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灰树花葡聚糖合成酶、其编码基因及应用制造技术

技术编号:20857590 阅读:34 留言:0更新日期:2019-04-13 11:20
本发明专利技术属于食用菌遗传和基因工程技术领域,具体涉及一种灰树花葡聚糖合成酶、其编码基因及应用;本发明专利技术首次从灰树花菌丝体基因组中克隆得到葡聚糖合成关键酶‑葡聚糖合成酶的编码基因,并通过基因沉默证明该基因在灰树花菌丝体生长和葡聚糖合成过程中的关键角色;最后通过基因工程技术,在灰树花中过表达葡聚糖合成酶,显著提高了重组菌株菌体生长和葡聚糖合成产量;本发明专利技术将有助于从分子水平理解食药用真菌多糖的合成机制,开展食药用真菌多糖合成的代谢工程研究和高效发酵生产品质稳定的葡聚糖提供重要的技术支持和参考。

【技术实现步骤摘要】
灰树花葡聚糖合成酶、其编码基因及应用
本专利技术属于食用菌遗传和基因工程
,具体涉及一种灰树花葡聚糖合成酶、其编码基因及应用。
技术介绍
食药用真菌多糖是当前国内外研究十分活跃的领域之一,其在细胞识别、细胞间物质运输、免疫调节及抗肿瘤等诸多重要的生物过程中起到关键作用。其中,葡聚糖是由D-葡萄糖之间通过β-1,3和/或β-1,6糖苷键链接聚合而成的多糖,具有显著的免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、抗病毒和降血脂等生理功能,因此被称为“生物反应调节物”。然而,食药用真菌多糖的合成过程极为复杂,参与合成的底物和酶系众多,且可参考的技术方法严重不足,因而对其了解和认识十分有限。研究发现,葡萄糖作为灵芝发酵的碳源时,除供菌体自身生长需求外,还会被多种核苷酸糖合成酶(如UDP-葡萄糖焦磷酸化酶、UDP-葡萄糖-4-差向异构酶、GDP-甘露糖焦磷酸化酶和dTDP-葡萄糖焦磷酸化酶等)转化为相应的UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、GDP-甘露糖和dTDP-鼠李糖等核苷酸糖,并推测其可能经糖转移酶转运至多糖合成位点最终聚合成菌丝体多糖或胞外多糖。因此,要实现食药用真菌葡聚糖高效而稳定的合成,还需明确葡聚本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的灰树花葡聚糖合成酶的编码基因,其包括SEQ ID NO .1所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种分离的灰树花葡聚糖合成酶的编码基因,其包括SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的编码基因,其特征在于,所述基因还包括SEQIDNO.2、SEQIDNO.3和SEQIDNO.4所示的核苷酸序列。3.根据权利要求1-2任一项所述的编码基因,其特征在于,所述基因包括SEQIDNO.9所示的基因保守序列。4.权利要求1-3任一项所述基因在改变灰树花葡聚糖合成量中的用途;所述用途包括上调或下调灰树花葡聚糖的合成量。5.权利要求1-3中任一项所述编码基因编码的蛋白。6.含有SEQIDNO.9所示核苷酸序列的重组表达载体。7.根据权利要求6所述的载体,所述载体还包括灰树花gpd启动子序列和构巢曲霉35s启动子序列,所述灰树花gpd启动子序列如SEQIDNO.10所示,所述构巢曲霉35s启动子序列如SEQIDNO.11所示。8.含...

【专利技术属性】
技术研发人员:崔凤杰朱鸿安陶庭磊孙文敬昝新艺
申请(专利权)人:江苏大学
类型:发明
国别省市:江苏,32

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