.5g阴离子去垢剂SDS，10g尿素，4000U尿激酶，0.5mLPEG400，采用pH7.35的磷酸盐缓冲液作为基础液定容至100mL。实施例2本专利技术配制的解离剂的应用在以磁微粒为固相载体的化学发光反应过程中：首先加入定量样本和磁微粒混悬液；然后加入含有本专利技术解离剂的样本稀释液，反应17min；洗涤后加入酶结合物，在37℃条件下反应17min；洗板后加入发光底物，检测其相对发光值。实施例3效果检测为验证本专利技术制备的解离剂在反应过程中对提高磁珠分散性及促进已凝集磁珠分散效果方面的作用，下面以丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒为例，以在样稀和酶稀中加入本专利技术所述解离剂为实验组，以未加解离剂的样稀为对照，验证本专利技术解离剂在促进磁珠分散方面的应用。在郑州市某医院进行临床验证，检测了457份血清管样本和148份EDTA管血浆，阳性样本共40份，其中：血清管样本对照组聚集4例，改进组聚集1份；EDTA血浆管样本出现36例样本聚集。从表中可以看出，加入解离剂的实验组，反应过程中磁珠凝集有明显改善的作用。表明，本专利技术所述的解离剂对解决反应过程中磁珠凝集有明显改善效果。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磁微粒凝集解离剂，其特征在于：是由去垢剂、蛋白变性剂、蛋白水解酶、助溶剂和基础液配制而成，其中各组分的配制比例为：每100mL解离剂中包含去垢剂0.1~1g，蛋白变性剂0~20g, 蛋白水解酶10000~5000U，助溶剂0.1~0.5mL,余量为基础液。

【技术特征摘要】
1.一种磁微粒凝集解离剂，其特征在于：是由去垢剂、蛋白变性剂、蛋白水解酶、助溶剂和基础液配制而成，其中各组分的配制比例为：每100mL解离剂中包含去垢剂0.1~1g，蛋白变性剂0~20g,蛋白水解酶10000~5000U，助溶剂0.1~0.5mL,余量为基础液。2.根据权利要求1所述的磁微粒凝集解离剂，其特征在于：所述基础液为中性缓冲液。3.根据权利要求2所述的磁微粒凝集解离剂，其特征在于：所述中性缓...

【专利技术属性】
技术研发人员：晋高伟，王新明，孙冯博，刘功成，乔晓芳，李晓霞，郑业焕，渠海，付光宇，吴学炜，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41